一种新月弯孢菌的LAMP田间检测方法及其应用技术

本发明专利技术提供一种田间快速检测玉米新月弯孢菌的LAMP方法、检测试剂盒及其应用，属于生物技术领域。该LAMP检测方法基于新月弯孢菌的Ras同源蛋白Clg2p基因片段，设计特异性LAMP引物Cl‑F3、Cl‑B3、Cl‑FIP、Cl‑BIP建立LAMP检测体系，并研发了相应的试剂盒用于新月弯孢菌的鉴定。该技术适合于田间检测和鉴定新月弯孢菌，从而进行玉米弯孢叶斑病的早期诊断。本发明专利技术的检测方法具有特异性强、灵敏度高、实用性强、操作简便快速等特点。本发明专利技术的LAMP技术及其应用有助于了解新月弯孢菌的田间发生规律，在抗性品种布局及玉米弯孢叶斑病的防治中具有重要价值。

【技术实现步骤摘要】
一种新月弯孢菌的LAMP田间检测方法及其应用
本专利技术涉及植物病害的分子生物学检测技术，具体的说涉及快速鉴定新月弯孢菌的LAMP快速分子检测技术
技术介绍
玉米弯孢叶斑病又称黄斑病、拟眼斑病，是一种重要的世界性病害，在美洲、欧洲、亚洲及非洲的玉米产区都有发生。20世纪80年代中后期，在我国华北地区首次发现。现已扩展到我国玉米产区的大多省份，尤其在北方玉米产区大面积流行，是我国继玉米大、小斑病后又一严重的灾变性病害。该病主要危害叶片，也危害叶鞘和苞叶。抽雄后病害迅速扩展蔓延，植株布满病斑，叶片提早干枯，一般减产20％～30％，严重地块减产50％以上，甚至绝收。玉米弯孢叶斑病由新月弯孢菌(Curvularialunata)引起，其无形态为弯孢霉属，有性态为子囊菌门旋孢腔菌属。该菌能侵染大部分单子叶植物，可引起玉米叶斑病、高粱叶枯病、大麻叶斑病、甘蔗幼苗枯萎病等。玉米弯孢叶斑病初期病斑较小，难以与玉米小斑病、玉米大斑病、玉米褐斑病等区分鉴别。症状鉴定还需要科赫氏法则验证，经过病原菌分离培养、鉴定、接种、症状识别等，周期长，效率低下。培养病原本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速鉴定新月弯孢菌的LAMP检测引物，由1对外侧引物、1对内侧 组成的引物组合，各引物序列如下：/nCl-F3：5’GGGAGACGGACAACCGAT3’/nCl-B3：5’AGGGCAAGAATTAACGGCC3’/nCl-FIP：5’TGGCTCTGGAGATGGCACCT-CAACGGCAAGATACCGCC3’/nCl-BIP：5’AACAAAAAACGGCTCGAGTGGC-ATGTTGACCATTTCCCTGGC3’。/n

【技术特征摘要】
1.一种快速鉴定新月弯孢菌的LAMP检测引物，由1对外侧引物、1对内侧组成的引物组合，各引物序列如下：
Cl-F3：5’GGGAGACGGACAACCGAT3’
Cl-B3：5’AGGGCAAGAATTAACGGCC3’
Cl-FIP：5’TGGCTCTGGAGATGGCACCT-CAACGGCAAGATACCGCC3’
Cl-BIP：5’AACAAAAAACGGCTCGAGTGGC-ATGTTGACCATTTCCCTGGC3’。


2.一种快速鉴定新月弯孢菌的LAMP检测试剂盒，主要包含：引物混合液：外侧引物Cl-F3/Cl-B3各0.5μM、内侧引物Cl-FIP/Cl-BIP各1.5μM。


3.扩增混合...

【专利技术属性】
技术研发人员：田雪亮，赵松宇，孙婷婷，
申请(专利权)人：河南科技学院，
类型：发明
国别省市：河南;41