全封闭兼容式紫外透射型电泳胶槽制造技术

技术编号:2607701 阅读:189 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
全封闭兼容式紫外透射型电泳胶槽,是一种适合于在各类核酸分析中应用的电泳胶槽。本实用新型专利技术由长方型框架、其底部四角的脚柱、覆盖长方型框架底部短边与其两端脚柱的外侧缘的半透膜、封闭长方型框架底部的可透过紫外线板材等组成。具有操作简单、快速;避免操作者接触有害物质;可减少由于扩增产物污染造成的PCR假阳性等优点。对进一步促进核酸分析技术的推广应用具有很大的意义。(*该技术在2006年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本技术是一种适合于在各类核酸分析中应用的全封闭兼容式紫外透射型电泳胶槽。随着分子生物学的迅速发展,核酸分析技术在生物医学研究、临床检验、法医鉴定等各个领域中的应用越来越广泛。电泳技术是其中最为常用的方法之一。但目前普遍使用的电泳胶槽存在诸多不足。首先,由于琼脂糖凝胶的电阻率与电泳缓冲液相当,因此在琼脂糖电泳时需要将胶槽浸泡在电泳缓冲液中;而聚丙酰胺凝胶的电阻率大大高于电泳缓冲液,因而在聚丙酰胺电泳时又必须使胶槽两端的电泳缓冲液保持绝缘状态,所以现有任何型号电泳胶槽都无法实现这两种凝胶之间的兼容。其次,现有胶槽均为拆卸组合式,由于加工精度的限制及受热、老化变形等原因常常难以达到密封要求,因此在制胶过程中经常出现漏胶现象,这不仅造成工作效率下降;而目造成电泳凝胶中的有害单体及荧光染料泄漏,对操作者的健康和实验室安全构成严重危胁。另外在电泳后的染胶及紫外分析过程中均需徒手将凝胶从胶槽中取出,这不仅更增加了电泳凝胶中的有害单体及荧光染料污染操作者和实验室的机会;而目由于凝胶的机械强度很低,因此常常造成碎胶,从而使整个实验前功尽弃。尤其是近几年来,由于PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)这荣获诺贝尔奖的核酸分析技术在临床检验及法医鉴定等诸方面的迅速应用,使其已经成为基因诊断技术最主要的组成部分。但因PCR过程中标本内的特异核酸片段被数十万倍地扩增,而在电泳分析中的上样、电泳、染胶、观察各个操作中均有可能使该特异核酸片段污染实验室环境及有关的仪器和操作工具,从而使以后进入实验室的标本被间接污染。由于PCR技术的灵敏度极高,这种扩增产物污染常造成假阳性结果(国外称之为Carry Over),这已成为PCR技术最大的缺点。国外甚至以报废整个实验室及所有仪器和操作工具的代价来消除假阳性。总之,由于目前普遍使用的电泳胶槽存在的上述种种不足,因此在一定程度上限制了核酸分析技术的推广应用。本技术的目的是提供一种全封闭兼容式紫外透射型电泳胶槽,以解决凝胶槽之间的兼容;制胶过程中经常出现漏胶;电泳凝胶中的有害单体及荧光染料常常污染操作者和实验室;染胶及紫外分析过程中取胶时易造成碎胶;在PCR技术中常因扩增产物污染造成假阳性结果等诸项不足。以进一步推动核酸分析技术的推广应用。我们经过多年的研究和探索,研制出一种国内外未见报导及生产的新型电泳胶槽,可以较好地解决现有电泳胶槽的上述不足。该电泳槽被称为“全封闭兼容式紫外透射型电泳胶槽”。附图(一)是该电泳胶槽的结构示意图。图中(1)为一个由绝缘板材围成的长方型框架;其底部四角各有一个脚柱(2);该长方型框架底部两个对称的短边与其两端脚柱的外侧缘构成的平面均有半透膜(3)覆盖;这两个脚柱的内侧缘和底端构成的平面则均被绝缘板材(4)封闭;该长方型框架底部由可透过紫外线的板材(5)封闭。上述“全封闭兼容式紫外透射型电泳胶槽”的使用方法见附图(二)。在制胶时先将其骑跨放置在电泳池(7)内的平台(8)上,再把配好的凝胶从上部倒入,待胶体凝固后便形成一个倒“凹”字形凝胶体(6)。如进行琼脂糖电泳则将电泳缓冲液加至液位(9),则可保证整个凝胶浸泡在电泳缓冲液内;如进行聚丙酰胺电泳可将电泳缓冲液加至液位(10),便可保证两端电泳缓冲液的绝缘。由于半透膜可允许水及小分子带电离子通过,所以电泳时电流可按图中箭头所示的方向通过凝胶,从而实现凝胶电泳。从上所述可以看出该电泳胶槽的如下优点第一,实现了两种凝胶之间的兼容。第二,由于其底部为永久全封闭状态,故制胶过程中绝对不会漏胶,因而避免了电泳凝胶中的有害物质对操作者健康和实验室安全的威胁。第三,染胶时可将染液直接倒入胶槽内进行;由于凝胶底部为透过紫外线的板材,因此紫外分析时也可直接将胶槽放置在紫外检测仪义上,均省去取胶过程,故避免了取胶时易造成碎胶的麻烦。第四,半透膜阳止了PCR产物电泳中扩增产物向凝胶以外的播散,因而大大减少了扩增产物污染的机会,从而降低了PCR的假阳性率;因此,本技术具有操作简单、快速;避免操作者接触有害物质;可减少由于扩增产物污染造成的PCR假阳性等优点。对进一步促进核酸分析技术的推广应用具有很大的意义。下面实施例仅用于说明本技术,但本技术并不限于该实施例。利用“全封闭兼容式紫外透射型电泳胶槽”分析PCR实验结果1PCR结束后从样品管中取出5-10微升产物与上样缓冲液混合。2将上述混合液滴入凝胶的上样孔中,接通电源,电泳数小时。3将染液倒入电泳胶槽内,染胶5-10分钟(琼脂糖凝胶可省略此步)。4将电泳胶槽放置到紫外检测仪上,进行紫外分析。由于PCR技术在临床检验(如肿瘤、各种感染性疾病、遗传性疾病及器官移植)、法医鉴定(如谋杀案、强奸案的痕迹鉴定、亲子鉴定)等各个领域中的应用越来越广泛;而本技术使其结果分析过程更为安全、简单、快速、稳定。因此对进一步促进该项新技术的推广应用具有很大的意义。权利要求1,一种全封闭兼容式紫外透射型电泳胶槽,由一个长方型框架和位于长方型框架底部四角的脚柱等组成,本技术的特征在于该长方型框架底部两个对称的短边与其两端脚柱的外侧缘构成的平面采用半透膜覆盖、该长方型框架底部采用可透过紫外线的板材封闭。专利摘要全封闭兼容式紫外透射型电泳胶槽,是一种适合于在各类核酸分析中应用的电泳胶槽。本技术由长方型框架、其底部四角的脚柱、覆盖长方型框架底部短边与其两端脚柱的外侧缘的半透膜、封闭长方型框架底部的可透过紫外线板材等组成。具有操作简单、快速;避免操作者接触有害物质;可减少由于扩增产物污染造成的PCR假阳性等优点。对进一步促进核酸分析技术的推广应用具有很大的意义。文档编号G01N27/447GK2309570SQ9620803公开日1999年3月3日 申请日期1996年4月19日 优先权日1996年4月19日专利技术者杨晓林, 刘勇 申请人:北京医科大学人民医院本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种全封闭兼容式紫外透射型电泳胶槽,由一个长方型框架和位于长方型框架底部四角的脚柱等组成,本实用新型的特征在于:该长方型框架底部两个对称的短边与其两端脚柱的外侧缘构成的平面采用半透膜覆盖、该长方型框架底部采用可透过紫外线的板材封闭。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员:杨晓林刘勇
申请(专利权)人:北京医科大学人民医院
类型:实用新型
国别省市:11[中国|北京]

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