【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】尿液样本保存及DNA提取的组合物及方法交叉引用本申请要求2019年1月3日提交的PCT申请PCT/CN2019/070276的优先权，这个申请的全文以引用方式并入本文。专利
本专利技术涉及尿液样本保存和从尿液样本中提取DNA的组合物和方法。专利技术背景尿液作为一种方便、简单的生物样本，在分子诊断和疾病监测治疗领域受到越来越多的关注。在目前的临床实践中，尿液样本的储存大多依赖于低温环境，这就需要额外的设备，也导致了较高的成本。本专利技术提供了用于在相对较高的温度(如室温)下保存尿液样本的组合物和方法，从而有利于尿液样本的保存和运输。常用的尿液DNA提取试剂和方法可分为两大类。第一种方法是离心以沉淀尿液中的细胞，并提取细胞颗粒中的DNA。第二种方法是离心后丢弃细胞沉淀物，但在上清液中提取游离DNA。本专利技术提供了同时提取尿液中游离DNA和细胞DNA的组合物和方法，从而提高了DNA提取效率传统的DNA提取方法有酚氯仿法、盐析法、NaI法和硅胶固相载体法，但都存在操作复杂的缺点，不适合自动处理或...
【技术保护点】
1.一种用于保存从受试者获得的尿样的组合物，其中组合物包括pH缓冲液、螯合剂和表面活性剂。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20190103 CN PCT/CN2019/0702761.一种用于保存从受试者获得的尿样的组合物，其中组合物包括pH缓冲液、螯合剂和表面活性剂。
2.权利要求1的组合物，其中pH缓冲配制为将组合的pH调整到预先选择的范围内。
3.权利要求1的组合物，其中pH缓冲液包括乙酸和乙酸盐。
4.权利要求3的组合物，其中乙酸盐为乙酸钠。
5.权利要求2的组合物，其中预先选择的pH范围约为5.0至6.5。
6.权利要求5的组合物，其中组成的pH值约为6.0。
7.权利要求4的组合物，其中醋酸钠的浓度约为0.5至1.0mol/L。
8.权利要求1的组合物，其中螯合剂是一种氨基多羧酸。
9.权利要求8的组合物，其中螯合剂为乙二胺四乙酸(EDTA)。
10.权利要求8的组合物，其中EDTA的浓度约为10至25mmol/L。
11.权利要求1的组合物，其中表面活性剂是阴离子表面活性剂。
12.权利要求11的组合物，其中阴离子表面活性剂是十二烷基硫酸盐。
13.权利要求11的组合物，其中盐是钠盐，阴离子表面活性剂是十二烷基硫酸钠(SDS)。
14.权利要求1的组合物，其中SDS的浓度约为5％至10％(m/v)。
15.权利要求1中的组合物，其中该组合物不包含防腐剂、细胞固定剂或甲醛猝灭剂。
16.一种用于储存的处理后尿液样品，其中处理后尿液样品包括从受试者采集的尿液样品、pH缓冲液、螯合剂和表面活性剂。
17.权利要求16中用于储存的处理后尿液样品，其中pH缓冲液被配制为将组合物的pH值调整到预先选择的范围内。
18.权利要求16中用于储存的处理后尿液样品，其中pH缓冲液包括乙酸和乙酸盐。
19.权利要求18中用于储存的处理后尿液样品，其中乙酸盐为乙酸钠。
20.权利要求17中用于储存的处理后尿液样品，其中预先选择的pH值范围约为5.0～6.5。
21.权利要求20中用于储存的处理后尿液样品，其中，该组合物的pH值约为6.0。
22.权利要求19中用于储存的处理后尿液样品，其中，处理后的尿样中醋酸钠的浓度约为0.05～0.1mol/L。
23.权利要求1中用于储存的处理后尿液样品，其中，螯合剂为氨基多羧酸。
24.权利要求23中用于储存的处理后尿液样品，其中，螯合剂为乙二胺四乙酸(EDTA)。
25.权利要求24中用于储存的处理后尿液样品，其中EDTA的浓度约为1～2.5mmol/L。
26.权利要求16中用于储存的处理后尿液样品，其中表面活性剂为阴离子表面活性剂。
27.权利要求26中用于储存的处理后尿液样品，其中阴离子表面活性剂为十二烷基硫酸盐。
28.权利要求26中用于储存的处理后尿液样品，其中盐为钠盐，阴离子表面活性剂为十二烷基硫酸钠(SDS)。
29.权利要求16中用于储存的处理后尿液样品，其中SDS的浓度约为0.5％至1.5％(m/v)。
30.权利要求16中用于储存的处理后尿液样品，所述处理过的尿液样本不包含防腐剂、细胞固定剂或甲醛猝灭剂。
31.一种处理尿液样本以供储存的方法，包括将从受试者采集的尿液样本与pH缓冲液、螯合剂和表面活性剂混合，或与权利要求1至15中的任何一种成分混合。
32.权利要求31的方法，其中pH缓冲液包括乙酸和乙酸钠。
33.权利要求32的方法，其中，处理后的尿液样本中的乙酸钠浓度约为0.05至0.1mol/L。
34.权利要求31的方法，其中螯合剂是EDTA。
35.权利要求34中的方法，其中处理后尿液样本中的EDTA浓度约为1至2.5mmol/L。
36.权利要求31的方法，其中表面活性剂为SDS。
37.权利要求36的方法，其中，处理后尿液样本中的SDS浓度约为0.5％～1.5％(m/v)。
38.一种储存从受试者采集的尿液样本的方法，包括将从受试者采集的尿液样本与pH缓冲液、螯合剂和表面活性剂混合，以产生准备储存的尿液样本。
39.权利要求38的方法，其中pH缓冲液、螯合剂和表面活性剂以混合物形式提供，然后与从受试者采集的尿液样本混合。
40.权利要求39的方法，其中pH缓冲液被配制成将组合物的pH调整到预先选择的范围内。
41.权利要求38的方法，其中pH缓冲液包括乙酸和乙酸盐。
42.权利要求41的方法，其中乙酸盐为乙酸钠。
43.权利要求40的方法，其中预先选择的pH范围约为5.0至6.5。
44.权利要求43的方法，其中该组合物的pH值约为6.0。
45.权利要求42的方法，其中，准备储存的尿液样本中的醋酸钠的浓度约为0.05至0.1mol/L。
46.权利要求38的方法，其中螯合剂是一种氨基多羧酸。
47.权利要求46的方法，其中螯合剂为乙二胺四乙酸(EDTA)。
48.在权利要求47的方法中，在准备储存的尿液样本中EDTA的浓度约为1至2.5mmol/L。
49.权利要求38的方法，其中表面活性剂是阴离子表面活性剂。
50.权利要求49的方法，其中阴离子表面活性剂是十二烷基硫酸盐。
51.权利要求50的方法，其中盐是钠盐，阴离子表面活性剂是十二烷基硫酸钠(SDS)。
52.权利要求51的方法，其中，准备储存的尿液样本中的SDS浓度约为0.5％至1.5％(m/v)。
53.权利要求38的方法，其中，准备储存的尿液样本不包含防腐剂、细胞固定剂或甲醛猝灭剂。
54.在权利要求38的方法中，从受试者采集的尿液样本中含有受试者的细胞和至少一个病毒病原体，在尿液样本准备储存后，细胞和病毒病原体均被裂解。
55.权利要求54的方法，其中病毒病原体是人乳头瘤病毒(HPV)。
56.权利要求38的方法，包括在4℃储存尿液样本以备储存。
57.权利要求38的方法，包括在室温下储存尿液样本以备储存。
58.权利要求56的方法，其中，尿液样本中的DNA含量在15天至30天的储存时间后是稳定的。
59.权利要求57的方法，其中，尿液样本中的DNA含量在1周至2周的储存时间后是稳定的。
60.一种用于检测从受试者采集的尿液样本中存在或不存在一个或多个分析物的方法，其中该方法包括使用权利要求16至30中任何一个处理后的尿液样本。
61.权利要求60的方法，其中被分析物是一个病毒。
62.权利要求61的方法，其中病毒是HPV。
63.权利要求61的方法，其中所述被分析物的检测包括检测病毒的DNA。
64.用于从受试者尿液样本中提取DNA的试剂盒，其中试剂盒包括裂解液、磁性纳米颗粒、蛋白酶、第一洗涤缓冲液、第...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴扬，刘刚，吕宁，陈一友，
申请(专利权)人：杭州诺辉健康科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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