一株红树林内生真菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，特别涉及一株红树林内生真菌及其应用。新菌株HS52从红树林保护区的白榄茎部组织分离而得，保藏编号为CGMCC NO.19648，根据分类学方法，该菌株是Liberomyces属的一个新种，该菌株的分类地位是Liberomyces sp。该新种的发现和利用丰富了内生真菌的可利用的菌种资源，该菌种具有促进作物生长、改善作物品质的作用，经测定接种了本申请的菌株后铁皮石斛的叶片及茎干IAA增加了8.54％和6.35％，石斛茎干多糖增加了9.95％，显著提高了铁皮石斛苗的品质。

【技术实现步骤摘要】
一株红树林内生真菌及其应用
本专利技术涉及生物
，特别涉及一株红树林内生真菌及其应用。
技术介绍
促生菌对提高农作物的生产能力，有良好的促进作用，近年来随着研究人员的不断研究努力发现了很多具有明显促生效果的促生菌，对提高农作物的生产能力、减少化肥的使用具有重要的意义，申请人一直从事这方面的研究，目前也发现并筛选了很多具有良好特性的菌株，例如，例如申请号为201410220964.7专利技术名称为《一种DSE菌株及其在甘蔗生产上的应用》的内生真菌，该真菌由申请人从广西北部湾红树植物分离而得，属于Devriesiasp属，该菌株具有促进铁皮石斛生长的作用；申请号为201910884589.9专利技术名称为《枝孢瓶霉菌株LJ1及其应用》的促生菌，该菌由申请人从土壤中分离获得，属于Cladophiaphora属，具有促进铁皮石斛生长和防治香蕉枯萎病的作用；甚至申请人还发现了一些新种，例如，申请号为201911188968.0专利技术名称为《新种内生真菌LZ3及其应用》的促生菌，该菌由申请人从甘蔗根围土壤分离而得中分离获得，属于Acidomelania属的一个新种，具有防治香蕉枯萎病，和促进作物生长的作用，促生菌在农业自然环境保护中具有广阔的开发利用前景。而自然界中存在很多的微生物其功能值得研究人员去不断发掘，有必要进一步在丰富多样的微生物种质资源中筛选获得更多更优异的优良菌株，为促进农作物生长提供资源保障。
技术实现思路
鉴于上述内容，为了发掘更多性状优良促生菌，促进内生菌种质资源的开发利用，本专利技术目的在于提供一种新种菌株Liberomycessp.HS52及其在促进植物生长中的应用。为达到上述目的，本专利技术筛选出一种新种菌株Liberomycessp.HS52，其保藏编号为CGMCCNO.19648。属于真菌界，Delonicicolaceae科下的Liberomyces属的未知种。所述真菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.19648，保藏日期为2020年06月01日。该菌株在PDA平板培养基上的菌落形态如图1所示，28℃下培养14天后菌落直径20mm左右，呈椭圆形至近圆形，中间黑褐色，外部白色，绒毡状，不产分生孢子。进一步的，上述菌株分离自广西防城港北仑河口红树林保护区的白榄茎部组织。本专利技术还包括所述的新种菌株Liberomycessp.HS52在促进植物生长上的应用。本专利技术还包括所述的新种菌株Liberomycessp.HS52在提高植物吲哚乙酸和多糖含量上的应用。进一步的，所述植物为铁皮石斛。本专利技术还包括一种应用所述新种菌株Liberomycessp.HS52促进植物生长的方法，所述方法为：将菌株HS52接种到植物的组培苗和/或植株中；所述接种方法为将植物的组培苗直接移栽于接种了HS52菌株的平板上。本专利技术还包括一种筛选所述新种菌株Liberomycessp.HS52的培养基，所述培养基包括1/2玉米粉培养基和麦芽汁培养基；所述1/2玉米粉培养基主要成分含量为：玉米粉琼脂25g·L-1；琼脂粉15g·L-1；氨苄青霉素50μg·L-1；链霉素50μg·L-1；麦芽汁培养基主要成分含量为：麦芽提取物10g·L-1，酵母提取物2g·L-1，玉米粉琼脂8.5g·L-1，琼脂7.5g·L-1。本专利技术具有以下有益效果：本申请的新种菌株Liberomycessp.HS52是申请人发现的一种新种菌株，能对植物起到良好的促生作用和改善品质的作用，特别是，能促进铁皮石斛苗的生长，尤其是能提高铁皮石斛的吲哚乙酸含量和多糖含量，是一种新型功能的种质资源；经测定接种了本申请的菌株后铁皮石斛的叶片及茎干IAA增加了8.54％和6.35％，石斛茎干多糖增加了9.95％，能显著提高铁皮石斛苗的品质。【附图说明】图1为本专利技术HS52菌株在PDA培养基上生长的菌落形态面图；图2为本专利技术HS52菌株基于的ITS系统发育树图；图3为本专利技术HS52菌株对铁皮石斛组培苗的促生作用效果图；图中左边为未接种HS52的CK对照组；右边为接种了HS52的处理组；图4为本专利技术HS52菌株对铁皮石斛盆栽苗的促生作用效果图；图中左边为未接种HS52的CK对照组；右边为接种了HS52的处理组；图5为接种菌株HS52对铁皮石斛盆栽苗品质影响的结果图。【具体实施方式】下面结合附图和实施例和试验对本专利技术作进一步说明。实施例1：本实施例筛选出一种新种菌株Liberomycessp.HS52，其保藏编号为CGMCCNO.19648。属于真菌界，Delonicicolaceae科下的Liberomyces属的未知种。所述真菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.19648，保藏日期为2020年06月01日。上述菌株分离自广西防城港北仑河口红树林保护区的白榄茎部组织。上述菌株的分离、筛选方法为：(1)对采集到的红树组织样本用自来水将表面清洗干净后进行消毒，具体消毒方法为：将组织样本剪切成0.5cm×0.5cm大小的片或块，用75％乙醇振荡消毒10～30s，再用1％次氯酸钠振荡消毒1～5min(其中根3min，茎5min，叶1min)，用无菌水漂洗3次以上后放置于无菌滤纸上晾干；(2)培养基筛选：将消毒后的红树组织块置于1/2玉米粉培养基平板上：其主要成分为：玉米粉琼脂25g·L-1；琼脂粉15g·L-1；氨苄青霉素50μg·L-1；链霉素50μg·L-1，蒸馏水1000mL，每皿3块组织块，每个样本5皿，于26℃培养箱中培养；逐日观察是否有菌丝长出，待菌丝从组织块部位长出后，挑取组织块尖端或边缘的菌丝转接到麦芽汁培养基上：其主要成分为：麦芽提取物10g·L-1，酵母提取物2g·L-1，玉米粉琼脂8.5g·L-1，琼脂7.5g·L-1，蒸馏水1000mL，获得纯化的真菌培养物。将上述分离得到的微生物进行形态学分类和分子生物学鉴定：1、菌株的菌落形态该菌株在PDA平板培养基上的菌落形态如图1所示，28℃下培养14天后菌落直径20mm左右，呈椭圆形至近圆形，中间黑褐色，外部白色，绒毡状，不产分生孢子。2、分子生物学鉴定：将菌株HS52培养于马铃薯葡萄糖液体培养基(PDB)，在26℃、转速120r/min摇床中震荡培养14d后，过滤收集菌丝、菌丝体总DNA采用柱式真菌DNA提取试剂盒提取。rDNA的ITS部分区段PCR扩增采用通用引物ITS1/ITS4(Whiteetal.1990)。PCR反应体系总体积为20μL，包括2×EasyTaqPCRSuperMix12μL，20μmol/L的正反引物各0.5μL，模板DNA1μL，用ddH2O定容至20μL。PCR反应条件：98℃预变性2min，94℃变性4本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.新种菌株Liberomyces sp.HS52，其保藏编号为CGMCC NO.19648。/n

【技术特征摘要】
1.新种菌株Liberomycessp.HS52，其保藏编号为CGMCCNO.19648。


2.根据权利要求1所述的新种菌株Liberomycessp.HS52，其特征在于，所述菌株从红树林保护区的白榄茎部组织分离而得。


3.如权利要求1-2任意一项所述的新种菌株Liberomycessp.HS52在促进植物生长上的应用。


4.如权利要求1-2任意一项所述的新种菌株Liberomycessp.HS52在提高植物吲哚乙酸和多糖含量上的应用。


5.根据权利要求3或权利要求4所述的应用，其特征在于，所述植物为铁皮石斛。


6.一种应用如权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：张雯龙，张艳，谢玲，龙艳艳，廖仕同，农倩，
申请(专利权)人：广西壮族自治区农业科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45