一种藤黄细球菌HMC01及其在不对称还原制备手性醇中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种藤黄细球菌(Micrococcus luteus)HMC01及其在不对称还原制备手性醇中的应用。所述菌种保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2017653。本发明专利技术还公开了该菌种在用于制备手性药物中间体(S)‑1‑氯‑2‑庚醇方面的应用，采用该菌种催化制备得到的光学纯(S)‑1‑氯‑2‑庚醇，具有立体选择性高、产物产率高等优点。本发明专利技术提供的方法反应步骤简单、反应条件温和、环境友好，产物(S)‑1‑氯‑2‑庚醇的ee值达99.9％，产率达90.0％以上。

【技术实现步骤摘要】
一种藤黄细球菌HMC01及其在不对称还原制备手性醇中的应用
本专利技术涉及微生物
，尤其是涉及一种藤黄细球菌(Micrococcusluteus)HMC01及其在不对称还原制备手性醇中的应用。
技术介绍
肺动脉高压是一种肺动脉压力升高并超过一定临界值的血流动力学和病理生理状态，是一种恶性程度极高、预后极差的疾病，堪称“心血管疾病中的癌症”。瑞莫杜林(曲前列尼尔)是美国UNITEDTherapeutics公司研发的一款人工合成前列环素药品，可以促进血管舒张，同时可抑制血小板的聚集，是罕见病肺动脉高压的有效治疗药。(S)-1-氯-2-庚醇是合成瑞莫杜林的重要手性中间体，其化学结构式为：目前合成手性药物中间体主要有化学法和生物法。化学法合成手性药物时，反应步骤多，产物产率低，立体选择性低，需添加重金属催化剂，污染环境且分离难度大。生物催化法则是利用酶或微生物全细胞来催化反应。酶催化不对称还原羰基化合物制备手性醇，需添加辅酶，如NAD(P)H等，辅酶价格昂贵且化学性质不稳定，酶分离纯化步骤复杂。微生物全细胞中不仅含有氧化还本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种藤黄细球菌(Micrococcus luteus)HMC01，保藏于中国典型培养物保藏中心；保藏编号为：CCTCC NO：M2017653；保藏时间为：2017年11月03日。/n

【技术特征摘要】
1.一种藤黄细球菌(Micrococcusluteus)HMC01，保藏于中国典型培养物保藏中心；保藏编号为：CCTCCNO：M2017653；保藏时间为：2017年11月03日。


2.权利要求1所述的藤黄细球菌HMC01在不对称还原制备手性醇中的应用。


3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述应用以1-氯-2-庚酮为底物，加入藤黄细球菌HMC01细胞在缓冲液中进行生物催化反应，反应结束后反应液经分离纯化得到(S)-1-氯-2-庚醇；
所述底物的初始浓度为20～1000mM，优选30～80mM，更优选50～70mM；
优选地，生物反应催化后用等体积乙酸乙酯萃取，萃取后，取乙酸乙酯层液体，经旋转蒸发器蒸馏浓缩4.5-5.5倍体积，然后加入硅胶混匀后，转移至层析柱中，以石油醚︰乙酸乙酯体积比7︰3为洗脱剂进行硅胶柱层析分离，收集含产物的洗脱液，经旋转蒸发仪浓缩蒸干，即得(S)-1-氯-2-庚醇纯品。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述藤黄细球菌HMC01细胞为经发酵的湿菌体细胞，所述湿菌体细胞的用量以干重计为15～70g/L缓冲液，优选40～70g/L缓冲液。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述湿菌体细胞的制备方法如下：
斜面培养：
斜面于30℃培养2～3d，挑取平板培养基中的单菌落至斜面，4℃冰箱保存；斜面培养基配方：葡萄糖20g/L，酵母膏10g/L，蛋白胨8g/L，K2HPO42.0g/L，(NH4)2SO44.0g/L，NaCl2.0g/L，琼脂20g/L，pH7....

【专利技术属性】
技术研发人员：李军，杜文婷，施菁，樊淼樑，
申请(专利权)人：杭州医学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33