【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用固-液相系统分离和纯化核酸的方法相关申请的交叉引用本申请要求申请日为2018年1月19日的美国临时专利申请No.62/619,274的优先权。该申请的全部内容和披露以引用的形式并入本申请。本申请引用了多个出版物。该等出版物的全文披露以引用的形式在此并入本申请以更全面地描述本专利技术涉及的现有技术。
本专利技术涉及一种用于从含核酸材料中分离和纯化核酸的方法。在一些实施方式中,该方法包括在固-液相系统中使用含有一个或多个阳离子基团的改性多孔材料。通过有效地捕获和保持核酸,该改性多孔材料有助于显著增加目标核酸的浓度。
技术介绍
分离和纯化高质量核酸是许多生物技术应用中的关键步骤。与特定介质中存在的核酸测试相关的许多分析检定的结果很大程度上取决于样本中目标核酸(例如血液或口腔细胞)的纯度和数量。如果样本中目标核酸的量或浓度过低,或者样本中存在过量或少量的干扰分子(如非目标核酸)、其他大分子(如蛋白质)或小分子(如盐和去污剂),结果的可靠性就会降低。因此,从原始样本中的其他组分中分离出高纯度和高数量的核酸对 ...
【技术保护点】
1.一种用于从含核酸材料中纯化核酸的固-液相的系统,所述系统包括多孔材料和双水相系统(ATPS),其中所述多孔材料包括表面和多个孔,所述表面和所述孔包含多个阳离子基团,以及其中所述双水相系统包含第一相和第二相。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180119 US 62/619,2741.一种用于从含核酸材料中纯化核酸的固-液相的系统,所述系统包括多孔材料和双水相系统(ATPS),其中所述多孔材料包括表面和多个孔,所述表面和所述孔包含多个阳离子基团,以及其中所述双水相系统包含第一相和第二相。
2.根据权利要求1所述的系统,其中所述多个阳离子基团从以下组成的组中选择:脂族胺、芳香胺、多胺及其组合。
3.根据权利要求1所述的系统,其中所述多个阳离子基团从以下组成的组中选择:二甲胺、亚精胺、精胺、三甲胺、三甲胺、辛胺、癸胺、二辛胺和十二烷胺、苯二胺、二(甲基氨基甲基)苯酚、三(二甲基氨基甲基)苯酚、二乙基苯胺、亚精胺、精胺、二亚乙基三胺、三亚乙基四胺、四亚乙基五胺、五亚乙基六胺、三(2-氨基乙基)胺及其组合。
4.根据权利要求1所述的系统,其中所述多孔材料从以下组成的组中选择:纸、聚合物、泡沫、织物、木材、石头、陶瓷、金属、琼脂糖凝胶和碳纤维。
5.根据权利要求1所述的系统,其中所述多孔材料从以下组成的组中选择:玻璃纤维纸、棉基纸、单层基质纸和聚烯烃泡沫垫。
6.根据权利要求1所述的系统,其中所述多孔材料的平均孔径在0.1至100μm的范围内。
7.根据权利要求1所述的系统,其中所述第一相和所述第二相独立地从以下组成的组中选择:聚合物溶液、盐溶液、非极性溶液、胶束溶液和聚电解质溶液。
8.根据权利要求1所述的系统,其中所述第一相的体积和所述第二相的体积比为1∶1至1∶1000。
9.根据权利要求1所述的系统,其中待纯化的所述核酸具有约20至1000个碱基对的大小。
10.根据权利要求1所述的系统,其中所述系统可以在10秒至5分钟内纯化目标核酸。
11.根据权利要求1所述的系统,其中使用所述固-液相的系统纯化后的目标核酸的浓度比含核酸材料中所述目标核酸的浓度高10至1000倍。
12.根据权利要求1所述的系统,其中待纯化的所述核酸以1pg/mL或更高的浓度存在于所述含核酸材料中。
13.一种制备包含多个阳离子基团的多孔材料的方法,包括步骤:
(a)通过将胺溶解在缓冲液中制备胺溶液;
(b)将多孔材料浸泡在从步骤(a)获得的所述胺溶液中;
(c)用水洗涤从步骤(b)获得的所述多孔材料;和
(d)干燥从步骤(c)获得的所述多孔材料,从而获得包含多个阳离子基团的多孔材料。
14.根据权利要求13所述的方法,其中步骤(a)中的所述胺从以下组成的组中选择:二甲胺、亚精胺、精胺、三甲胺、三甲胺、辛胺、癸胺、二辛胺、十二烷胺、苯二胺、二(甲基氨基甲基)苯酚、三(二甲基氨基甲基...
【专利技术属性】
技术研发人员:招彦焘,
申请(专利权)人:相达生物科技国际有限公司,
类型:发明
国别省市:中国香港;81
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