【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】T细胞制备组合物和方法交叉引用本申请要求2017年11月8日提交的第62/583,229号美国临时申请、2017年11月20日提交的第62/588,590号美国临时申请、2018年1月17日提交的第62/618,445号美国临时申请和2018年9月27日提交的第62/737,625号美国临时申请的权益，这些申请通过引用整体并入本文。
技术介绍
肿瘤疫苗通常由肿瘤抗原和免疫刺激分子(例如佐剂、细胞因子或TLR配体)组成，它们共同作用以诱导识别并裂解肿瘤细胞的抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)。这类疫苗含有共有的组织限制性肿瘤抗原或完整肿瘤细胞制品形式的共有抗原和患者特定抗原的混合物。共有的组织限制性肿瘤抗原是在许多个体的肿瘤中具有选择性表达的理想的免疫原性蛋白质，并且通常作为合成肽或重组蛋白递送给患者。相比之下，完整肿瘤细胞制品作为自体辐照的细胞、细胞裂解物、细胞融合物、热休克蛋白制品或总mRNA递送给患者。由于完整肿瘤细胞是从自体患者中分离的，因此该细胞可以包括患者特定肿瘤抗原以及共有的肿瘤抗原。最后，还有第三类肿瘤抗原——很少在疫苗中使...
【技术保护点】
1.一种药物组合物，其包含：/n(a)来自生物样品的免疫细胞群体，该生物样品包含至少一种抗原呈递细胞(APC)刺激的T细胞，该T细胞包含对至少一个抗原肽序列具有特异性的T细胞受体(TCR)，/n其中：/n(i)所述群体中表达CD14和CD25的免疫细胞的量成比例地小于所述生物样品中表达CD14和CD25的免疫细胞的量，或者/n(ii)所述APC是FMS样酪氨酸激酶3受体配体(FLT3L)刺激的APC；以及/n(b)药学上可接受的赋形剂。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171108 US 62/583,229;20171120 US 62/588,590;20181.一种药物组合物，其包含：
(a)来自生物样品的免疫细胞群体，该生物样品包含至少一种抗原呈递细胞(APC)刺激的T细胞，该T细胞包含对至少一个抗原肽序列具有特异性的T细胞受体(TCR)，
其中：
(i)所述群体中表达CD14和CD25的免疫细胞的量成比例地小于所述生物样品中表达CD14和CD25的免疫细胞的量，或者
(ii)所述APC是FMS样酪氨酸激酶3受体配体(FLT3L)刺激的APC；以及
(b)药学上可接受的赋形剂。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述生物样品来自患有癌症的人类受试者。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述至少一个抗原肽序列以小于500nM的KD或IC50结合由受试者表达的HLA等位基因所编码的蛋白质。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一个抗原肽序列中的每一个由受试者的癌细胞的表达基因编码，并且包含在受试者的非癌细胞中不存在的突变。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一个抗原肽序列中的一个或多个具有8至50个天然存在的氨基酸的长度。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一个抗原肽序列包含至少2个抗原肽序列。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物中至少一种抗原特异性CD8+T细胞的百分比是所述组合物中全部CD8+T细胞的至少约1％。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其中所述组合物中至少一种抗原特异性CD8+T细胞的百分比是所述组合物中全部CD8+T细胞的至少约5％。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物中至少一种抗原特异性CD8+T细胞的数目是至少约1x106、2x106、5x106、1x107、2x107、5x107、1x108、2x108或5x108个抗原特异性CD8+T细胞。
10.一种治疗方法，其包括将权利要求1-9中任一项的药物组合物施用于患有疾病或病症的受试者。
11.权利要求1-9中任一项的药物组合物在制备用于治疗的药物中的用途。
12.一种制备至少一种包含对至少一个抗原肽序列具有特异性的T细胞受体(TCR)的抗原特异性T细胞的方法，该方法包括
(a)将一种或多种抗原呈递细胞(APC)制品与来自耗尽表达CD14和CD25的细胞的生物样品的免疫细胞群体一起孵育一个或多个单独时间段；
(b)将一种或多种APC制品与来自生物样品的免疫细胞群体一起孵育一个或多个单独时间段，其中所述一种或多种APC包含一种或多种FMS样酪氨酸激酶3受体配体(FLT3L)刺激的APC；或者
(c)将FLT3L和至少一种肽与来自生物样品的免疫细胞群体一起孵育，其中所述FLT3L与所述免疫细胞群体一起孵育第一时间段，并且其中所述至少一种肽与所述免疫细胞群体一起孵育第一肽刺激时间段，从而获得第一刺激的T细胞样品，其中所述免疫细胞群体包含至少一种T细胞和至少一种APC；
其中至少一种抗原特异性记忆T细胞被扩充，或者至少一种抗原特异性幼稚T细胞被诱导。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述方法包括将来自生物样品的免疫细胞群体与一种或多种APC制品一起孵育一个或多个单独时间段，所述时间段是从所述免疫细胞群体与所述一种或多种APC制品中的第一APC制品孵育起不到28天。
14.根据权利要求12或13所述的方法，其中所述方法包括将来自生物样品的免疫细胞群体与3种或更少的APC制品一起孵育3个或更少的单独时间段。
15.根据权利要求12-14中任一项所述的方法，其中所述一种或多种APC制品中的至少两种包含FLT3L刺激的APC。
16.根据权利要求15所述的方法，其中所述一种或多种APC制品中的至少三种包含FLT3L刺激的APC。
17.根据权利要求12-16中任一项所述的方法，其中孵育包括将所述APC制品中的第一APC制品与所述T细胞一起孵育超过7天。
18.根据权利要求12-17中任一项所述的方法，其中所述APC制品中的APC包括负载有一种或多种抗原肽的APC，所述抗原肽包含所述至少一个抗原肽序列中的一个或多个。
19.根据权利要求12-18中任一项所述的方法，其中所述APC制品中的APC是自体APC或同种异体APC。
20.根据权利要求12-19中任一项所述的方法，其中所述APC制品中的APC包括树突细胞(DC)。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述DC是CD141+DC。
22.根据权利要求12-21中任一项所述的方法，其中所述方法包括从所述生物样品中消耗表达CD14和CD25的细胞，从而从耗尽表达CD14和CD25的细胞的生物样品获得所述免疫细胞群体。
23.根据权利要求12-22中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括消耗表达CD19的细胞。
24.根据权利要求12-23中任一项所述的方法，其中消耗表达CD14和CD25的细胞包括使CD14或CD25结合剂与所述一种或多种APC制品的APC结合。
25.根据权利要求12-24中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括将所述至少一种抗原特异性T细胞中的一种或多种施用于受试者。
26.根据权利要求12-25中任一项所述的方法，其中孵育包括将所述一种或多种APC制品中的第一APC制品与所述T细胞一起孵育超过7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20天。
27.根据权利要求12-26中任一项所述的方法，其中所述方法包括将所述一种或多种APC制品中的至少一种与包含至少一种细胞因子或生长因子的第一介质一起孵育第一时间段。
28.根据权利要求27所述的方法，其中所述方法包括将所述一种或多种APC制品中的至少一种与包含一种或多种细胞因子或生长因子的第二介质一起孵育第三时间段，从而获得成熟的APC。
29.根据权利要求28所述的方法，其中所述方法进一步包括在所述第三时间段后去除所述第二介质的所述一种或多种细胞因子或生长因子。
30.根据权利要求12-29中任一项所述的方法，其中所述APC制品中的APC用一种或多种细胞因子或生长因子进行刺激。
31.根据权利要求30所述的方法，其中所述一种或多种细胞因子或生长因子包括GM-CSF、IL-4、FLT3L、TNF-α、IL-1β、PGE1、IL-6、IL-7、IFN-α、R848、LPS、ss-rna40、聚I:C或其组合。
32.根据权利要求12-31中任一项所述的方法，其中所述抗原是新抗原、肿瘤相关抗原、病毒抗原、次要组织相容性抗原或其组合。
33.根据权利要求12-32中任一项所述的方法，其中所述方法离体进行。
34.根据权利要求12-33中任一项所述的方法，其中所述方法包括将来自耗尽表达CD14和CD25的细胞的生物样品的免疫细胞群体与FLT3L一起孵育第一时间段。
35.根据权利要求12-34中任一项所述的方法，其中所述方法包括将至少一种肽与来自耗尽表达CD14和CD25的细胞的生物样品的免疫细胞群体一起孵育第二时间段，从而获得第一成熟APC肽负载的样品。
36.根据权利要求12-35中任一项所述的方法，其中所述方法包括将所述第一成熟APC肽负载的样品与至少一种T细胞一起孵育第三时间段，从而获得第一刺激的T细胞样品。
37.根据权利要求12-36中任一项所述的方法，其中所述方法包括将第一刺激的T细胞样品的T细胞(i)与成熟APC样品的FLT3L刺激的APC一起孵育第四时间段，(ii)与FLT3L和成熟APC样品的第二APC肽负载的样品一起孵育第四时间段，或(iii)与FLT3L和成熟APC样品的FLT3L刺激的APC一起孵育第四时间段，从而获得第二刺激的T细胞样品。
38.根据权利要求12-37中任一项所述的方法，其中所述方法包括将第二刺激的T细胞样品的T细胞(i)与成熟APC样品的FLT3L刺激的APC一起孵育第五时间段，(ii)与FLT3L和成熟APC样品的第三APC肽负载的样品一起孵育第五时间段，或(iii)与FLT3L和成熟APC样品的第三APC肽负载的样品一起孵育第五时间段，从而获得第三刺激的T细胞样品。
39.根据权利要求12-38中任一项所述的方法，其中所述一个或多个单独时间段、所述三个或更少的单独时间段、所述第一时间段、所述第二时间段、所述第三时间段、所述第四时间段或所述第五时间段是至少1小时、至少2小时、至少3小时、至少4小时、至少5小时、至少6小时、至少7小时、至少8小时、至少9小时、至少10小时、至少11小时、至少12小时、至少13小时、至少14小时、至少15小时、至少16小时、至少17小时、至少18小时、至少19小时、至少20小时、至少21小时、至少22小时、至少23小时、至少24小时、至少25小时、至少26小时、至少27小时、至少28小时、至少29小时、至少30小时、至少31小时、至...
【专利技术属性】
技术研发人员：马里特·M·范布伦，迪维亚·瑞迪·伦卡拉，约斯特·赫伊伯特·凡丹伯格，杰西卡·科勒，马修·戈德斯坦，艾德·弗里奇，雷纳特·德贝尔，托恩·舒马赫，努尔·巴克，
申请(专利权)人：百欧恩泰美国公司，荷兰癌症研究所基金会安东尼·范·列文虎克医院，
类型：发明
国别省市：美国;US
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