一种光敏检测系统及其制作方法和应用技术方案

本发明专利技术公开了一种光敏检测系统及其制作方法和应用，检测系统包括包被有特定光敏剂的光敏微球和配体受氧能量转换微球。检测系统的制作方法为制作光敏剂、制作光敏微球、制作配体微球。本发明专利技术还公开一种上述光敏检测系统制作抗心磷脂抗体IgA的测定试剂的应用方法。本发明专利技术光敏检测系统中的光敏剂结构牢固不易分解，稳定性好，系统的感光效果好，灵敏度高，具有良好的市场价值。

【技术实现步骤摘要】
一种光敏检测系统及其制作方法和应用
本专利技术涉及生物分子
，具体涉及一种光敏检测系统及其制作方法和应用。
技术介绍
Lumigen公司专利技术的一种均相化学发光法，使用化学发光标记物标记抗原或抗体，同时使用过氧化物酶标记另一株抗原或抗体，一起去检测样本中的分析物；在纯液相环境下在激光的作用下产生化学发光，达到定量检测的手段。上述方法虽然达到了均化化学发光的检测目的，且具有检测低浓的试剂时具有较好稳定性的有点，但其线性范围比较窄，也存在着局限性，不利广面推广，对检测分子量比较大的蛋白，容易产生钩状效应。最早的光敏剂可以追溯古埃及，古埃及人曾服用含有光敏剂的药物，然后通过外源性的激光的照射用来治疗白癜风，而在近代又发现了铁卟啉的光敏剂。现在临床上治疗疾病及检测疾病时用经常用到光敏剂，但也在应用中发现存在的问题，如：在液像环境下易被分解，能量转化比较延迟，均一性差等。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述问题，提供一种使用两种不同的波长相结合的高分子化物合成的光敏剂及以其制作的检测系统，本专利技术的方案如下：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种光敏检测系统，其特征在于，包括：/n(1)包被有特定光敏剂的光敏微球；/n(2)配体受氧能量转换微球(以下简称配体微球)；/n所述光敏剂的制作方法为：以重量份数计，将50-100份的四氨基酞菁铜、2.12-3.15份四氟邻苯二甲腈、0.02-0.10份氯化铜(Ⅱ)、30-90份羟基乙酸乙酯、50-120份碳酸钾和800-1200份吡啶加入到15000份甲苯中，在氮气的保护下加热回流反应4-8小时；真空蒸除溶剂后，用氯仿溶解过滤，滤液减压正干后，在正己烷中重结晶得到所述光敏剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种光敏检测系统，其特征在于，包括：
(1)包被有特定光敏剂的光敏微球；
(2)配体受氧能量转换微球(以下简称配体微球)；
所述光敏剂的制作方法为：以重量份数计，将50-100份的四氨基酞菁铜、2.12-3.15份四氟邻苯二甲腈、0.02-0.10份氯化铜(Ⅱ)、30-90份羟基乙酸乙酯、50-120份碳酸钾和800-1200份吡啶加入到15000份甲苯中，在氮气的保护下加热回流反应4-8小时；真空蒸除溶剂后，用氯仿溶解过滤，滤液减压正干后，在正己烷中重结晶得到所述光敏剂。


2.一种根据权利要求1所述的光敏检测系统的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、制作光敏剂，光敏剂的制作方法与权利要求1相同；
S2、制作光敏微球
取用羧基化微球，经水和乙醇洗涤后，在30000rpm下离心15-20分钟，加入氨基乙醇，采用油浴法在105℃和搅拌的条件下加热，加热10分钟后加入S1所述光敏剂，加入光敏剂后5分钟加入氢氧化钠；然后在两小时内缓慢降低至室温；冷却后，混合物用乙醇稀释，然后在30000rpm下离心30min，弃去上清，在乙醇中超声重悬沉淀；重复离心，沉淀以水重悬，然后再以乙醇水溶液重悬，得到光敏微球；
S3、制作配体微球
包括：制备配体微球能量剂；使用配体微球能量剂标记待检测物的亲和素；使用标记待检测物亲和素的配体微球能量剂制备配体微球。


3.根据权利要求2所述的一种光敏检测系统的制作方法，其特征在于，S3中所述制备配体微球能量剂的方法为：
①制作配体微球能量剂前体a
在500ml无水甲醇中加入10-23.0克醋酸铵，16.3克N-[(2’-吡啶基)-2一氧代乙基]吡啶碘化合物，和10.76克1-(3-吡啶基)-3-(二甲氨基)-2-丙烯-1-酮溶液在搅拌下回流24小时。反应液冷至室温后，在-15℃放置1小时，过滤收集沉淀，用冷甲醇(-10℃--20℃)充分洗涤后，产品用乙腈重结晶，得配体微球能量剂前体a；
②制作配体微球能量剂前体b
将4.5克配体微球能量剂前体a加入到45ml硫酸45ml醋酸12ml水混合的溶液中；在75-80℃下搅拌反应48小时后，反应液加入到300ml冰水中，过滤收集沉淀，用水充分洗涤后，再用无水乙醇洗涤；真空干燥后得到4.8克水解产物；在400ml无水甲醇中，外部用冰水冷却下加入8克氯化亚砜，搅拌15分钟后，加入4.80克上述水解产物，反应液搅拌回流8小时后，室温下继续搅拌16小时后，用无水硫酸钠干燥；蒸去溶剂后，生成物用硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-甲醇(99:1)展开，收集最先洗出的第一部分。蒸去溶剂后，产品用甲苯重结晶，真空干燥，得得到配体微球能量剂前体b；
③制作配体微球能量剂前体c
将1.94克配体微球能量剂前体b(2.8mmol)加入到120ml乙醇中，然后加入4克氢氧化钾和10ml水，反应液搅拌回流3小时；减压蒸去溶剂，将生成物溶于150ml水中，过滤除去微量不溶物，向搅拌下的溶液中缓慢滴入的三氟乙酸水溶液到三氟乙酸水溶液；充分洗涤，真空干燥，制得到配体微球能量剂前体c；
④制作配体微球能量剂
将配体微球能量剂前体c在盛有P2O5真空干燥器中充分干燥后，取181.7mg溶于5ml干燥N,N-二甲基甲酰胺中，搅拌下加入34.5mg的N-羟基琥珀酰胺(NHS)和61.9mg的N,N’-二环已基碳二亚胺(DCC)，室温下搅拌24小时后，过滤除去不溶物；滤液减压浓缩除去溶剂后，生成物用少量异丙醇洗涤，真空干燥，得配体微球能量剂。


4.根据权利要求2所述的一种光敏检测系统的制作方法，其特征在于，S3中所述配体微球的制作方法为：4ml20％浓度的80nm的羧基化微球(400mg)以4ml水+4ml无水乙醇，洗涤2次，30000rpm离心15分钟，以3ml氨基乙醇稀释在25ml圆烧瓶中反应，瓶中置一个磁力搅拌子；油加热至105℃搅拌10min,然后加入40mg标记待检测物亲和素的配体微球能量剂溶液搅拌5min；然后在5分钟内缓慢加入1ml0.1MNaOH，在上述过程中，油溶液的温度一直保持在105℃然后温度并在2小时内慢慢降到室温；冷却后，混合物用乙醇稀释到...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜旭忠，
申请(专利权)人：杜旭忠，
类型：发明
国别省市：浙江;33