一种特定基因区域DNA甲基化和去甲基化同步分析新方法技术

一种特定基因区域DNA甲基化和去甲基化同步分析新方法，可实现特定基因区域5‑甲基胞嘧啶和5‑羟甲基胞嘧啶的同步检测，其特征在于：所述新方法包括捕获、水解、分离、标记和测定五个步骤；其中所述捕获是用DNA限制性内切酶和特异性捕获探针钓取目标DNA片段；其中所述水解是用DNA外切酶将目标DNA片段水解为单核苷酸；其中所述分离是应用功能化纳米颗粒和磁分离技术对单核苷酸进行分离；其中所述标记是应用不同DNA探针标记的5‑甲基胞嘧啶单克隆抗体和5‑羟甲基胞嘧啶单克隆抗体识别目标分子；其中所述测定是在数字化PCR设备上完成两种不同标记DNA探针的定量分析。本发明专利技术可广泛用于科研和临床的检测，具有广阔的市场前景。

【技术实现步骤摘要】
一种特定基因区域DNA甲基化和去甲基化同步分析新方法
本专利技术涉及一种分析方法，具体说是涉及特定基因区域DNA甲基化和去甲基化同步分析的方法。
技术介绍
DNA甲基化是在甲基转移酶作用下将甲基引入DNA链的生物过程，它不仅在基因表达调控中起着关键作用，而且在染色体重组和发育调节等生命活动中扮演重要角色。在人类成熟体细胞中，DNA甲基化几乎只发生于CpG二核苷酸中胞嘧啶的C5上，生成5-甲基胞嘧啶。另一方面，DNA甲基化是一种可逆的修饰，5-甲基胞嘧啶可在细胞不同阶段被TET酶作用氧化为5-羟甲基胞嘧啶，并通过随后的一系列酶促作用机制实现主动去甲基化。研究表明，5-羟甲基胞嘧啶可能具有解除5-甲基胞嘧啶抑制基因表达的效应。可见，5-甲基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶是DNA甲基化和去甲基化过程中的关键分子，它们在基因启动子区域、第一外显子、5’非编码区和3’非编码区等特定基因区域的变化与癌症、心血管疾病、代谢性疾病及炎症的发生发展密切相关。目前，用于特定基因区域5-甲基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶的定量分析方法主要基于PCR扩增或DNA测序技术，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种特定基因区域DNA甲基化和去甲基化同步分析新方法，可实现特定基因区域5-甲基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶的同步检测，其特征在于：所述新方法包括捕获、水解、分离、标记和测定五个步骤；其中所述捕获是根据特定基因区域的DNA序列，设计特异性捕获探针，从基因组DNA的限制性内切酶作用产物中钓取目标DNA片段；其中所述水解是用DNA外切酶将目标DNA片段水解为单核苷酸；其中所述分离是应用功能化纳米颗粒和磁分离技术对单核苷酸进行分离；其中所述标记是应用不同DNA探针标记的5-甲基胞嘧啶单克隆抗体和5-羟甲基胞嘧啶单克隆抗体识别目标分子；其中所述测定是在数字化PCR设备上完成两种不同标记DNA探针的定量...

【技术特征摘要】
1.一种特定基因区域DNA甲基化和去甲基化同步分析新方法，可实现特定基因区域5-甲基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶的同步检测，其特征在于：所述新方法包括捕获、水解、分离、标记和测定五个步骤；其中所述捕获是根据特定基因区域的DNA序列，设计特异性捕获探针，从基因组DNA的限制性内切酶作用产物中钓取目标DNA片段；其中所述水解是用DNA外切酶将目标DNA片段水解为单核苷酸；其中所述分离是...

【专利技术属性】
技术研发人员：玉崧成，吴拥军，合思甜，何磊良，刘利娥，冯寅花，于斐，吴予明，刘洁，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：河南;41