用于区分动物感染布氏杆菌或布氏杆菌菌影疫苗的试剂盒制造技术

本发明专利技术提供了一种用于区分动物感染布氏杆菌或布氏杆菌菌影疫苗的试剂盒，涉及生物检测技术领域。该试剂盒包含L7/L12‑SodC融合蛋白，L7/L12‑SodC融合蛋白含有核糖体L7/L12片段和Cu‑Zn超氧化歧化酶片段；若L7/L12‑SodC融合蛋白捕获抗体的量低于阈值，则待测样品感染的为布氏杆菌菌影疫苗；若L7/L12‑SodC融合蛋白捕获抗体的量高于阈值，则待测样品感染的为布氏杆菌。该试剂盒缓解了现有技术中存在的动物养殖场所布氏杆菌净化困难的问题。

【技术实现步骤摘要】
用于区分动物感染布氏杆菌或布氏杆菌菌影疫苗的试剂盒
本专利技术涉及生物检测
，尤其是涉及一种用于区分动物感染布氏杆菌或布氏杆菌菌影疫苗的试剂盒。
技术介绍
近年来，布氏杆菌病在我国内蒙古、新疆、青海等重要牧区的牛、羊发病率非常高，相应的牧区里牧民、兽医防疫人员的发病率也不断上升。快速扼制布氏杆菌的扩散成了当务之急，根据国外其他国家的控制手段及国内部分地区成功控制布氏菌病疫情的经验，接种疫苗是首选。布氏杆菌疫苗研发前期经历了几个阶段，如：弱毒疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗等，但最终发现，仅有弱毒疫苗能够起到较好的控制和保护作用，而弱毒疫苗的使用，一是对防疫人员不安全，二是不利于养殖场布氏菌病的净化，造成一些养殖场不愿意接种免疫，在一定程度上反而促进了布氏杆菌病疫情的发展。菌影疫苗因其具有布氏杆菌的菌壳，保留了完整的LPS、外膜蛋白等重要免疫原，具有与弱毒菌株类似的免疫效力；同时其细胞器、细胞质等均流出菌体外，不具备繁殖能力，属于生物灭活疫苗，可以有效控制布氏杆菌的扩散，对动物、防疫人员、牧民等具有非常好的安全性，从而成为布氏杆菌疫苗的候选之一。从目前的研究数据来看，布氏杆菌菌影疫苗代替弱毒疫苗即将成为可能。菌影疫苗广泛使用后，面临最大问题是如何鉴别。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种用于区分动物感染布氏杆菌或布氏杆菌菌影疫苗的试剂盒，缓解了现有技术中存在的动物养殖场所布氏杆菌净化困难的问题。本专利技术的第二目的在于提供一种非诊断治疗目的的区分动物接种布氏杆菌菌影疫苗或布氏杆菌感染的方法。为解决上述技术问题，本专利技术特采用如下技术方案：根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种用于区分动物感染布氏杆菌或布氏杆菌菌影疫苗的试剂盒，所述试剂盒包含L7/L12-SodC融合蛋白，所述L7/L12-SodC融合蛋白含有核糖体L7/L12片段和Cu-Zn超氧化歧化酶片段；若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获抗体的量低于阈值，则待测样品感染的为布氏杆菌菌影疫苗；若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获抗体的量高于阈值，则待测样品感染的为布氏杆菌。优选地，所述L7/L12-SodC融合蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。优选地，所述试剂盒为间接ELISA检测试剂盒，所述试剂盒中用于包被于固相载体的抗原包括所述L7/L12-SodC融合蛋白。优选地，所述L7/L12-SodC融合蛋白的浓度为80～120μg/ml，优选为100μg/ml。优选地，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值＜0.8，则待测样品判定为感染布氏杆菌菌影疫苗；优选地，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值在0.22～0.79之间，则待测样品判定为感染布氏杆菌菌影疫苗。优选地，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值≥0.8，则待测样品判定为感染布氏杆菌；优选地，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值在0.8～2.48之间，则待测样品判定为感染布氏杆菌。优选地，所述试剂盒还包括用于结合捕获抗体的二抗，所述二抗被标记物标记；所述标记物包括发光基团和/或发光基团的猝灭基团，同位素，受体和其配体其中之一，抗原和其抗体其中之一，或者，酶和其底物其中之一；优选地，二抗被辣根过氧化物酶标记，采用DAB显色。根据本专利技术的另一个方面，本专利技术还提供了一种区分动物接种布氏杆菌菌影疫苗或布氏杆菌感染的方法，包括使用所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获待测样品中的抗体，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获抗体的量低于阈值，则待测样品感染的为布氏杆菌菌影疫苗；若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获抗体的量高于阈值，则待测样品感染的为布氏杆菌；优选地，所述L7/L12-SodC融合蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。优选地，采用间接ELISA的方法检测待测样品中的抗体，以所述L7/L12-SodC融合蛋白作为包被于固相载体的抗原。优选地，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值＜0.8，则待测样品判定为感染布氏杆菌菌影疫苗；和/或，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值≥0.8，则待测样品判定为感染布氏杆菌；优选地，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值在0.22～0.79之间，则待测样品判定为感染布氏杆菌菌影疫苗；优选地，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值在0.8～2.48之间，则待测样品判定为感染布氏杆菌；优选地，所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体与被辣根过氧化物酶标记的二抗结合后，采用DAB显色，然后检测OD492nm值。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术提供的用于区分动物感染布氏杆菌或布氏杆菌菌影疫苗的试剂盒，以含有布氏杆菌核糖体L7/L12片段和Cu-Zn超氧化歧化酶片段的融合蛋白捕获待测样本中的抗体，通过区分L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的量来区分待测样品是由于感染布氏杆菌而获得抗体，还是由于免疫了布氏杆菌菌影疫苗而产生的抗体。本专利技术提供的用于区分动物感染布氏杆菌或布氏杆菌菌影疫苗的试剂盒能够鉴别牛感染的布氏杆菌病是因布氏杆菌菌影疫苗株引起或感染野毒株或弱毒株引起，为动物养殖场所提供数据，便于动物养殖场所对布氏杆菌病的净化管理。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术实施例1提供的纯化后L7/L12-SodC融合蛋白SDS－PAGE电泳图。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了一种用于区分动物感染布氏杆菌或布氏杆菌菌影疫苗的试剂盒，所述试剂盒包含L7/L12-SodC融合蛋白，所述L7/L12-SodC融合蛋白含有布氏杆菌核糖体L7/L12片段和Cu-Zn超氧化歧化酶片段。布氏杆菌核糖体L7/L12和Cu-Zn超氧化歧化酶是布氏杆菌比较稳定的抗原，在体内能够产生稳定水平的抗体，因此本专利技术使用含有核糖体L7/L12片段和Cu-Zn超氧化歧化酶片段的融合蛋白来捕获待测样品中的抗体，可保证不同样品间捕获到的抗体水平稳定。布氏杆菌菌影疫苗是通过调控噬菌体裂解基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于区分动物感染布氏杆菌或布氏杆菌菌影疫苗的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含L7/L12-SodC融合蛋白，所述L7/L12-SodC融合蛋白含有核糖体L7/L12片段和Cu-Zn超氧化歧化酶片段；/n若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获抗体的量低于阈值，则待测样品感染的为布氏杆菌菌影疫苗；若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获抗体的量高于阈值，则待测样品感染的为布氏杆菌。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于区分动物感染布氏杆菌或布氏杆菌菌影疫苗的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含L7/L12-SodC融合蛋白，所述L7/L12-SodC融合蛋白含有核糖体L7/L12片段和Cu-Zn超氧化歧化酶片段；
若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获抗体的量低于阈值，则待测样品感染的为布氏杆菌菌影疫苗；若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获抗体的量高于阈值，则待测样品感染的为布氏杆菌。


2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述L7/L12-SodC融合蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。


3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒为间接ELISA检测试剂盒，所述试剂盒中用于包被于固相载体的抗原包括所述L7/L12-SodC融合蛋白。


4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述L7/L12-SodC融合蛋白的浓度为80～120μg/ml，优选为100μg/ml。


5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值＜0.8，则待测样品判定为感染布氏杆菌菌影疫苗；
优选地，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值在0.22～0.79之间，则待测样品判定为感染布氏杆菌菌影疫苗。


6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值≥0.8，则待测样品判定为感染布氏杆菌；
优选地，若所述L7/L12-SodC融合蛋白捕获的抗体的OD492nm值在0.8～2.48之间，则待测样品判定为感染布氏杆菌。


7.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺笋，任立松，何传雨，潘毅平，李延涛，任郭子君，
申请(专利权)人：天康生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：新疆;65