人心肌细胞分离试剂、培养基、分离方法和培养方法技术

本发明专利技术涉及用于人心肌细胞分离的试剂、培养基及分离和培养方法。本发明专利技术的人心肌细胞分离试剂含有(‑)‑Blebbistatin，人心肌细胞培养基含有(‑)‑Blebbistatin或para‑aminoblebbistatin。通过采用本发明专利技术试剂、培养基及分离和培养方法，能够在分离和培养中将细胞维持在最佳状态、保持细胞形态、存活率和纯度。

【技术实现步骤摘要】
人心肌细胞分离试剂、培养基、分离方法和培养方法
本专利技术涉及用于分离人心肌细胞的分离试剂和分离方法。本专利技术还涉及用于培养人心肌细胞的培养基和培养方法。
技术介绍
心血管疾病导致的死亡占因病死亡总数的40％以上，高于肿瘤及其他疾病，是人类生命健康的最大杀手。因此，心血管疾病的防治对人类健康而言至关重要，针对心血管疾病防治的科学研究的重要性自然不言而喻。研究任何一种疾病的预防和治疗，都要有好的细胞模型。然而，不同于其他体细胞，心血管疾病的研究模型即心肌细胞本身具有运动性强、耗氧高的特点，这一特点决定了其分离与培养过程均需要消耗大量能量并且产生大量代谢产物，导致分离培养条件极难控制，也极难保证分离培养过程中的细胞存活率和纯度。这在很大程度上对心血管疾病的研究带来了局限性。此外，由于人的心肌细胞模型只能从人体受试者获取，其来源非常稀少且珍贵，现有的分离培养方法又不能保证存活率。因此人心肌细胞的供应远远不能满足临床研究的需要。目前研究中主要使用来自啮齿类动物(例如小鼠、大鼠)模型的心肌细胞。然而，人类和其他物种的心肌细胞间存在巨大的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人心肌细胞分离试剂，其含有(-)-Blebbistatin，/n(-)-Blebbistatin是由下述式(1)表示的化合物，/n

【技术特征摘要】
1.人心肌细胞分离试剂，其含有(-)-Blebbistatin，
(-)-Blebbistatin是由下述式(1)表示的化合物，





2.如权利要求1所述的人心肌分离试剂，其还含有NaCl、KCl、MgCl2·6H2O、NaH2PO4、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、葡萄糖、β-氨基乙磺酸、肌酸、丙酮酸钠、以及青霉素和链霉素。


3.如权利要求1或2所述的人心肌分离试剂，其中，(-)-Blebbistatin的浓度为5～10μM。


4.人心肌细胞分离方法，包括脱钙、消化和细胞收集步骤，在脱钙、消化和细胞收集步骤中使用权利要求1～3中任一项所述的心肌细胞分离试剂作为无钙液。


5.人心肌细胞培养基，其含有(-)-Blebbistatin或其衍生物para-aminoblebbistatin、和血清，
(-)-Blebbistatin是由下述式(1)表示的化合物，



para-aminoblebbistatin是由下述式(2)表示的化合物，





6.如权利要求5所述的人心肌细胞培养基，其中，(-)-Blebbistatin的浓度为2.5～20μM，para-aminoblebbistatin的浓度为5～50μM。


7.如权利要求5或6所述的人心肌细胞培养基，其中，血清为胎牛血清。


8.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡盛寿，周冰莹，侯永凤，师珣，唐晓丽，
申请(专利权)人：中国医学科学院阜外医院，
类型：发明
国别省市：北京;11