一种抗肿瘤活性成分组合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种抗肿瘤活性成分组合物及其制备方法和应用，制备方法包括以下步骤：S1.制备药物混合物；S2.制备壳聚糖微球；S3.制备载药壳聚糖微球A；S4.制备载药壳聚糖微球B；S5.将IL‑2加入壳聚糖稀酸溶液中，在10‑30℃持续搅拌，并加入甘油磷酸钠溶液，然后加入S3所得载药壳聚糖微球A和S4所得载药壳聚糖微球B，混合均匀，即得。本发明专利技术通过制备含有载药微球的壳聚糖凝胶态组合物，形成了含有抗肿瘤活性因子的药物组合物，生物相容性强，缓释效果好，对正常组织无毒副作用，还具有一定的抗菌性。

【技术实现步骤摘要】
一种抗肿瘤活性成分组合物及其制备方法和应用
本专利技术属于药物制备
，尤其涉及一种抗肿瘤活性成分组合物及其制备方法和应用。
技术介绍
目前随着现代科技的日益发展，人们生活水平也随之提高，但环境破坏、空气污染、食品安全等很多因素的综合作用以及影响下，人们的身体健康状况却日益下降，肿瘤患者越来越多，使得癌症成了当今社会导致死亡的首位病因，严重的威胁到我们的生命。如何有效地抑制肿瘤，成为人们关注的焦点。对于中晚期癌症患者，体质一般较弱，常失去外科手术指征，无法采用强烈的放化疗。缓释药物粒子植入病灶局部浓度高，且局部有轻微炎症反应，无细胞变性、坏死及其他不良反应，是一种微创、高效低毒副反应的方法，提高了患者生存质量、延长生存期。但现有的缓释药物，可能由于局部浓度过高或生物相容性不够高，而对人体有一些毒副作用，此外现有的缓释药物，药物负载较为单一。
技术实现思路
本专利技术的目的在于：针对上述现有技术中存在的现有的缓释药物粒子对人体有一些毒副作用，且药物负载较为单一等不足，提供一种抗肿瘤活性成分组合物及其制备方法和应用。本专利技术采用的技术方案如下：一种抗肿瘤活性成分组合物的制备方法，包括以下步骤：S1.将alloferon-1肽加入顺铂溶液中，过滤灭菌，得到药物混合物；S2.将壳聚糖溶于乙酸溶液中，然后用NaOH溶液调节体系的pH值为5-6，再以15-30mL/h的速度滴入三聚磷酸钠溶液，继续搅拌12-24h，分离，洗涤干燥，即得壳聚糖微球；S3.将S2所得壳聚糖微球分散于水中制为微球悬浮液，再加入S1所得药物混合物，搅拌均匀后静置2-6h，得到载药壳聚糖微球A；S4.将壳聚糖在乙酸溶液中溶解，然后加入盐酸四环素，溶解后加入吐温-80，超声1-2min，作为水相；向液体石蜡中加入戊二醛溶液和司班-80，超声1-3min，作为油相；将水相滴入油相中，持续搅拌30-40min后，再滴入戊二醛溶液，40℃下持续搅拌2-3h，离心分离，洗涤后真空冷冻干燥12-24h，得到载药壳聚糖微球B；S5.将IL-2加入浓度为1-2wt％的壳聚糖乙酸溶液中，在10-30℃加入20-40wt％甘油磷酸钠溶液，然后加入S3所得载药壳聚糖微球A和S4所得载药壳聚糖微球B，混合均匀，即得。铂产品特点在于广谱的抗肿瘤活性。顺式-二氨二氯铂(DDP)对以下各种来源的肿瘤有活性：自发的肿瘤、接种的肿瘤、病毒诱导的肿瘤和化学致癌物诱导的肿瘤。但其往往以高剂量使用且具有较高的神经毒性、耳毒性、肾毒性、骨髓抑制，并产生大量的不良副作用。A1loferon肽是具有高抗病毒活性的寡肽，也属于干扰素诱导剂的类别。有证据表明，alloferon肽具有基于激活抗肿瘤免疫机制(即干扰素和自然杀伤细胞)的抗肿瘤特性。高络合活性是alloferon肽家族肽的特性。已有报道alloferon-1及其类似物与大量过渡金属的络合物，该过渡金属包括铜、镍等，且这种络合物可以是生物活性的。将肽引入铂配位层允许通过将化合物靶向递送至肿瘤细胞能够改变抗肿瘤效果的范围并降低健康毒性，来自干扰素组的重组蛋白也用于癌症治疗中作为抗肿瘤免疫激活剂和肿瘤细胞增殖抑制剂。IL-2的生物活性作用与天然的人体IL-2相似，能产生淋巴因子(淋巴激活素)，不但有助于调节细胞的正常生长，而且促进免疫系统细胞的分化。IL-2与具专一性、高度亲合力的细胞表面受体结合，以活化的T细胞表达，此外它还存在于某些淋巴细胞内。IL-2使细胞淋巴细胞活化及活化的T细胞分化。IL-2能够诱导干扰素和多种细胞因子的分泌。临床用于肿瘤辅助治疗和癌性胸、腹水的治疗。而盐酸四环素作为一种常用的抗菌药，具有广谱抗菌功能。进一步地，S1所得药物混合物中alloferon-1肽浓度为0.08-0.2wt％，顺铂浓度为0.02-0.0.8wt％；优选为alloferon-1肽浓度为0.1wt％，顺铂浓度为0.05wt％。进一步地，S2中乙酸溶液浓度为1-10vt％，三聚磷酸钠溶液的浓度为1-2mg/mL；优选为乙酸溶液浓度为5vt％，三聚磷酸钠溶液的浓度为1mg/mL。进一步地，壳聚糖、乙酸溶液和三聚磷酸钠溶液的比为5-15mg:2-10mL:1-4mL；优选为壳聚糖、乙酸溶液和三聚磷酸钠溶液的比为10mg:6mL:2mL。进一步地，S3中微球悬浮液的浓度为50-220g/L；优选为150g/L。进一步地，S3中微球悬浮液与药物混合物的体积比为1:0.5-2；优选为1:1。进一步地，S4中乙酸溶液的浓度为1-5vt％，戊二醛溶液的浓度为20-30vt％；优选为乙酸溶液的浓度为3vt％，戊二醛溶液的浓度为25vt％。进一步地，水相中壳聚糖、乙酸溶液、盐酸四环素和吐温-80的比为0.1-0.8g:5-20mL:0.02-0.1g:1-2mL；油相中液体石蜡、戊二醛溶液和司班-80的比为20-150mL:200-700μL:1-2mL；第一次加入戊二醛与第二次加入戊二醛的体积比为4-14:1-5。进一步地，水相中壳聚糖、乙酸溶液、盐酸四环素和吐温-80的比为0.4g:9mL:0.05g:1.5mL；油相中液体石蜡、戊二醛溶液和司班-80的比为80mL:500μL:1.5mL；第一次加入戊二醛与第二次加入戊二醛的体积比为7:3。进一步地，S5中壳聚糖乙酸溶液、甘油磷酸钠、IL-2、载药壳聚糖微球A和载药壳聚糖微球B的体积比为1:0.02-0.05:0:05-0.1:0.02-0.06:0.02-0.08。进一步地，S5中壳聚糖乙酸溶液、甘油磷酸钠、IL-2、载药壳聚糖微球A和载药壳聚糖微球B的体积比为1:0.03:0.08:0.04:0.06。采用上述的方法制备得到抗肿瘤活性成分组合物。上述的抗肿瘤活性成分组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。综上所述，由于采用了上述技术方案，本专利技术的有益效果是：本专利技术中，将alloferon-1肽加入顺铂溶液制备出络合液，肽引入铂配位层，将化合物靶向递送至肿瘤细胞能够改变抗肿瘤效果的范围并降低健康毒性；IL-2能够诱导干扰素和多种细胞因子的分泌；而盐酸四环素具有广谱抗菌活性。由上，本专利技术制备出含有载药微球的壳聚糖凝胶态组合物，其中含有抗肿瘤效果较强的药物，以及诱导干扰素和细胞因子分泌的生物活性因子，同时还有抗菌药物，各药物相互配合，抗肿瘤药物与alloferon-1肽配合使用降低对健康细胞毒性，同时不影响顺铂药物的抗肿瘤活性，抗肿瘤活性高，而是IL-2免疫系统中的一类细胞生长因子，能调控免疫系统中白血球的细胞活性，参与抗体反应、造血和肿瘤监视，其通过调控细胞活性，活化巨噬细胞等，对于提高免疫系统的活性有着重要的作用，对于肿瘤的治疗起到辅助效果，上述两种有效成分分别负载在微球上缓释作用，而通过分散在凝胶态中，增强了生物相容性，进一步降低了细胞毒性低，同时由于凝胶中添加盐酸四环素成分，使其具备一定的抗菌性。...

【技术保护点】
1.一种抗肿瘤活性成分组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1.将alloferon-1肽加入顺铂溶液中，过滤灭菌，得到药物混合物；/nS2.将壳聚糖溶于乙酸溶液中，然后用NaOH溶液调节体系的pH值为5-6，再以15-30mL/h的速度滴入三聚磷酸钠溶液，继续搅拌12-24h，分离，洗涤干燥，即得壳聚糖微球；/nS3.将S2所得壳聚糖微球分散于水中制为微球悬浮液，再加入S1所得药物混合物，搅拌均匀后静置2-6h，得到载药壳聚糖微球A；/nS4.将壳聚糖在乙酸溶液中溶解，然后加入盐酸四环素，溶解后加入吐温-80，超声1-2min，作为水相；向液体石蜡中加入戊二醛溶液和司班-80，超声1-3min，作为油相；将水相滴入油相中，持续搅拌30-40min后，再滴入戊二醛溶液，40℃下持续搅拌2-3h，离心分离，洗涤后真空冷冻干燥12-24h，得到载药壳聚糖微球B；/nS5.将IL-2加入浓度为1-2wt％的壳聚糖乙酸溶液中，在10-30℃加入20-40wt％甘油磷酸钠溶液，然后加入S3所得载药壳聚糖微球A和S4所得载药壳聚糖微球B，混合均匀，即得。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗肿瘤活性成分组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.将alloferon-1肽加入顺铂溶液中，过滤灭菌，得到药物混合物；
S2.将壳聚糖溶于乙酸溶液中，然后用NaOH溶液调节体系的pH值为5-6，再以15-30mL/h的速度滴入三聚磷酸钠溶液，继续搅拌12-24h，分离，洗涤干燥，即得壳聚糖微球；
S3.将S2所得壳聚糖微球分散于水中制为微球悬浮液，再加入S1所得药物混合物，搅拌均匀后静置2-6h，得到载药壳聚糖微球A；
S4.将壳聚糖在乙酸溶液中溶解，然后加入盐酸四环素，溶解后加入吐温-80，超声1-2min，作为水相；向液体石蜡中加入戊二醛溶液和司班-80，超声1-3min，作为油相；将水相滴入油相中，持续搅拌30-40min后，再滴入戊二醛溶液，40℃下持续搅拌2-3h，离心分离，洗涤后真空冷冻干燥12-24h，得到载药壳聚糖微球B；
S5.将IL-2加入浓度为1-2wt％的壳聚糖乙酸溶液中，在10-30℃加入20-40wt％甘油磷酸钠溶液，然后加入S3所得载药壳聚糖微球A和S4所得载药壳聚糖微球B，混合均匀，即得。


2.根据权利要求1所述的抗肿瘤活性成分组合物的制备方法，其特征在于，所述S1所得药物混合物中alloferon-1肽浓度为0.08-0.2wt％，顺铂浓度为0.02-0.0.8wt％。


3.根据权利要求1所述的抗肿瘤活性成分组合物的制备方法，其特征在于，所述S2中乙酸溶液浓度为1-10vt％，三聚磷酸钠溶液的浓度为1-2mg...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟立松，田博文，曾德海，曾令春，袁亮，黄婧，王园园，吴强，邓田林，
申请(专利权)人：德阳肿瘤医院有限责任公司，
类型：发明
国别省市：四川;51