阶梯式浓度梯度检测条及其制备方法技术

一种阶梯式浓度梯度检测条，包括矩形薄片式的载体和涂布在载体一面上的药物。在载体的一面等长地划分有若干个等面积区间，在每个等面积区间中心对称地涂布有设定形状及面积的药物块；各药物块的药量呈现出一段或多段的阶梯性变化，即：在不同段中的药物块的浓度不同。但是在同一段中排列的各个药物块的涂布厚度和浓度相同，各药物块的面积大小按顺序阶梯递增或递减。在载体另一面标记有药物品种以及对应各等面积区间上标记有相应的药物浓度数值。本发明专利技术的阶梯式浓度梯度药物敏感检测条易于标准化和大批量生产，产品质量稳定且操作方便，测量精确。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学制品，更具体地说，本专利技术涉及一种用于微生物药物敏感检测的阶梯式药物浓度梯度检测条及其制备方法。
技术介绍
随着现代科学技术的进步，微生物的鉴定基本能够满足人们(尤其是临床医务工作者)的需要。但在微生物对药物敏感试验(简称药敏试验)方面，比如在对苛养菌、厌氧菌、分枝杆菌、真菌的药敏试验中，在采用细菌自动化鉴定仪所作的常规药敏试验方面，目前仍存在着一些急需解决的问题如某些情况下报告假敏感结果，例如对耐苯唑西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)、肠球菌、产诱导酶的肠道菌及铜绿假单胞菌的测试中，个别耐药株不能显示耐药结果。特别是近年来，由于各种抗生素的大量应用，尤其是广谱及超广谱抗生素的滥用，造成了耐药突变菌株的大量出现，经验用药失败率较高；盲目大剂量治疗也易造成药物中毒。所以，近年来，微生物学研究涉及的一个重要内容就是对病原菌进行体外药物敏感试验(即通常所谓的“药物敏感试验”，简称“药敏试验”)，即测定细菌对药物的敏感程度，以便及时发现耐药菌株，为临床用药提供选择方案。药敏试验的正确与否，直接影响到临床医师合理有效地选用抗菌药物，关系到临床医师正确选用抗生素、避免滥用抗生素、及时有效地控制感染、预防耐药突变菌株的大量出现。因而病原菌的体外药物敏感试验具有重要的临床意义。目前，体外药物敏感试验主要方法有定性测定的纸片琼脂扩散法(diskagar diffusion，Kirby-Bauer test)、定量测定的稀释法(dilution test)和浓度梯度试纸法(Episiolometer test，E test)。其中，纸片琼脂扩散法使用方法非常简便，但只能做定性检测，不能定量，对实验条件要求苛刻，且容易出现误差。特别是近年来，美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)不再推荐用纸片扩散法测定某些抗生素对某些细菌的抗菌作用，其原因是纸片扩散法的结果会造成过多的解释错误。稀释法是在肉汤或琼脂培养基中将药物进行一系列(对倍)稀释后，定量接种待检菌，35℃孵育24小时后观察。抑制待检菌肉眼可见生长的最低药物浓度，即为该药物对待检菌的最低抑菌浓度(MIC)。稀释法尤其是琼脂稀释法测定结果准确，被愈为″金标准″，但操作太繁琐，难以临床广泛、普及使用。1988年AB Biodisk(Sweden)公司推出了浓度梯度试纸法，已被世界同行公认为″第二金标准″的药敏方法。它的特点是结合琼脂扩散法和稀释法的优点，用扩散法的原理，塑料条的形式定量读出MIC值。这比传统的纸片扩散法测抑菌圈的大小精确可靠。浓度梯度试纸法现已被美国食品及药物管理局(FDA)及世界卫生组织细菌耐药监测网所承认。浓度梯度试纸法基本原理是结合扩散法和稀释法的原理和特点，在一条规格为5×50mm的塑料条一面吸附有以log2为基础连续变化的抗生素浓度，其另一表面上标记相应的抗生素浓度刻度。当浓度梯度试纸条放在已接种了一定浓度的细菌的特定药敏培养基上后，抗生素立即释放至琼脂中，呈单一方向扩散。在35℃下经一定时间孵育后可能产生一椭圆形的抑菌环。抑菌环与Etest条交界处的刻度即为针对该菌株的最小抑菌浓度(MIC)值。浓度梯度试纸法如扩散法一样操作方便，但又可同稀释法一样直接测定药物对待检菌的最低抑菌浓度(MIC)。目前，在全世界范围内，只有瑞典AB BIODISK公司生产浓度梯度试纸条。他们是将多个(一般在15～22个)不同浓度的抗生素粘附到塑料条上制备浓度梯度试纸条。其生产制备工艺复杂、烦琐。有国内申请号为93245821.1的专利公开了一种″抗菌药物敏感梯度试条″，从其文献及其申请的专利文献看，虽然其结论是″国产抗菌药物敏感梯度试条是可信的″，但是，由于其制作方法是将″15个含不同浓度的含药小纸片，按浓度大小顺序，用压敏胶粘附在5×50mm涤纶片上″。这种制作方法的缺陷有(1)生产制作过程难以标准化，无法保证产品的质量稳定；(2)无法大批量生产。还有中国专利申请号为01217261.8的专利文件公开了一项″浓度梯度药敏试条″的技术方案，其特征是″在载体上按照连续的浓度梯度涂敷有抗生素，同时标有其MIC的刻度。即在横向任一直线上抗生素浓度相同，在纵向任一直线上，抗生素均为连续指数性分布。该项技术产品的药物分布呈连续无级变化的浓度梯度，而非阶梯式浓度梯度。从生产的角度讲，这种连续浓度梯度药物敏感检测条，需在一个50mm左右的长度范围内，实现从256mg/ml至0.016mg/ml的药物浓度变化，即浓度落差达到16000倍的变化，而目前的生产制备和技术几乎无法进行这样的生产。上述种种原因，导致浓度梯度药物敏感检测条至今仍不能广泛普及用于临床常规药敏检测，尚无法全部取代现行的药敏检测方法，如纸片扩散法、琼脂稀释法、各种自动化仪测定等。
技术实现思路
针对现有技术的上述缺点，本专利技术所要达到的技术目的是要提供一种易于标准化和大批量生产、产品的质量稳定、且操作方便、测量精确的阶梯式浓度梯度药物敏感检测条及其制备方法。为此，本专利技术的技术方案是一种阶梯式浓度梯度检测条，该检测条包括矩形薄片式的载体和涂布在所述载体一面上的药物，所述药物的浓度或药量沿载体轴向呈现出单向性的梯度分布，在所述载体的另一面标记有药物的品种以及对应位置上药物的浓度数值，而所述载体的一面等长地划分有若干个等面积区间，在每个所述的等面积区间中，相对所述区间中心对称地涂布有设定形状及面积的药物块；各个药物块的药量呈现出如下一或多段的阶梯性变化即在不同段中的药物块的浓度不同，但是在同一段中排列的各个药物块的涂布厚度和浓度相同，且同一段中排列的各药物块的面积大小是按照排列顺序阶梯性地递增或递减；在所述条形载体的另一面、对应各等面积区间上，标记有相应的药量数值或相应药量在区间体积上的均值。本专利技术的矩形载体薄片上横向均匀地分出多等份的等面积区间，因为各区间的面积均相等，在涂布药物的浓度、厚度相同的前题下，按照涂布面积由大到小的单向性顺序，向等面积区间内均匀涂布不同面积的药物后，等面积区间内所涂布药物的药量与涂布的面积成正比。以此进一步推算，等面积区间内涂布的药量与该区间内单位体积上的药物浓度是一致的。从而，实现了矩形载物条上的各等面积区间内涂布的药物浓度呈精密阶梯式浓度梯度分布。该精密阶梯式浓度梯度药物敏感检测条具有设计理念先进，易于标准化、大批量生产、产品质量的控制有效、使用方便等优点。为了能精确地按所设定面积涂布得到各个药物块，各个药物块的平面形状为可计算出面积的各种形状。所述药物块的平面形状为长方形、正方形、圆形、椭圆形、棱形中之一。为了让涂抹的药物块能在药敏检测过程中遇水在区间体积上立即崩解、释放，所述的药物块中包括有速释剂。所述的速释剂由如下成分中的一或几种组成多糖淀粉类、纤维素类、海藻酸类、陶土类、PVP类、树胶类。所述速释剂选自下列物质中的一或几种交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、交联羧甲基淀粉钠、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素。本专利技术的另一技术方案是一种制备如上所述的阶梯式浓度梯度检测条的方法，该方法包括如下步骤制作能漏印涂布药浆的大丝印模板即将大丝印模板区分为多个尺寸相同的长条矩形小模版，再将所述小模版等长地划分为若干个等面积区间，在每个等面积区间中相对区间中心对称地制本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种阶梯式浓度梯度检测条，该检测条包括矩形薄片式的载体和涂布在所述载体一面上的药物，所述药物的浓度或药量沿载体轴向呈现出单向性的梯度分布，在所述载体的另一面标记有药物的品种以及对应位置上药物的浓度数值，其特征在于：所述载体的一面等长地划分有若干个等面积区间，在每个所述的等面积区间中，相对所述区间中心对称地涂布有设定形状及面积的药物块；各个药物块的药量呈现出如下一或多段的阶梯性变化即：在不同段中的药物块的浓度不同，但是在同一段中排列的各个药物块的涂布厚度和浓度相同，且同一段中排列的各药物块的面积大小是按照排列顺序阶梯性地递增或递减；在所述条形载体的另一面、对应各等面积区间上，标记有相应的药量数值或相应药量在区间体积上的均值。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：朱建军，戴萌，
申请(专利权)人：朱建军，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]