用于制备无菌眼用水性丙酸氟替卡松A型纳米晶体混悬液的方法技术

本发明专利技术涉及制备丙酸氟替卡松A型的纳米晶体的无菌局部眼用水性纳米混悬液的改进方法。该无菌局部眼用纳米混悬液可用于治疗眼部炎性病症诸如眼睑炎、后眼睑炎、睑板腺功能不良和干眼，通过将所述纳米混悬液局部施用于眼睑、睫毛和睑缘来进行。

【技术实现步骤摘要】
用于制备无菌眼用水性丙酸氟替卡松A型纳米晶体混悬液的方法
本专利技术涉及制备包含在水性载体中的丙酸氟替卡松A型的纳米晶体的无菌局部眼用纳米混悬液的方法。该方法便利地适合于大规模生产的制备，并产生具有稳定的粒径分布的无菌均质水性纳米混悬液。包含丙酸氟替卡松A型纳米晶体的无菌局部眼用水性纳米混悬液通过将该纳米混悬液(或纳米晶体混悬液)局部施用于眼睑(例如上下眼睑)、睫毛和睑缘而用于治疗眼部炎性疾病或眼部炎性病症。
技术介绍
丙酸氟替卡松A型的纳米晶体为具有基本垂直于限定纳米板厚度的表面的[001]晶轴的纳米板(nanoplates)。通过WO2013/16964中公开的抗溶剂超声结晶(sonocrystallization)方法，由商购丙酸氟替卡松多晶型物1制备丙酸氟替卡松A型纳米晶体。WO2013/169647公开了丙酸氟替卡松的形态(morphic)形式(A型)的纳米晶体的制备、它们的纯化、以及包含所述纳米晶体的水性混悬液的制备。简言之，根据WO2013/169647公开的连续超声流通式放大方法(实施例11和图38)，在超声处理下使用抗溶剂结晶，然后对纳米混悬液进行加温熟炼，制备了丙酸氟替卡松的纳米晶体；通过连续流动离心法纯化生成的纳米晶体，将纳米混悬液的载体离心分离出来，将沉淀重新分散在洗涤溶液中，再次离心分散液。将该洗涤操作重复几次以达到期望的纯化水平。然后将沉淀分散到最终制剂组合物中以获得所需剂量规格的终产品。然而，WO2013/169647没有报告与纳米混悬液的无菌测试相关的任何数据。申请人已经发现，WO2013/169647公开的连续超声流通方法能够制备大量的丙酸氟替卡松A型纳米晶体，但是不适合于大规模制备无菌眼用水性纳米混悬液，因为将纯化的纳米晶体(小丸)分散入最终的水性载体中(参见图38)无法生产出具有无菌性要求的终产品，所述无菌性要求必须满足眼部递送的药物制剂的要求。此外，发现在大规模制备纳米混悬液的过程中，在将纯化的纳米晶体与最终的水性载体混合的期间，纳米晶体倾向于形成难以解聚的聚集物，因此难以得到均匀的纳米混悬液。此外，即使当临时得到一些有效的解聚和均相的纳米混悬液，这些纳米混悬液也显示出一定的重新聚集并且不稳定的倾向。正如众所周知的，由于纳米粒子具有的高表面能，其导致在纳米混悬液的制备和储存过程中会形成聚集物，因此它们具有很高的聚集倾向。纳米粒子的聚集不仅是混悬液制造过程中的关键方面；聚集还会导致各种问题，例如给药剂量不一致和患者无依从性。特别是对于预期应用于眼睑、睫毛和睑缘的纳米混悬液，聚集可能会影响患者的耐受性和潜在的安全性。确保药物纳米混悬液适当的物理稳定性的几种策略是众所周知的。例如，通常使用稳定剂，然而，为某种药物选择适合的稳定剂可能具有挑战性。US2018/0117064公开了包含糖皮质激素化合物的纳米颗粒和分散稳定剂的水混悬液的制备方法。US2018/0117064公开了稳定剂的主要功能在于充分润湿药物颗粒，以防止纳米混悬液的奥氏催熟法和聚集，并通过提供星型(asteric)或离子屏障形成物理上稳定的制剂。纳米混悬液中使用的稳定剂的典型例子是纤维素、泊洛沙姆、聚山梨酯、卵磷脂、聚油酸酯和聚维酮。WO2010/141834公开了丙酸氟替卡松的局部眼用制剂，用于治疗变应性结膜炎和/或变应性鼻结膜炎。WO2010/141834公开了多种制剂，包括具有粒径不大于30μm的混悬液；载体的实例包含磷酸盐缓冲剂、丙二醇、羟丙甲纤维素、聚山梨酯80、乙二胺四乙酸二钠和苯扎氯铵(第14页，第7-15行)。然而，WO2010/141834没有报告任何眼用制剂的制备方法以及与眼用制剂的稳定性相关的任何实验结果。WO2013/025696公开了高压均化在防止在眼用制剂中形成药物聚集物的方法中的应用，所述眼用制剂包含悬浮在包含至少一种润湿剂的水性载体中的眼用药物。特别地，当药物颗粒已经以具有适合于局部应用的粒径的微粉化形式存在时，高压均化步骤可以用于防止在眼用制剂中形成药物聚集物；事实上，WO2013/025696公开了高压均化可以应用于在润湿剂水溶液中包含预微粉化药物的混悬液中，并且高压均化不会导致粒径减小，而是稳定了已经微粉化的药物，且由此防止了药物聚集物形成。然而，WO2013/025696的方法暗示使用高成本的仪器，这增加了剂型的成本，此外，高压均化的应用能够导致纳米晶体降解。超声处理通常用于将纳米材料解聚和分散在基于水的介质中，这对于改善混悬液的均匀性和稳定性是必不可少的。尽管其被广泛使用，但是在本专利技术的纳米混悬液的制备方法的建立过程中测试的超声处理无法有效地使丙酸氟替卡松纳米晶体解聚。专利技术概述因此，需要提供一种大规模方法，其用于制备在水性载体中包含丙酸氟替卡松A型纳米晶体的眼用纳米混悬液(纳米晶体混悬液)。作为解决上述问题而进行的研究的结果，令人惊讶地发现，在高剪切、高速条件下将丙酸氟替卡松A型的纳米晶体与包含甘油(甘油)和硼酸的水性载体混合可以使纳米晶体稳定。不希望受到任何理论束缚，认为甘油和硼酸形成充当纳米晶体稳定剂的复合物；硼酸/甘油复合物在制备纳米混悬液的过程中防止纳米晶体聚集物形成，并且还在存储过程中稳定了纳米混悬液。研究结果还显示，将丙酸氟替卡松A型的纳米晶体添加到包含预先形成的硼酸/甘油复合物的最终载体中会导致残留聚集，这在根据本专利技术的方法制备纳米混悬液时未观察到，其中在丙酸氟替卡松的纳米晶体悬浮在包含硼酸、但不含甘油的载体中并在该载体中解聚后添加甘油。当丙酸氟替卡松的纳米晶体直接悬浮在包含预先形成的硼酸/甘油复合物的最终载体中并在其中解聚时，稳定作用丧失，并且纳米晶体的解聚更难以在存储过程中实现和维持。硼酸与多羟基化合物的复合物(硼酸盐-多元醇复合物)是众所周知的，并且众所周知，硼酸盐-多元醇复合物在眼用组合物中的用途在于增强抗微生物活性。WO93/21903公开了硼酸盐-多元醇复合物，例如甘露糖醇、甘油和丙二醇作为接触镜消毒液中的辅助消毒剂。WO2010/148190公开了包含两种不同的多元醇的硼酸盐-多元醇复合物，以改善多剂量眼用组合物的保存性。本专利技术涉及一种制备包含丙酸氟替卡松A型纳米晶体的无菌局部眼用水性混悬液的方法，该混悬液易于适合于大规模制备以用于商业生产并产生具有均匀的可再现粒度分布的稳定纳米混悬液。对于本专利技术，“丙酸氟替卡松A型纳米晶体”是指丙酸氟替卡松A型纳米晶体，其具有：100nm-1000nm的平均粒径；X射线粉末衍射图包括在约7.8、15.7、20.8、23.7、24.5和32.5度2θ的峰，进一步包括在约9.9、13.0、14.6、16.0、16.9、18.1和34.3度2θ的峰，并且其中所述纳米晶体为具有基本垂直于限定纳米板厚度的表面的[001]晶轴的纳米板。附图说明图1：丙酸氟替卡松A型纳米晶体的XRPD图案。图2：在40℃在T＝1周时的粒径分布示意图；包含预先本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于制备无菌局部眼用水性纳米混悬液的方法，所述纳米混悬液包含具有100nm-1000nm的平均粒径的丙酸氟替卡松A型纳米晶体和0.001％w/w-1％w/w的丙酸氟替卡松浓度，该方法包含：/na)制备水性载体1，其包含：0.5％w/w甲基纤维素4000cp、1.0％w/w硼酸、0.1％w/w乙二胺四乙酸二钠二水合物、0.055％w/w氯化钠、0.01％w/w苯扎氯铵、0.2％w/w聚山梨酯80、调节pH在7.3-7.5的1N盐酸和/或1N氢氧化钠和至100％w/w的水；/nb)混合一定量的具有平均粒径100nm-1000nm的丙酸氟替卡松A型纳米晶体与水性载体1，以得到包含2％w/w的浓度的丙酸氟替卡松的浆液；/nc)将高剪切、高速混合施加于步骤b)的浆液至少10分钟；/nd)制备水性载体2，其包含：1.8％w/w甘油、0.5％w/w甲基纤维素4000cp、1.0％w/w硼酸、0.1％w/w乙二胺四乙酸二钠二水合物、0.055％w/w氯化钠、0.01％w/w苯扎氯铵、0.2％w/w聚山梨酯80、调节pH在7.3-7.5的1N盐酸和/或1N氢氧化钠和适量至100％w/w的水；/ne)向步骤c)的浆液中添加水性载体2的等分部分，得到约1％w/w的浓度的丙酸氟替卡松；/nf)将高剪切、高速混合施加于步骤e)的浆液，直至得到目标平均粒径；/ng)通过高压灭菌给步骤f)的纳米混悬液灭菌；/nh)制备水性载体3，其包含：0.9％w/w甘油、0.5％w/w甲基纤维素4000cp、1.0％w/w硼酸、0.1％w/w乙二胺四乙酸二钠二水合物、0.055％w/w氯化钠、0.01％w/w苯扎氯铵、0.2％w/w聚山梨酯80、调节pH在7.3-7.5的1N盐酸和/或1N氢氧化钠和至100％w/w的水；并且通过过滤给水性载体3灭菌；/ni)以无菌方式向步骤g)的灭菌的纳米混悬液中添加无菌水性载体3的等分部分，以制备包含目标浓度的丙酸氟替卡松纳米晶体A型的无菌局部眼用水性纳米混悬液；/n其中丙酸氟替卡松A型的纳米晶体具有该纳米晶体的X-射线粉末衍射图，包括在约7.8、15.7、20.8、23.7、24.5和32.5度2θ的峰，进一步包括在约9.9、13.0、14.6、16.0、16.9、18.1和34.3度2θ的峰，并且其中该纳米晶体为具有基本上垂直于限定纳米板厚度的表面的[001]晶轴的纳米板。/n...

【技术特征摘要】
20190723 US 62/877599;20191202 US 62/9425511.用于制备无菌局部眼用水性纳米混悬液的方法，所述纳米混悬液包含具有100nm-1000nm的平均粒径的丙酸氟替卡松A型纳米晶体和0.001％w/w-1％w/w的丙酸氟替卡松浓度，该方法包含：
a)制备水性载体1，其包含：0.5％w/w甲基纤维素4000cp、1.0％w/w硼酸、0.1％w/w乙二胺四乙酸二钠二水合物、0.055％w/w氯化钠、0.01％w/w苯扎氯铵、0.2％w/w聚山梨酯80、调节pH在7.3-7.5的1N盐酸和/或1N氢氧化钠和至100％w/w的水；
b)混合一定量的具有平均粒径100nm-1000nm的丙酸氟替卡松A型纳米晶体与水性载体1，以得到包含2％w/w的浓度的丙酸氟替卡松的浆液；
c)将高剪切、高速混合施加于步骤b)的浆液至少10分钟；
d)制备水性载体2，其包含：1.8％w/w甘油、0.5％w/w甲基纤维素4000cp、1.0％w/w硼酸、0.1％w/w乙二胺四乙酸二钠二水合物、0.055％w/w氯化钠、0.01％w/w苯扎氯铵、0.2％w/w聚山梨酯80、调节pH在7.3-7.5的1N盐酸和/或1N氢氧化钠和适量至100％w/w的水；
e)向步骤c)的浆液中添加水性载体2的等分部分，得到约1％w/w的浓度的丙酸氟替卡松；
f)将高剪切、高速混合施加于步骤e)的浆液，直至得到目标平均粒径；
g)通过高压灭菌给步骤f)的纳米混悬液灭菌；
h)制备水性载体3，其包含：0.9％w/w甘油、0.5％w/w甲基纤维素4000cp、1.0％w/w硼酸、0.1％w/w乙二胺四乙酸二钠二水合物、0.055％w/w氯化钠、0.01％w/w苯扎氯铵、0.2％w/w聚山梨酯80、调节pH在7.3-7.5的1N盐酸和/或1N氢氧化钠和至100％w/w的水；并且通过过滤给水性载体3灭菌；
i)以无菌方式向步骤g)的灭菌的纳米混悬液中添加无菌水性载体3的等分部分，以制备包含目标浓度的丙酸氟替卡松纳米晶体A型的无菌局部眼用水性纳米混悬液；
其中丙酸氟替卡松A型的纳米晶体具有该纳米晶体的X-射线粉末衍射图，包括在约7.8、15.7、20.8、23.7、24.5和32.5度2θ的峰，进一步包括在约9.9、13.0、14.6、16.0、16.9、18.1和34.3度2θ的峰，并且其中该纳米晶体为具有基本上垂直于限定纳米板厚度的表面的[001]晶轴的纳米板。


2.根据权利要求1的方法，其中丙酸氟替卡松在最终无菌局部眼用水性纳米混悬液中的浓度为0.001％-0.5％w/w。


3.根据权利要求1的方法，其中丙酸氟替卡松在最终无菌局部眼用水性纳米混悬液中的浓度为0.5％w/w、0.25％w/w、0.2％w/w、0.1％w/w、0.05％w/w、0.03％w/w、0.01％w/w或0.005％w/w。


4.根据权利要求1-3任一项的方法，其中步骤c)和f)的高剪切、高速混合以6000RPM进行。


5.根据权利要求4的方法，其中在步骤f)中，将高剪切、高速混合施加至少10分钟。


6.根据权利要求1-5任一项的方法，其中将水性载体1和2在其应用前通过0.2μm滤器过滤。


7.根据权利要求1-6任一项的方法，其中步骤g)的灭菌通过在约122℃下对步骤f)的纳米混悬液高压灭菌约40分钟进行。


8.用于制备无菌局部眼用水性纳米混悬液的方法，所述纳米混悬液包含具有平均粒径100nm-1000nm的丙酸氟替卡松A型纳米晶体，且丙酸氟替卡松浓度为0.001％w/w-1％w/w，该方法包含：
a-1)将具有平均粒径100nm-1000nm的丙酸氟替卡松A型纳米晶体灭菌；
b-1)制备水性载体1，其包含：0.5％w/w甲基纤维素4000cp、1.0％w/w硼酸、0.1％w/w乙二胺四乙酸二钠二水合物、0.055％w/w氯化钠、0.01％w/w苯扎氯铵、0.2％w/w聚山梨酯80、调节pH在7.3-7.5的1N盐酸和/或1N氢氧化钠和适量至100％w/w的水；并且通过过滤将所述水性载体1灭菌；
c-1)以无菌方式混合一定量的灭菌的丙酸氟替卡松纳米晶体A型与一定量的灭菌的水性载体1，得到包含２％w/w的浓度的丙酸氟替卡松的浆液；
d-1)向步骤c-1)的浆液施加高剪切、高速混合至少10分钟；
e-1)制备水性载体2，其包含：1.8％w/w甘油、0.5％w/w甲基纤维素4000cp、1.0％w/w硼酸、0.1％w/w乙二胺四乙酸二钠二水合物、0.055％w/w氯化钠、0.01％w/w苯扎氯铵、0.2％w/w聚山梨酯80、调节pH在7.3-7.5的1N盐酸和/或1N氢氧化钠和适量至100％w/w的水；并且通过过滤将所述水性载体2灭菌；
f-1)向步骤d-1)的浆液中以无菌方式添加灭菌的水性载体2的等分部分，得到约1％w/w的浓度的丙酸氟替卡松；
g-1)向步骤f-1)的浆液施加高剪切、高速混合，直至得到目标平均粒径；
h-1)制备水性载体3，其包含：0.9％w/w甘油、0.5％w/w甲基纤维素4000cp、1.0％w/w硼酸、0.1％w/w乙二胺四乙酸二钠二水合物、0.055％w/w氯化钠、0.01％w/w苯扎氯铵、0.2％w/w聚山梨酯80、调节pH在7.3-7.5的1N盐酸和/或1N氢氧化钠和至100％w/w的水；并且通过过滤将所述水性载体3灭菌；
i-1)向步骤g-1)的纳米混悬液中以无菌方式添加灭菌的水性载体3的等分部分，以制备包含终浓度的丙酸氟替卡松纳米晶体A型的无菌局部眼用水性纳米混悬液；
其中丙酸氟替卡松A型的纳米晶体具有X-射线粉末衍射图，包括在约7.8、15.7、20.8、23.7、24.5和32.5度2θ的峰，进一步包括在约9.9、13.0、14.6、16.0、16.9、18.1和34.3度2θ的峰，并且其中该纳米晶体为具有基本上垂直于限定纳米板厚度的表面的[001]晶轴的纳米板。


9.根据权利要求8的方法，其中丙酸氟替卡松在最终无菌局部眼用水性纳米混悬液中的浓度为0.001％-0.5％w/w。


10.根据权利要求8的方法，其中丙酸氟替卡松在最终无菌局部眼用水性纳米混悬液中的浓度为0.5％w/w、0.25％w/w、0.2％w/w、0.1％w/w、0.05％w...

【专利技术属性】
技术研发人员：JM·布科夫斯基，A·纳德卡尔尼，J·L·波伊尔，B·杜克斯罗瓦查克罗恩，T·纳夫拉蒂尔，
申请(专利权)人：尼科斯眼药公司，
类型：发明
国别省市：美国;US