一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于预防兽医领域，具体涉及一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒及其制备方法和应用。本发明专利技术发现了非洲猪瘟病毒DP71L蛋白能够抑制cGAS+MITA或MITA诱导的IFNβ的活性，本发明专利技术还提供一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒，该重组非洲猪瘟病毒是将非洲猪瘟病毒的DP71L基因缺失后得到的。将本发明专利技术构建的基因缺失非洲猪瘟病毒感染细胞，与野生毒株比较显示，毒力减弱；将本发明专利技术构建的基因缺失非洲猪瘟病毒免疫猪后，无死亡等临床症状，血液病毒含量在感染后期显著降低，存活率均为100％，表明该重组病毒充分致弱，作为疫苗是非常安全的。因此可以将上述DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒在制备非洲猪瘟疫苗中进行应用，具有相应的社会价值。

A recombinant African swine fever virus with dp71l gene deletion and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒及其制备方法和应用
本专利技术涉及预防兽医领域，具体为非洲猪瘟病毒潜在疫苗研发和防治，细节涉及到一种天然免疫抑制基因DP71L敲除的重组非洲猪瘟病毒及其构建方法和应用。
技术介绍
ASFV(AfricanswinefeverVirus)是非洲猪瘟病毒科，非洲猪瘟病毒属的唯一成员，主要感染家猪、野猪、疣猪以及钝缘软蜱(TulmaneTal.,2009)，是一种急性、烈性、高度接触性传染病，病毒感染动物死亡率可达到100％。目前尚未研发出有效疫苗和药物预防或治疗。该病毒可以通过各种途径进行传播，如接触、粪便，蜱虫叮咬等，主要在非洲、欧洲、北美洲、加勒比海区域和俄罗斯等多个国家流行，于2018传入中国，在我国所有省、自治区、直辖市均有报道。目前采取的是扑杀进行疫情预防，我国扑杀猪只超过120万头，导致猪存栏数锐减、肉价飞涨，对我国养猪业、经济稳定发展和猪肉供应带来严峻挑战。所以该病成为威胁我国乃至全球养猪业的头号疫病(GogineTal.,2013；ZhoueTal.,2018)。依据我国基本国情以及现本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.非洲猪瘟病毒的DP71L基因或DP71L蛋白在制备抑制cGAS和MITA或MITA诱导IFNβ的制剂中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.非洲猪瘟病毒的DP71L基因或DP71L蛋白在制备抑制cGAS和MITA或MITA诱导IFNβ的制剂中的应用。


2.一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒，其特征在于，该重组非洲猪瘟病毒是将非洲猪瘟病毒的DP71L基因缺失后得到的。


3.根据权利要求2所述的一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒，其特征在于，所述的非洲猪瘟病毒为非洲猪瘟病毒中国流行株ASFV/CN/GS/2018。


4.根据权利要求3所述的一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒，其特征在于，所述DP71L基因序列如SEQIDNO:1所示。


5.权利要求2所述的一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒的制备方法，其特征在于，通过同源重组方式将原始野生野生非洲猪瘟病毒中的DP71L基因缺失后得到缺失DP71L基因的非洲猪瘟病毒。


6.根据权利要求5所述的一种DP71L基因缺失的重组非洲猪瘟病毒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）同源重组转移载体的构建：设计DP71L基因ORF上下游序列作为同源重组臂，与eGFP基因片段克隆入骨架载体pUC57中，得到同源重组转移质粒，所述eGFP基因使用CD2V基因(p72)启动子进行表达；
（2）细胞转染和重组病毒...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑海学，马旭升，宋锐，党文，冯涛，曾宗波，罗志宽，莫希丁·乔杜里，张克山，毛若箐，田宏，杨帆，刘湘涛，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：甘肃;62