水稻钾离子转运蛋白基因OsHAK9在提高盐胁迫下种子萌发能力中的应用制造技术

本发明专利技术属于种子科学与技术学领域，公开了水稻钾离子转运蛋白基因OsHAK9在盐胁迫下提高种子萌发能力中的应用。所述的水稻钾离子转运蛋白基因OsHAK9的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术通过MutMap方法从水稻盐敏感突变体gss1中克隆获得基因OsHAK9，功能互补实验证明OsHAK9能够提高盐胁迫下水稻种子的萌发能力。该基因可应用于高活力种子水稻品种选育以及盐胁迫下水稻种子萌发性状的遗传改良，对直播水稻生产具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
水稻钾离子转运蛋白基因OsHAK9在提高盐胁迫下种子萌发能力中的应用
本专利技术属于种子科学与
，涉及水稻钾离子转运蛋白基因OsHAK9在盐胁迫下提高水稻种子萌发能力中的应用，专用于高活力种子水稻品种选育以及盐胁迫下水稻种子萌发性状的遗传改良。
技术介绍
水稻(OryzasativaL.)是我国重要粮食作物，全球约有30％的水稻耕地受到盐害的影响。随着经济的发展，水稻直播稻、机插稻越来越普遍，提高盐胁迫条件下水稻种子萌发能力变得日益重要。种子萌发是一个由多基因控制的复杂数量性状。近十年来利用QTL分析定位了多个水稻种子萌发相关的QTLs，通过图位克隆等方法已成功克隆至少6个种子萌发相关基因，qLTG3-1、Sdr4、OsVP1、OsGA20ox1、OsFbx352和GD1等。但是在盐胁迫下，种子萌发同时受渗透效应和离子效应双重效应影响。至今，种子耐盐胁迫萌发相关基因的克隆很少，有待进一步发掘和克隆。MutMap是以二代测序技术为基础，通过对F2分离群体中隐性表型个体DNA测序，与野生型基因组序列相比对，找出目的基因本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.SEQ ID NO.1所示的水稻钾离子转运蛋白基因OsHAK9在提高盐胁迫下水稻种子萌发能力中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.SEQIDNO.1所示的水稻钾离子转运蛋白基因OsHAK9在提高盐胁迫下水稻种子萌发能力中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的提高盐胁迫下水稻种子萌发能力为提高水稻种子发芽率和/或提高水稻种子发芽速度和/或提高水稻种子活力和/或促进幼苗生长。


3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，将所述水稻钾离子转运蛋白基因OsHAK9的植物表达载体导入水稻，提高盐胁迫下水稻种子萌发能力。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述水稻钾离子转运蛋白基因OsHAK9的植物表达载体的构建方法为：
(1)以日本晴种子或幼苗cDNA材料为模板，设计如SEQIDNO.3所示的上游引物OsHAK9-F1和如SEQIDNO.4所示的下游引物OsHAK9-R1，利用降落PCR扩增技术获得如SEQIDNO.1所示的OsHAK9基因编码序列全长；
(2)以日本晴基因组DNA为模板，设计如SEQIDNO.5所示的上游引物OsHAK9-F2和如SEQIDNO.6所示的下游引物OsHAK9-R2，利用常规PCR扩增技术获得如SEQIDNO.7所示的OsHAK9基因启动子序列；
(3)设计如SEQIDNO.8所示的上游引物OsHAK9-F3和如SEQIDNO.9所示的下游引物OsHAK9-R3，利用重叠PCR技术连接步骤(1)和步骤(2)得到的片段，构建得到含有OsHAK9启动子和编码区的融合片段，利用同源重组法将融合片段构建到pCAMBIA1390载体中，得到OsHAK9基因的植物表达载体。


5.一种通过转水稻钾离子转运蛋白基因OsHAK9提高盐胁迫下水稻种子萌发能力的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)以日本晴种子或幼苗cDNA材料为模板，设计如SEQIDNO.3所示的上游引物OsHAK9-F1和如SEQIDNO.4所示的下游引物OsHAK9-R1，利用降落PCR扩增技术获得如SEQIDNO.1所示的OsHAK9基因编码序列全长；
(2)以日本晴基因组DNA为模板，设计如SEQIDNO.5所示的上游引物OsHAK9-F2和如SEQIDNO.6所示的下游引物OsHAK9-R2，利用常规PCR扩增技术获得如SEQIDNO.7所示的OsHAK9基因启动子序列；
(3)设计如SEQIDNO.8所示的上...

【专利技术属性】
技术研发人员：程金平，张红生，曾鹏，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32