WAS基因的gRNA及其应用制造技术

本发明专利技术提供了WAS基因的gRNA及其应用，所述gRNA的靶序列位于所述WAS基因的2号外显子和7号外显子，包括SEQ ID NO:1或如SEQ ID NO:2所示的核酸序列。本发明专利技术的gRNA的靶序列包括WAS基因的2号外显子和7号外显子，通过敲除兔受精卵中的WAS基因，构建的Wiskott‑Aldrich综合征兔模型可以准确模拟人Wiskott‑Aldrich综合征表型，有利于更好地理解Wiskott‑Aldrich综合征致病机理，为发展高效准确的诊断方法并提供更多的有效治疗方案提供重要参考。

【技术实现步骤摘要】
WAS基因的gRNA及其应用
本专利技术属于生物
，涉及WAS基因的gRNA及其应用，尤其涉及WAS基因的gRNA及其在构建Wiskott-Aldrich综合征兔模型中的应用。
技术介绍
Wiskott-Aldrich综合征(Wiskott-Aldrichsyndrome，WAS)是一种由WAS基因突变导致的X连锁的隐性遗传病。根据基因突变类型、WAS蛋白表达情况和临床症状，目前临床上将Wiskott-Aldrich综合征分为典型WAS、X-连锁血小板减少症(X-linkedthrombocytopenia，XLT)、间歇性X-连锁血小板减少症(intermittentX-linkedthrombocytopenia，IXLT)和X-连锁粒细胞减少症(X-linkedneutrapenia，XLN)。其中典型WAS最为严重，若不及时治疗，患者的中位生存期只有10～15年。WAS基因特定表达于造血细胞中，其编码的WAS蛋白(WASP)是一种肌动蛋白成核促进因子，功能复杂，涉及很多重要的生物学活动。目前Wiskott-Aldrich综本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.WAS基因的gRNA，其特征在于，所述gRNA的靶序列位于所述WAS基因的2号外显子和7号外显子。/n

【技术特征摘要】
1.WAS基因的gRNA，其特征在于，所述gRNA的靶序列位于所述WAS基因的2号外显子和7号外显子。


2.根据权利要求1所述的gRNA，其特征在于，所述gRNA包括SEQIDNO:1或如SEQIDNO:2所示的核酸序列。


3.gRNA表达载体，其特征在于，所述gRNA表达载体包括权利要求1或2所述的gRNA。


4.一种权利要求3所述的gRNA表达载体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)根据WAS基因的2号外显子和7号外显子序列设计gRNA；
(2)将得到的gRNA插入表达载体中，得到所述gRNA表达载体。


5.一种载体组合物，其特征在于，所述载体组合物包括权利要求3所述的gRNA表达载体；
优选地，所述载体组合物还包括Cas9表达载体。


6.一种CRISPR/Cas9基因编辑系统，其特征在于，所述CRISPR/Cas9基因编辑系统包括权利要求1或2所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：赖良学，周娟娟，廖媛，
申请(专利权)人：中国科学院广州生物医药与健康研究院，
类型：发明
国别省市：广东;44