一种判断肝胆细胞癌变及其转移和恶性程度的方法技术

一种判断肝胆细胞癌变及其转移和恶性程度的方法，是对待检组织中的ＤＮＡ－ＰＫｃｓ蛋白表达量进行分析：ＤＮＡ－ＰＫｃｓ表达呈阴性的是正常肝胆组织或癌旁组织，ＤＮＡ－ＰＫｃｓ表达呈阳性的是癌组织。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种判断癌变及其转移和恶性程度的方法，尤其是判断肝胆细胞癌变及其转移和恶性程度的方法。
技术介绍
DNA-PKcs是一个属于PI3-K激酶家族的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，它可以与另外两个亚基Ku70和Ku80共同构成DNA依赖蛋白激酶复合体(DNA-PK)，DNA-PKcs是其中的催化亚基。目前已知DNA-PK具有DNA修复、V(D)J重组等生理功能。另外，体外实验揭示DNA-PKcs可以磷酸化多种底物，包括一些转录因子信号转导分子，如hsp90、p53蛋白、Sp-1、Oct-1、Fos、JNK等，表明DNA-PKcs有更广泛的生物学功能有待揭示。在相关的研究报道中，人体正常组织和肿瘤组织中的DNA-PKcs和Ku80、Ku70的表达分布是不均一的，可以表明DNA-PK具有广泛的生理功能，而且还有助于识别组织细胞对放射或DNA损伤药物的敏感性。至今，有关DNA-PK在肿瘤组织方面的研究主要涉及大肠癌、口咽部肿瘤、膀胱癌、血液系统肿瘤、食道癌、乳腺癌、前列腺癌、头颈部和脑部肿瘤等，所关注的问题基本上都是DNA-PK表达与肿瘤放、化疗敏感性的相关性。Moll等的研究指出，正常成人肝细胞中DNA-PKcs和Ku80经过免疫组化检测不表达或只在某些个体中存在很局限的表达灶。至于肝胆器官中肿瘤组织的DNA-PK表达状况如何，目前尚未有公开报道。专利技术创造内容本专利技术的目的是提供。，是对待检组织中的DNA-PKcs蛋白表达量进行分析DNA-PKcs表达呈阴性的是正常肝胆组织或癌旁组织，DNA-PKcs表达呈阳性的是癌组织。所述对待检组织中的DNA-PKcs蛋白表达量进行分析是通过免疫组化技术进行的。其中，所述癌组织可以是肝细胞癌组织、肝血管肉瘤癌组织、巨细胞性肝癌组织、透明细胞型肝癌组织、腺瘤样增生癌组织、肝胆管腺癌组织或胆囊腺癌组织。在不同类型肿瘤中，DNA-PKcs的表达强弱具有差异，其中肝细胞癌的DNA-PKcs表达强阳性；肝胆管腺癌/瘤次之，表达阳性；透明细胞性肝癌等相对较弱，阳性；乳头状腺瘤则不表达，但伴有非典型增生表达明显增强。另外，胆囊腺癌的肌层浸润癌组织或转移灶DNA-PKcs阳性表达明显强于原发灶，说明DNA-PKcs表达与这类肿瘤的转移特性有关。本专利技术揭示了肝胆肿瘤DNA-PKcs表达特性，由于与正常肝胆组织有显著差别，DNA-PKcs可以作为肝胆肿瘤组织的一个新的生物标记物，进行癌变的临床判断，特别是在某些类型肿瘤恶性程度和转移特性的判断上。同时，DNA-PKcs抗体在肝胆癌变治疗中也将是具有开发价值的潜在靶向载体。下面结合附图对本专利技术做进一步说明。附图说明图1为肝细胞癌的免疫组化2为肝细胞癌(右侧)和癌旁组织(左侧)的免疫组化3为伴有重度非典型增生者的乳头状腺瘤的免疫组化4、5、6为胆囊腺瘤组织的免疫组化图具体实施方式实施例1、肝胆肿瘤组织DNA-PKcs表达的免疫组化分析一、实验材料的准备1、肝胆肿瘤组织病理切片患者均来自中国的中南地区，所有肿瘤都已得到病理确诊。2、免疫组化分析DNA-PKcs抗体H-163(SC-9051)购自Santa Cruz公司，兔抗人多抗，位置是DNA-PKcs蛋白3965-4127位氨基酸残基。石腊包埋的组织病理切片，经过加热抗原修复后进行免疫组化反应。通过图象分析软件Mias2000观察和分析DNA-PKcs表达分布。二、肝胆肿瘤组织DNA-PKcs表达的免疫组化分析对38例临床病例肿瘤切片的免疫组化检测，其免疫组化检测结果如表1所示。除1例巨细胞性肝癌、两例乳头状腺瘤为表达阴性外其余均为程度不同的阳性表达结果，其中7例肝细胞癌都是强阳性表达(如图1所示)，其次是腺癌。值得注意的是癌旁组织是阴性或微弱阳性表达(阳性细胞＜5％)，形成明显的对比(如图2所示)。乳头状腺瘤为良性肿瘤，在所检测的3例标本中2例为表达阴性，1例伴有重度非典型增生者约有45％的阳性表达细胞(如图3所示)，提示DNA-PKcs表达与这类肿瘤恶性程度有关。胆囊腺瘤组织的表达阳性细胞在15-80％之间，而且同一个体肿瘤的肌层浸润癌组织或转移灶表达阳性细胞率在80％以上，要明显高于原发灶(如图4、5、6所示)，提示DNA-PKcs表达可能与这类肿瘤的转移特性有关。表1不同类型肿瘤中DNA-PKcs表达水平肿瘤名称 观察例数表达水平肝细胞癌 7 +++(＞95％)①肝血管肉瘤1 ++(80％)巨细胞性肝癌 1 -透明细胞型肝癌1 +(15％)腺瘤样增生3 +(10-45％)肝胆管腺癌12 +/++(45-85％)胆囊腺癌 10 +/++(15-90％)②乳头状腺瘤3 -/++③标注①+++，强阳性表达细胞＞95％；++，阳性表达细胞＞50％；+，阳性表达细胞＜50％；-为全部阴性细胞。②其中3例肌层浸润癌组织表达阳性细胞＞80％。③两例阴性，1例伴重度非典型增生为++。权利要求1.，是对待检组织中的DNA-PKcs蛋白表达量进行分析DNA-PKcs表达呈阴性的是正常肝胆组织或癌旁组织，DNA-PKcs表达呈阳性的是癌组织。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述对待检组织中的DNA-PKcs蛋白表达量进行分析是通过免疫组化技术进行的。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述癌组织是肝细胞癌组织、肝血管肉瘤癌组织、巨细胞性肝癌组织、透明细胞型肝癌组织、腺瘤样增生癌组织、肝胆管腺癌组织或胆囊腺癌组织。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述肝细胞癌的DNA-PKcs表达呈强阳性；肝胆管腺癌/瘤表达呈阳性；透明细胞性肝癌的表达呈弱阳性；胆囊腺癌的肌层浸润癌组织或转移灶阳性表达强于原发灶。5.权利要求1所述的DNA-PKcs作为判断肝胆细胞癌变及其转移和恶性程度的生物标记物的应用。6.权利要求1所述的DNA-PKcs的抗体作为靶向载体的应用。全文摘要本专利技术公开，是对待检组织中的DNA－PKcs蛋白表达量进行分析DNA－PKcs表达呈阴性的是正常肝胆组织或癌旁组织，DNA－PKcs表达呈阳性的是癌组织。本专利技术揭示了肝胆肿瘤DNA－PKcs表达特性，由于与正常肝胆组织存在显著的差别，DNA－PKcs可以作为肝胆肿瘤组织的一个新的生物标记物，有助于进行癌变的临床判断，特别是在某些类型肿瘤的恶性程度和转移特性的判断上，DNA－PKcs抗体在肝胆癌变治疗中也将是一个具有开发价值的潜在靶向载体。文档编号G01N33/574GK1566957SQ0313777公开日2005年1月19日 申请日期2003年6月24日 优先权日2003年6月24日专利技术者周平坤, 隋建丽 申请人:中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周平坤，隋建丽，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所，
类型：发明
国别省市：