一种快速鉴定转基因拟南芥阳性植株的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速鉴定转基因拟南芥阳性植株的方法，所述方法包括将荧光蛋白基因和目标基因片段插入到双元载体中，随后转化农杆菌；用经转化的农杆菌转化拟南芥，收获拟南芥种子；将收获的种子播种在筛选培养基上，以筛选转基因拟南芥阳性植株；出苗后，观察拟南芥阳性植株的植物部位，如果检测到荧光信号，则可以确定该植株为转基因阳性植株，如果未检测到荧光信号，则该植株是假阳性植株。该方法简化了筛选步骤、缩短了筛选周期、提高了筛选效率。

【技术实现步骤摘要】
一种快速鉴定转基因拟南芥阳性植株的方法
本专利技术涉及植物基因工程
具体地，本专利技术涉及一种快速鉴定转基因拟南芥阳性植株的方法。
技术介绍
拟南芥是长日模式植物，具有植株形态个体小、生长周期短、结实多的特点，从播种到收获种子一般只需6周左右，每株植物可产生数千粒种子。因此，拟南芥被广泛用于植物遗传学研究。在反向遗传学领域，拟南芥更是起到了举足轻重的作用。例如，可以根据拟南芥的已知基因寻找该基因在其它植物物种中的同源基因，通过构建超表达载体创建超表达突变体、下调表达突变体，或利用基因编辑创建基因敲除突变体，从而进行基因功能验证。目前很多生物学过程的调控通路在拟南芥中研究得相对透彻，因此，其它作物也会借鉴拟南芥已知的调控通路。用目标基因转化拟南芥，有助于对目标基因的功能及分子机理进行研究。目前拟南芥转基因植株阳性植株的筛选主要是借助转基因载体中的潮霉素抗性基因进行筛选，但是拟南芥的种子量大，容易筛选到一定量的假阳性植株，继而不利地影响纯合植株的筛选以及接下来的基因功能研究。为了避免这种情况，通常会在移栽转基因拟南芥植株后，对其中的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种筛选转基因拟南芥阳性植株的方法，所述方法包括：/n步骤1：将荧光蛋白基因插入到双元载体中，形成经改造的双元载体；/n步骤2：将目标基因片段插入到所述经改造的双元载体中；/n步骤3：用步骤2制备的双元载体转化农杆菌；/n步骤4：用经转化的农杆菌转化拟南芥，收获拟南芥种子；/n步骤5：将收获的种子播种在筛选培养基上，以筛选转基因拟南芥阳性植株；/n步骤6：出苗后，观察拟南芥阳性植株的植物部位，如果检测到荧光信号，则可以确定该植株为转基因阳性植株，如果未检测到荧光信号，则该植株是假阳性植株。/n

【技术特征摘要】
1.一种筛选转基因拟南芥阳性植株的方法，所述方法包括：
步骤1：将荧光蛋白基因插入到双元载体中，形成经改造的双元载体；
步骤2：将目标基因片段插入到所述经改造的双元载体中；
步骤3：用步骤2制备的双元载体转化农杆菌；
步骤4：用经转化的农杆菌转化拟南芥，收获拟南芥种子；
步骤5：将收获的种子播种在筛选培养基上，以筛选转基因拟南芥阳性植株；
步骤6：出苗后，观察拟南芥阳性植株的植物部位，如果检测到荧光信号，则可以确定该植株为转基因阳性植株，如果未检测到荧光信号，则该植株是假阳性植株。


2.根据权利要求1所述的方法，其中所述荧光蛋白基因是绿色荧光蛋白(GFP)、红色荧光蛋白(RFP)、黄色荧光蛋白(YFP)、蓝色荧光蛋白(BFP)以及它们的增强型荧光蛋白的基因，优选地，其中所述荧光蛋白基因是绿色荧光蛋白基因。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述双元载体是pCAMBIA1...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫志强，王晓雪，邓茹月，朱诉讼，尹燕斌，夏忠敏，宫彦龙，王忠妮，
申请(专利权)人：贵州省水稻研究所，
类型：发明
国别省市：贵州;52