一种真空辅助快速制备无免疫原性兔脱细胞气管基质方法技术

本发明专利技术公开一种真空辅助快速制备无免疫原性兔脱细胞气管基质方法，包括如下步骤：以新鲜气管为原料，在4℃无菌蒸馏水中渗透溶解24h，随后置于含有0.25％脱氧胆酸钠和0.25％Triton‑X 100的溶液在37℃恒温摇床以60rpm转速孵育24h，无菌蒸馏水洗涤后置于含2000kU/L Dnase‑Ⅰ和4000U/L RNase的1mol/L NaCl溶液在37℃恒温摇床以60rpm转速孵育24h，以溶解细胞核并降解DNA，以上操作均在‑0.96Bar的真空环境下进行，本研究采用真空辅助脱细胞方法能够促进DNA酶及RNA酶的渗透作用，加速并切底清除基质中细胞核物质及其他免疫原性成分，制备出无免疫原性的脱细胞细胞外基质，从而解决异体移植后免疫排异及严重炎症反应等并发症问题，同时，该方法还保留有适当的血管再生因子,有利于异体移植后诱导血管新生。

A vacuum assisted method for rapid preparation of acellular tracheal matrix in rabbits

【技术实现步骤摘要】
一种真空辅助快速制备无免疫原性兔脱细胞气管基质方法
本专利技术涉及生物工程
，尤其是涉及一种真空辅助快速制备无免疫原性兔脱细胞气管基质方法。
技术介绍
气管病损可由狭窄、软化、感染、创伤、肿瘤等引起。长段气管(超过成人50％或儿童30％)病变是外科手术的棘手难题，目前行之有效的办法是气管替代治疗。气管替代治疗始于上世纪，因替代物难以获取、微血管网再生障碍以及需要大量使用免疫抑制剂，使得种种研究均以失败告终。组织工程气管具有构建更新、再生与修复功能的活气管替代物的潜能。气管支架材料的结构及成分对种子细胞的黏附、生长、迁移以及组织功能重建起着至关重要的作用。细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)是组织工程重要组成部分，天然生物材料(如纤维蛋白、藻酸盐、同种异体脱细胞基质)具有较好的生物相容性、生物可降解性、以及可促进血管新生性能，是机体内细胞生长的微环境中最主要的成分，在调节细胞的生物学行为方面其重要作用。脱细胞ECM具有促进体内组织修复和再生功能，还可以指导和调节细胞(增殖和分化)反应，支持骨髓间充质干细胞(M本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种真空辅助快速制备无免疫原性兔脱细胞气管基质方法，其特征在于，包括如下操作步骤：/n步骤一：以新鲜气管为原料，在4℃无菌蒸馏水中渗透溶解24h；/n步骤二：将气管置于含有0.25％脱氧胆酸钠和0.25％Triton-X 100的溶液在37℃恒温摇床以60rpm转速孵育24h；/n步骤三：采用无菌蒸馏水洗涤气管后置于含2000kU/L Dnase-Ⅰ和4000U/L RNase的1mol/L NaCl溶液在37℃恒温摇床以60rpm转速孵育24h。/n以上操作步骤均在-0.96Bar的真空环境下进行。/n

【技术特征摘要】
1.一种真空辅助快速制备无免疫原性兔脱细胞气管基质方法，其特征在于，包括如下操作步骤：
步骤一：以新鲜气管为原料，在4℃无菌蒸馏水中渗透溶解24h；
步骤二：将气管置于含有0.25％脱氧胆酸钠和0.25％Triton-X100的溶液在37℃恒温摇...

【专利技术属性】
技术研发人员：史宏灿，孙飞，卢丹，王志豪，卢毅，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32