一种HLA-B位点等位基因分型试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了一种HLA‑B位点等位基因分型试剂盒及其检测方法，该试剂盒包括用于扩增覆盖HLA‑B位点第2,3,4外显子区域的扩增引物，以及分别针对第2,3,4外显子区域的特异性测序引物。该检测方法通过扩增引物对DNA样本进行扩增，然后分别使用针对HLA‑B位点第2,3,4外显子区域的测序引物对扩增产物中的第2,3,4外显子进行测序，将得到的测序结果与数据库比对得到HLA‑B位点等位基因型。该方法可以使用扩增引物直接针对HLA‑B位点进行扩增及使用测序引物第2,3,4外显子区域进行测序，获得B位点上各种等位基因型，避免了与其同源性极高的HLA‑A,C位点基因序列的干扰，提高了分型结果的准确性。

【技术实现步骤摘要】
一种HLA-B位点等位基因分型试剂盒及其检测方法
本专利技术属于基因检测
，具体涉及一种HLA-B位点等位基因分型试剂盒及其检测方法。
技术介绍
人类白细胞抗原(HLA)由位于人类6号染色体短臂的基因编码产生，经典的HLA-Ⅰ类分子包括A,B,C位点，HLA-Ⅱ类分子包括DR,DQ,DP位点，HLA各位点上的基因是以单倍体形式连锁遗传，其中HLA-B位点是迄今为止发现等位基因多态性最复杂的位点。WHO已报道的HLA-B位点等位基因数为7255个，中国人群统计的B位点等位基因数为485个，其中常见等位基因为54个。HLA-B位点除了在异基因造血干细胞移植和器官移植中发挥重要作用外，更与疾病的遗传性、发病机制及疾病进展、药物的毒性或不良反应、生殖健康及不孕不育等密切相关。尤其是HLA-B位点等位基因分型比传统血清型相比，对疾病的诊断及预后判断更精准。临床应用领域为：HLA-B27等位基因分型在预测及诊断强直性脊柱炎中的临床价值；在预测患者药物不良反应中的临床价值，如抗癫痫药物检测B*15:02基因，抗病毒药阿巴卡伟检测B*57:01基本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种HLA-B位点等位基因分型试剂盒，其特征在于：包括用于扩增覆盖HLA-B位点第2,3,4外显子区域的扩增引物，以及分别针对第2,3,4外显子区域的特异性测序引物；/n所述扩增引物的核苷酸序列如下所述：/n上游引物BF：TCTCAGGGTCTCAGGGTCCG，如SEQ ID NO .1所示；/n下游引物BR：CAGCCAGGCCAGCAACAATG，如SEQ ID NO .2所示；/n针对第2外显子的测序引物如下所述：/n上游引物B2F：CCCAGGCTCCCACTCCAT，如SEQ ID NO .3所示；/n下游引物B2R：GGGGAGTCGTGACCTGC，如SEQ ID NO ....

【技术特征摘要】
1.一种HLA-B位点等位基因分型试剂盒，其特征在于：包括用于扩增覆盖HLA-B位点第2,3,4外显子区域的扩增引物，以及分别针对第2,3,4外显子区域的特异性测序引物；
所述扩增引物的核苷酸序列如下所述：
上游引物BF：TCTCAGGGTCTCAGGGTCCG，如SEQIDNO.1所示；
下游引物BR：CAGCCAGGCCAGCAACAATG，如SEQIDNO.2所示；
针对第2外显子的测序引物如下所述：
上游引物B2F：CCCAGGCTCCCACTCCAT，如SEQIDNO.3所示；
下游引物B2R：GGGGAGTCGTGACCTGC，如SEQIDNO.4所示；
针对第3外显子的测序引物如下所述：
上游引物B3F：GGCCAGGGTCTCACA，如SEQIDNO.5所示；
下游引物B3R：GGCGACATTCTAGCGC，如SEQIDNO.6所示；
针对第4外显子的测序引物如下所述：
上游引物B4F：AGATGCAAAGCGCCTGAA，如SEQIDNO.7所示；
下游引物B4R：GGCTCCTGCTTTCCCTGA，如SEQIDNO.8所示。


2.根据权利要求1所述的一种HLA-B位点等位基因分型试剂盒，其特征在于：覆盖HLA-B位点第2,3,4外显子区域的扩增体系包括：上游引物BF、下游引物BR、10×buffer、dNTP、Taq酶和DNA样本。


3.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：何军，邱桥成，
申请(专利权)人：苏州大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：江苏;32