利用光学生物盘系统基于细胞核形态学的白血细胞类型的识别和定量技术方案

技术编号:2589952 阅读:241 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术通常涉及生物检定和诊断检定,具体说来,涉及利用一种光学生物盘系统对细胞成像的方法和设备。更具体地说,但不限制下文参照最佳实施方式所说明的具体实施方式,本发明专利技术涉及利用吸收预定波长的电磁辐射的染色剂结合光学生物盘基于白血细胞的细胞核的形态学识别并定量白血细胞的方法。(*该技术在2022年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

本专利技术通常涉及生物检定和诊断检定,具体说来,涉及成像(imaging)生物试样中的血细胞分析物的方法和设备。更具体地说,但不限制下文参照最佳实施方式所说明的具体实施方式,本专利技术涉及利用吸收预定波长的电磁辐射的染色剂(stain)结合光学生物盘基于白细胞的细胞核的形态学识别并定量白细胞的方法。本专利技术可以结合以下通常已知的共同待审批(co-pending)专利申请所公开的任何盘、检定和系统被有利地采用2001年7月3日提交的序列号为60/302,757的题为“选择并检测包括诱导帮助剂/毒素抑制剂细胞的淋巴细胞的临床诊断光学生物盘和相关方法”(Clinical Diagnostic Optical Bio-Disc AndRelated Methods For Selection And Detection Of LymphocytesIncluding Helper-Inducer/Suppressor-Cytotoxic Cells)的美国临时申请;2001年7月17日提交的序列号为60/306,035的题为“包括免疫表型的细胞分离和定型的定量及定性方法”(Quantitative andQualitative Methods for Cell Isolation and Typing IncludingImmunophenotyping)的美国临时申请;2001年7月17日提交的序列号为60/305,993的题为“免疫表型的俘获层部件和光学生物盘”(CaptureLayer Assemblies and Optical Bio-Discs for Immunophenotyping)的美国临时申请;2001年7月19日提交的序列号为60/306,592的题为“成像血细胞、血载寄生虫和病原体和其它生物物质的方法以及相关光学生物盘和驱动部件”(Methods for Imaging Blood Cells,Blood-borneParasites and Pathogens,and Other Biological Matter IncludingRelated Optical Bio-Discs and Drive Assemblies)的美国临时申请;和2001年7月23日提交的序列号为60/307,263的题为“包括免疫表型的细胞分离和定型的定量及定性方法”(Quantitative and QualitativeMethods for Cell Isolation and Typing Including Immunophenotyping)的美国临时申请。所有这些申请通过引用结合在本文中。
技术介绍
血细胞计数筛查(blood count screening)是一种常规临床检验,用于正常和几种包括急性病或慢性病、受伤、已知amemia氏病(amemia’s)、寄生虫病、脊髓病、白血病和使用肌肉抑制(myolosuppressive)药物治疗的过程中的情况下。也作为保证外科手术、输血的基线的常规检验或者作为某种条件的诊断或治疗的工具。血细胞计数被用在诊断、治疗和后续病人跟踪过程中以确定病人的健康状况。通过血细胞计数本身不能确定某人是否有淋巴瘤或其它疾病。但是,这些值可以确定是否一切正常和是否需要进一步检验。许多研究和诊断条件需要从细胞混合物中分离并分析特定细胞。具体说来,源可以是血液、脊髓液、骨髓、肿瘤匀浆、淋巴组织等。需要血液、脊髓液、骨髓、肿瘤组织、淋巴等的常规筛查以保证外科手术、输血的基线,或者作为诊断、治疗的工具以确定病人的健康状况。血细胞计数也被用在诊断、治疗和后续病人跟踪过程中以确定病人的健康状况。全血细胞计数(CBC)是一组包括血红蛋白、血球容量、平均血球血红蛋白(mean corpuscular hemoglobin)、平均血球血红蛋白浓度、平均血球体积(mean corpuscular volume)、血小板计数、和白细胞计数的检验。血细胞计数是每立方毫米全血的红细胞和白细胞的计数。白细胞计数(WBC,白细胞)是标准血样中的白细胞的总数。在正常健康人中,通常WBC计数为每微升(μl)4000至10800个细胞。锻炼、压力和疾病等因素可以影响该数值。高WBC可能指示感染、白血病、或者组织损伤。当WBC数低于每微升1000细胞时有增加的感染风险。对于收集除从白细胞计数本身可获得的信息之外的信息而言,白细胞鉴别检验(leukocyte differential testing)是必不可少的。白鉴别细胞计数被用于评估新可疑感染和发烧(即使CBC正常)、与异常情况相关的可疑疾病,异常情况包括异常白细胞数、可疑白血病、和其它例如嗜曙红白细胞增多、单核细胞增多或嗜碱白细胞增多的异常情况。可以在存在严重的白细胞减少症(例如药物治疗的并发症(secondary))的情况下执行白细胞或白细胞分类重复检验。在治疗过程中,例如在化学疗法或放射疗法过程中,对确定是否治疗除癌细胞之外还消耗健康血细胞而言,血细胞计数非常重要。由于化学疗法影响血细胞的制造,因此检查血液中的各种细胞的数量很重要。可以通过计算机化细胞计数设备确定鉴别白细胞数。这种设备确定五种主要的白细胞的总数和百分比。在正常个体中,主要有中性白细胞(50-60%),其次是淋巴细胞(20-40%),然后是单核细胞(2-9%),和少量嗜曙红白细胞(1-4%)以及嗜碱白细胞(0.5-1%)。由于反应或肿瘤反应可造成的增加的白细胞或者由于消耗或破坏或骨髓移植可造成的减少的白细胞,WBC鉴别计数通常异常。可以通过鉴别白细胞计数确定象中性白细胞减少(中性白细胞损失)、淋巴细胞减少(淋巴细胞损失)、血小板增多(血小板耗尽,可能威胁生命)。具体地在影响血细胞制造的化学疗法和放射疗法治疗过程中,鉴别计数也给出血细胞计数的总图。在淋巴细胞的分类中还有进一步的项目细胞。举例说来,淋巴细胞可以大致被分为分别负责细胞促成性免疫(Cell-mediatedimmunity)和体液免疫的T细胞(胸腺衍生淋巴细胞)(thymus-derivedlymphocytes)和B细胞(囊等价淋巴细胞)(bursal-equivalentlymphocytes)。虽然形态特征已经被用于分类白细胞,但是以及证明形态本身不足以区分淋巴细胞项目的许多功能性。为了区分具有多种功能的淋巴细胞,已经开发了多种技术,包括通过红细胞形成玫瑰花结(resetting)分析、免疫荧光显微镜法(immuno-fluorescencemicroscopy)、酶组织化学以及最近的针对单一细胞表面标志的单克隆抗体。T细胞通常进一步被通过一种或两种例如CD4和CD8的主要细胞表面抗原的存在而区分。CD4+型细胞指帮助剂T细胞并且涉及抗体促成性免疫。这些T细胞结合至由B细胞递呈的抗原,并导致分泌抗原材料的抗体的克隆浆细胞的产生。CD4+T细胞对细胞促成性免疫而言也是必不可少的。应该理解CD4+T细胞结合至由例如巨噬细胞和树状细胞之类的抗原递呈细胞(APC)所递呈的抗原,并释放吸引其它免疫系统至该区域的淋巴细胞活素。结果是炎症,和试图隔开并破坏抗原材料的细胞及分子的集聚。CD8+型T细胞指细胞毒素或本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种采用光学盘和盘驱动器执行测定的方法,所述方法包括以下步骤:在盘中的室中的盘表面上提供细胞样本,该室包括至少一个带有俘获剂的俘获区;将盘载入光学读出器中;旋转光学盘;将电磁辐射入射束指向俘获区;检测 在与盘的俘获区相互作用之后所形成的电磁辐射束;将所检测的电磁辐射束转换为输出信号;和分析该输出信号以提取与在俘获区处所俘获的细胞的数量和类型相关的信息。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:约翰弗朗西斯戈登高里皮阿帕里塞尔万
申请(专利权)人:伯斯坦技术公司长冈实业株式会社
类型:发明
国别省市:US[美国]

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