多步免疫测定方法及其自动测量装置制造方法及图纸

本发明专利技术涉及一种连续多步免疫测定若干生物样品中生物物质的自动测定仪器，方法和使用该仪器所用试剂。在采用免疫型测量方法中所使用的洗涤装置，包括在装有待分析样品和进行测量的适宜的一种或多种试剂的反应管下部形成磁场的构件，试剂为磁球状，还包括一个洗涤头，该洗涤头配有抽吸管内装有的液体的抽吸器，以及可分配适宜作用底物的分配器。免疫型自动测量分析的许多样品中至少一种物质的仪器，其分析循环由若干连续步骤构成。（*该技术在2010年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种连续多免疫测定若干生物样品中至少一种生物物质的自动测定仪器、方法和使用该仪器所用试剂。本专利技术尤其涉及(但不受限)对同一样品同时测定其配位体、抗配位体、半抗原或在待分析的生物液体中可能存在的任何其他生物物质。用免疫方法确定生物液体中生物物质的存在或配位体浓度的方法目前已熟知，它们基于待测物质与一种或多种抗体之间生成复合物，抗体尤其是可用酶标记的复合物的一种组成部分，在分离抗原或复合标记的抗体之后能定量检测和/或分析其抗原或未复合标记的抗体。RIA与ELISA方法的原理同样是熟知的。尤其是，ELISA法(Enzyme Liniced immunusorbent assay)是一种灵敏度很高、测定抗体的免疫酶法，例如，它在于使用一种免疫吸附复合物，这种复合物主要由一种定位在固体载体上抗原组成，俘获待测物的生物介质(如血清)中含有的特异性抗体，这样得到的免疫一复合物可用一种酶标记的抗-粒种抗体，此后加入一种特异性的酶作用底物，因酶的降解作用而出现一种带颜色的产物来测定，其颜色的强度与进行反应的酶的量成正比，与所检测生物介质中的抗体量成正比;其光的强度可用肉眼判断或用任何适宜的方法，尤其是测光法测定。在利用多相的上述免疫方法中，作为免疫反应载体的这种固相的性质是特别重要的，因为它决定了测量的灵敏度。ELISA试验所提出的载体，尤其是由戊二醛活化的聚丙烯酰胺颗粒(AVRAMEAS和TERNYNCK，Immunochemistry，1969，6，PP53-65);由溴化氰活化的纤维素颗粒，其上由共价键定位抗体(ENGVALL和PERLMANN，Immunochemistry，1971，8，PP871-874);聚苯乙烯管，其表面上通过单一的物理吸附定位抗原(ENGVALL和PERLMANN，J.Immum.1972，160，PP129-136);由溴化氰活化的纸盘，其上定位一种抗体或一种抗原(BRIGHTON和COLL.Scand.1974，29，PP166-174)。然而，实际上最通用的载体是塑料表面，它是聚苯乙烯或PVC的微型板，有呈U或V形的96个平底坑，或者有8个坑的棒。另外一种载体，由曾描述过的磁球构成，可以使实施方法实现自动化。尤其可以注意到，欧洲专利38730中描述的磁球，RHONE POULENC SPECIALITES CHEMIQUES描述的磁性聚合物胶乳，欧洲专利125995(AD-VANCED MAGNETICS INC.)中描述的磁球，法国专利FR2262805与FR2454098(CORNING GLASS WORKS)描述的磁球，或欧洲专利申请(SE-RONDDIAGNOSRTICSPARTNERS)105714、190006、238353、249357中描述的磁球。上述文献中描述的各种磁球同样适用于诸如ELISA或RIA的免疫测量。无论是RIA法还是ELISA法都可以多种方式使用;-间接法是测量抗体最简单的方法。其抗原定位在微型板上(在蛋白质存在的情况下以阻断未占据的位置)。加入待测量的血清，并由加入用适宜方法标记的抗-Ig抗体，尤其与一种酶连结的抗-Ig抗体，并在加入酶作用底物后用分光光度法定量测量而探测出定位的抗体。-一种竞争技术可用于测量抗原。正如上述技术那样，其抗原始终定位在这些微型板上。加入抗原和少量抗体的混合物。定位在该微型板上抗体的量比被中和的抗原分子少得多，不再有抗体分子。-夹层或双位点方法可用于测量抗原或抗体。为了测量抗原，由抗体复盖微型板，加入抗原，然后使用以适当方式标记特异性抗体，尤其是与一种酶联结的特异性抗体，并加酶作用底物显色。然而本技术只适合二价抗原或具有多个决定子的抗原。为了测量抗体，正好相反，抗原复盖微型板，再相继加入待测量的抗体和用酶标记的抗原。然而，所述方法实施起来完全不是自动化的，因为它们不能自动测量多个样品中至少一种物质。事实上，使用这些不同方法只能参数与参数类型相同(竞争或夹层或免疫俘获)成批测量，或者连续回流，或者断续回流测量，其速度较慢。当然，特别是在药物分析试验室配备随机存取的多参数测量、运行非常快速且价格便宜的自动化装置，是人们理想中的设备。随机存取的多参数测量，尤其是对生物样品的多参数测量，可以测量20个不同参数，而对后一种样品只能测量例如2个参数。因此，申请人的目的是提出一种方法和一种测定和/或自动测量的装置，它能测量至少一种物质，尤其是配位体、反配位体、半抗原或其他生物分子，这种方法和设备比现有技术中的设备和方法能更好地满足实际的需要，尤其在于它们能对每个样品在相对短的时间里(实施测量节奏快)并且成本较低地随机存取多参数测量，还在于它们可使用少得多的试剂，更具体地说，使用比较简单的“单试剂”，还在于它们能进行不同类型的测量，例如，竞争法，双位点法以及免疫俘获法。 本
技术实现思路
是在采用免疫类型测量方法中所使用的洗涤装置，其特征在于，它包括在装有待分析样品和进行测量的适宜的一种或多种试剂的反应管下部至少一个形成磁场的构件，至少一种所述试剂为磁球状，它还包括一个洗涤头，该洗涤头配有至少一个抽吸上述管子内装有的液体的抽吸器，以及可能至少一个分配适宜酶作用底物的分配器。本专利技术还有一个内容是，免疫型自动测量待分析的许多样品中至少一种物质的仪器，其分析循环由若于连续步骤构成，其特征在于，这种仪器包括(1)样品组件，该样品组件由装有上述样品的若干管子的支承件构成，这种样品组件同微处理控制机相连; (2)反应组件，该反应组件构成如下用来相继回收所述整数量样品与整数量的适宜试剂的管子的支承件，以及本专利技术洗涤装置，即包括在反应管下部形成磁场的构件，以及一个洗涤头，该洗涤头配有至少一个抽吸上述管内装有的液体的抽吸器，至少一个分配上述管中洗涤液的分配器，以及可能至少一个分配适宜酶作用底物的分配器。所述的反应组件与微处理控制机相连; (3)反应组件由装有进行不同测量所适合的一种/多种试剂的若干管子的若干支承件组成，至少一种所述试剂呈磁球状; (4)上述反应组件的管中样品抽取器和分配器; (5)上述反应组件的管中试剂抽取器和分配器; (6)在反应组件中进行反应的适宜的读数器，以及(7)信息系统由控制不同组件及(1)至(6)构件的计算机构成，可实施连续的分析循环。本专利技术分析循环包括组成至少一次免疫培养的若干步骤，以及组成显色培养的若干步骤，尤其是组成酶培养的若干步骤，每个步骤相应于在反应组件不管子的顺序位置数，管子在一个位置的停留时间是恒定的。根据本专利技术的特征，反应组件中固定洗涤装置上的洗涤头包括例如抽吸器和分配器，支承件装有抽吸和分配适宜溶液的针，这种支承件沿垂直轴移动，其移动同反应管的移动同步。根据本专利技术另一个特征，每个形成磁场的构件最好由一对面对面布置并配置在两个连续的反应管两侧的磁铁构成，其通过反应组件的旋转送入上述一对磁铁中间。根据这种特征的有利布置，每对磁铁同磁通线的衔铁相联结，以便所形成的磁场上同时限定在两个连续的管上。根据本仪器的其他一个特征，其洗涤装置包括四个形成磁场的构件，最好是四对磁铁。根据本专利技术仪器的其他特征，反应组件、样品组件和试剂组件中每个都有一个由转动传动的环，上述本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于实施免疫型测量方法的洗涤装置，其特征在于，它包括至少一个在反应管（Ｔｒ）下部形成磁场的构件，其反应管内装有待分析的样品，以及一种或若干种进行测量的适宜试剂，其中包括至少一种上述呈磁球状的试剂，和一个洗涤头（Ｌ），它包括至少一个装在所述管中液体的抽吸管（２０），至少一个上述管的洗涤液分配器（２１），还可能包括至少一个适宜的酶作用底物的分配器（２２）。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：乌赞米切尔，吉奎尔西尔里，朗特沃特埃多尔德，纳明尼奥达里奥，
申请(专利权)人：莫克利发公司，
类型：发明
国别省市：FR[法国]