一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法技术

本发明专利技术公开了一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法，通过土壤取样装置取出同一处工业大麻植物根系处的土壤样品两份，两份工业大麻植物根系处的土壤样品分别用玻璃瓶盛装，两份土壤样品量一样，一份用作土壤微生物量测定，一份作土壤微生物提取，第一份土壤样品经过蒸熏处理测定后微生物量符合标准后，再通过第二份土壤样品进行微生物的提取。本发明专利技术具有提取土壤微生物前先对土壤中的微生物含量进行检测，达标后在进行提取作业，避免了提取微生物不达标的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法
本专利技术涉及土壤检测用微生物提取
，具体为一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法。
技术介绍
工业大麻是深耕作物，为直根系，侧根多，主根能深人土壤2-2.5米，侧根大部分分布在20-40厘米土层内，横向伸展可达60-80厘米。根侧根大部分分布在20-40厘米土层内，横向伸展可达60-80厘米。根分布在30-50厘米深度范围内。在湿软土壤中,主根深度仅达到40-60厘米，侧根主要分布在10-20厘米深度范围内。根区深度还取决于地下水深度以及工业大麻的品种和生态类型。雄麻的根.系没有雌麻发达，密植工业大麻的根系没有稀疏种植工业大麻的根系发达。一般而言，根重占整个工业大麻植株重量的8-9％。工业大麻种植处的土壤中含有各种的微生物。微生物是生态系统的重要组成部分,在地球生类极其丰富,1克农田土壤中含有几百万细菌数十万真菌孢子和数万个原生动物和藻类。目前,关于土壤微生物尤其是土壤中微生物多样性及其在生态系统中的作用的研究越来越受到重视。对工业大麻根系土壤检测时是对其土壤内的微生物检测，检测时需要将微生物提取出来。现有的土壤微生物提取方法直接取样提取，不同位置的土壤中含有的微生物量不一样，直接对土壤提取微生物有可能导致提取不达标，影响后续的进程。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法，具备提取土壤微生物前先对土壤中的微生物含量进行检测，达标后在进行提取作业，避免了提取微生物不达标的优点，解决了不同位置的土壤中含有的微生物量不一样，直接对土壤提取微生物有可能导致提取不达标，影响后续的进程的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法，通过土壤取样装置取出同一处工业大麻植物根系处的土壤样品两份，第一份土壤样品经过蒸熏处理测定后微生物量符合标准后，再通过第二份土壤样品进行微生物的提取。作为本专利技术的进一步方案，两份工业大麻植物根系处的土壤样品分别用玻璃瓶盛装，两份土壤样品量一样，一份用作土壤微生物量测定，一份作土壤微生物提取。一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法，土壤微生物含量测定流程：S1、将取出的一份土壤样品进行前处理，并分成等量的四份，将处理后的一份土壤样品放入蒸熏装置内进行蒸熏处理，通过蒸熏将土壤中微生物杀死；熏蒸开始的同时，另取剩下的三份土壤于聚乙烯塑料瓶中，直接加入KSO4提取，另作三个土壤样品；S2、将蒸熏处理后的土壤无损地转移到聚乙烯塑料瓶中，加入的KSO4，将聚乙烯塑料瓶通过振荡机振荡，再用中速定量滤纸过滤在塑料瓶中；S3、吸取上述土壤提取液于消化管中，准确加入H2SO4溶液，加入两个玻璃珠，混匀后置于磷酸浴中煮沸，冷却后将溶液无损地转移至三角瓶中，用去离子水洗涤消化管使溶液体积约为，加入一滴邻菲罗啉指示剂，用硫酸亚铁标准溶液滴定，溶液颜色由橙黄色变为蓝色，再变为红棕色，即为滴定终点；S4、根据相应的计算公式，被杀死的微生物体被新加人原土样的微生物分解而放出CO2,根据释放出的CO2的量和微生物体矿化率常数Kc可计算出该土样微生物中的碳量。一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法，土壤微生物提取方法：S1、称取第二份土壤样品，与DNA提取液一起加入瓶中放置在摇床上摇动；S2、接着加入20％SDS在水浴加热设备中加热,每隔20分钟轻微晃动瓶子，晃动瓶子时注意不要烫到手；S3、水浴加热后，将瓶子放置在离心机上离心,收集上清液,转移到离心管中；土壤沉淀再加入DNA提取液和20％的SDS,通过摇床摇晃,在水浴加热设备中加热，在离心机上离心,收集上清液与上次的上清液合并；再进行一侧上述操作，收集到的上清液与前两次上清液合并；S4、收集到的上清液与等体积的氯仿异戊醇混合液24:1混合，混合后经过离心机离心,吸取水相转移至另一个离心管中，以0.6倍体积的异丙醇作为添加液沉淀,经过离心机离心,收集核酸沉淀，用冷的70％乙醇洗涤沉淀，溶于TE溶液中；S5、通过上述方法可以的提取处第二份土壤中的微生物。与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：通过土壤取样装置取出同一处工业大麻植物根系处的土壤样品两份，将取出的一份土壤样品进行前处理，并分成等量的四份，将处理后的一份土壤样品放入蒸熏装置内进行蒸熏处理，通过蒸熏将土壤中微生物杀死，根据相应的计算公式，被杀死的微生物体被新加人原土样的微生物分解而放出CO2,根据释放出的CO2的量和微生物体矿化率常数Kc可计算出该土样微生物中的碳量，从而测定土壤中微生物的含量。取第二份土壤样品，加入DNA提取液制取上清液，上清液与等体积的氯仿异戊醇混合液24:1混合，混合后经过离心机离心,吸取水相，以0.6倍体积的异丙醇作为添加液沉淀,经过离心机离心,收集核酸沉淀，用冷的70％乙醇洗涤沉淀，溶于TE溶液中，再用紫外分光光度法测定DNA溶液的光密度值，根据公式得出土壤微生物含量。提取土壤微生物前先对土壤中的微生物含量进行检测，达标后在进行提取作业，避免了提取微生物不达标，提高提取的效率。具体实施方式下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。在本专利技术的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”、“内”、“外”“前端”、“后端”、“两端”、“一端”、“另一端”等指示的方位或位置关系为基于方位或位置关系，仅是为了便于描述本专利技术和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本专利技术的限制。此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。在本专利技术的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“设置有”、“连接”等，应做广义理解，例如“连接”，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本专利技术中的具体含义。实施例1本专利技术提供的一种实施例：一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法，通过土壤取样装置取出同一处工业大麻植物根系处的土壤样品两份，两份工业大麻植物根系处的土壤样品分别用玻璃瓶盛装，两份土壤样品量一样，一份用作土壤微生物量测定，一份作土壤微生物提取，第一份土壤样品经过蒸熏处理测定后微生物量符合标准后，再通过第二份土壤样品进行微生物的提取。实施例2本专利技术提供的一种实施例：一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法，土壤蒸熏前进行土壤前处理：土壤疏松，清理残存草莓茎叶及根系，土面整平无大土块，土壤湿度适中；熏蒸必须在密闭的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法，其特征在于：通过土壤取样装置取出同一处工业大麻植物根系处的土壤样品两份，第一份土壤样品经过蒸熏处理测定后微生物量符合标准后，再通过第二份土壤样品进行微生物的提取。/n

【技术特征摘要】
1.一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法，其特征在于：通过土壤取样装置取出同一处工业大麻植物根系处的土壤样品两份，第一份土壤样品经过蒸熏处理测定后微生物量符合标准后，再通过第二份土壤样品进行微生物的提取。


2.根据权利要求1所述的一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法，其特征在于：两份工业大麻植物根系处的土壤样品分别用玻璃瓶盛装，两份土壤样品量一样，一份用作土壤微生物量测定，一份作土壤微生物提取。


3.根据权利要求1所述的一种工业大麻根系土壤检测用微生物提取方法，其特征在于：土壤微生物含量测定流程：
S1、将取出的一份土壤样品进行前处理，并分成等量的四份，将处理后的一份土壤样品放入蒸熏装置内进行蒸熏处理，通过蒸熏将土壤中微生物杀死；熏蒸开始的同时，另取剩下的三份土壤于聚乙烯塑料瓶中，直接加入KSO4提取，另作三个土壤样品；
S2、将蒸熏处理后的土壤无损地转移到聚乙烯塑料瓶中，加入的KSO4，将聚乙烯塑料瓶通过振荡机振荡，再用中速定量滤纸过滤在塑料瓶中；
S3、吸取上述土壤提取液于消化管中，准确加入H2SO4溶液，加入两个玻璃珠，混匀后置于磷酸浴中煮沸，冷却后将溶液无损地转移至三角瓶中，用去离子水洗涤消化管使溶液体积约为，加入一滴邻...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭丽，李泽宇，陈祥伟，王明泽，车野，张玲，姜泽宇，接思源，王迪，刘冰，马兰，
申请(专利权)人：东北林业大学，黑龙江省农业科学院大庆分院，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23