松材线虫核酸提取试剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物检测技术领域，具体而言，涉及一种松材线虫核酸提取试剂及其应用。所述试剂的下述组分在水溶液中的工作浓度在以下范围内：金属离子螯合剂0.08mM～1mM，SDS0.01g/ml～0.1g/ml，NP‑40 0.08v/v％～1v/v％，以及缓冲组分；且所述试剂在核酸提取的过程中的pH为7.6～8.4。本发明专利技术所提供的松材线虫核酸提取试剂配方简单，无易氧化组分(DTT)，稳定性高；可同时用于提取松材线虫液和疫木木屑；提取时间短，65℃45分钟，95℃10分钟即可完成提取。

【技术实现步骤摘要】
松材线虫核酸提取试剂及其应用
本专利技术涉及生物检测
，具体而言，涉及一种松材线虫核酸提取试剂及其应用。
技术介绍
松材线虫病(Pinewiltdisease)，又被称为松树萎蔫病、枯萎病，是一种毁灭性虫害。松材线虫病是由松材线虫(Bursaphelenchusxylophilus)引起，主要通过墨天牛属(Monochamus)昆虫进行自然传播或通过病木、病木加工木的运输进行长距离传播。林区内松材线虫的传播媒介主要是松墨天牛，被松材线虫感染后，松树针叶变成黄褐色或红褐色，萎蔫下垂，树脂分泌停止，病树整株干枯死亡，最终腐烂。线虫种类常规鉴定的标准方法为形态学鉴定，形态学主要依据成虫的形态特征对松材线虫进行鉴定。但是，对非专业人员而言，通过形态学准确鉴定松材线虫成虫相当困难，且形态学无法对幼虫进行准确鉴定。由于形态学方法鉴定松材线虫的限制，分子生物学方法被应用到松材线虫的鉴定上。分子生物学技术的引入，克服了形态学鉴定的限制，实现准确、快速的鉴定。松材线虫分子检测技术的开发，有利于及时发现早期疫点，有效控制松材线虫病发生范围，减本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种松材线虫核酸提取试剂，其特征在于，所述试剂的下述组分在水溶液中的工作浓度在以下范围内：/n-金属离子螯合剂0.08mM～1mM，/n-SDS0.01g/ml～0.1g/ml，/n-NP-40 0.08v/v％～1v/v％，以及/n-缓冲组分；/n且所述试剂在核酸提取的过程中的pH为7.6～8.4。/n

【技术特征摘要】
1.一种松材线虫核酸提取试剂，其特征在于，所述试剂的下述组分在水溶液中的工作浓度在以下范围内：
-金属离子螯合剂0.08mM～1mM，
-SDS0.01g/ml～0.1g/ml，
-NP-400.08v/v％～1v/v％，以及
-缓冲组分；
且所述试剂在核酸提取的过程中的pH为7.6～8.4。


2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂的下述组分在水溶液中的工作浓度在以下范围内：
-金属离子螯合剂0.08mM～0.1mM，
-SDS0.01g/ml～0.02g/ml，
-NP-400.08v/v％～0.1v/v％。


3.根据权利要求1或2所述的试剂，其特征在于，所述缓冲组分选自Tris-HAc，其在水溶液中的工作浓度在以下范围内0.8mM～1mM。


4.根据权利要求1或2所述的试剂，其特征在于，所述金属离子螯合剂为乙二胺四乙酸或其盐。


5.组合产品，其包括权利要求1～4任一项所述的试剂、蛋白酶K；
优选地，所述蛋白酶K的浓度为10mg/ml～20mg/ml；更优选为15mg/ml～20mg/ml；
所述组合产品优选还包括TE溶液；
优选地，所述TE溶液的下述组分在水溶液中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈凤毛，胡振新，郜安国，谭卓，
申请(专利权)人：南京林业大学，苏州点晶生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32