一种精子核蛋白组型转换半定量检测试剂及检测方法技术

技术编号:2622496 阅读:425 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开一种精子核蛋白组型转换半定量检测试剂,包括染色液、粘合液和洗脱液;所述洗脱液用于洗去精液染色后的非特异性染色;所述粘合液用于使精液易于粘合在载玻片上,免于洗脱。进一步的,还提出一种用精子核蛋白组型转换半定量检测的方法,包括如下步骤:1)在精液中加入粘合液,并涂于载玻片上的的染色窗中,使得精液易于粘合在载玻片上;2)在步骤1)所述的精液中加入染色液,对精液进行染色;3)对步骤2)所述的精液进行封片,计数一定个数的精子中头部染蓝色的精子百分率。由于采用洗脱液,将染色完毕的精液中的非特异性染色洗去,只保留特异性染色的物质,背景噪声对计数人员的干扰减小,使得染色结果易于读取,结果准确、特异。(*该技术在2024年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于体外诊断试剂类,具体适用于精子核蛋白组型转换的半定量检测。
技术介绍
人体的精原细胞核蛋白类型主要为富含赖氨酸残基组蛋白,在精子成熟过程中,与精核DNA结合的碱性蛋白发生组型转换,富含赖氨酸残基的组蛋白逐渐被富含精氨酸与胱氨酸残基的鱼精蛋白所取代,成熟的精子核蛋白类型主要是鱼精蛋白。而蛋白组型转换缺陷或异常可引起男性不育或胚胎早期夭折流产,其机理为①使精子DNA不稳定,易受损伤而不能受孕;②一旦受精,由于核蛋白组型异常,精子核不能正常解聚,从而影响了雌雄原核的融合;③胚胎不能正常发育,造成胚胎夭折而流产。精子核蛋白组型转换检测方法有两种,一种是提取核蛋白后电泳定量检测,另一种是利用与赖氨酸残基有亲和力的苯胺蓝染色检测,在酸性条件下,苯胺蓝与赖氨酸残基结合生成蓝色化合物,从而指示富含赖氨酸残基蛋白质的存在。前一方法操作复杂、对人员与设备的要求比较高,不适于临床常规开展;后一方法操作简单,但由于试剂配方不合理造成背景噪声大,特异性不强。
技术实现思路
本专利技术的主要目的在于提供一种可洗去精液中的非特异性染色、背景噪声低、信噪比大、染色结果准确性、特异性好的精子核蛋白组型转换本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种精子核蛋白组型转换半定量检测试剂,包括染色液,其特征是,还包括粘合液和洗脱液;所述洗脱液用于洗去精液染色后的非特异性染色;所述粘合液用于使精液易于粘合在载玻片上,免于洗脱。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:傅剑华刘瑜胡家纯何林何小红
申请(专利权)人:深圳华康生物医学工程有限公司
类型:发明
国别省市:94[中国|深圳]

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