人心力衰竭中的血浆尿压素制造技术

本发明专利技术提供了在哺乳动物个体中诊断心力衰竭的方法。测定来自个体的体液样品中尿压素的水平，并将其与在个体的所述体液中通常发现的指示不患有心力衰竭的参考水平进行比较。尿压素水平的增加指示心力衰竭。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及在哺乳动物个体、例如人中诊断心力衰竭的方法。特别地，本专利技术涉及其中测定体液样品中尿压素的水平以诊断心力衰竭的方法。心力衰竭(左心室收缩功能障碍)是死亡率和发病率的主导原因。其病理生理学包括多种神经激素系统的激活，所述的神经激素系统包括儿茶酚胺、肾素-血管紧张素、内皮素、心钠素和脑钠素系统。这些系统中的某些以适应性方式激活，其它的以适应不良的方式激活。近期的工作已经表明存在一种新的称为尿压素II(UTN)的心血管肽，该心血管肽与硬骨鱼的荷尔蒙同源(Ames等人，Nature 1999；16282-286)。该环状的十一肽是孤儿G蛋白受体(GPR14)的配体，并且肽及受体两者均分布在心肌、内皮、脉管肌细胞和神经系统中(Ames等人，Nature 1999；16282-286)。虽然其对于大鼠和猴子中的某些血管床是有效的血管收缩剂(Ames等人，Nature 1999；16282-286；Douglas等人，J CardiovascPharmacol 2000；36S163-6)，然而其在肠系膜阻力血管中也可以是血管舒张剂(Bottrill等人，Br J Pharm 2000；1301865-1870)。在不同脉管对UTN的反应性之间存在有重要的种属差异。例如，虽然猴子的脉管可被UTN有效地收缩，然而人肺脉管系统和肠系膜阻力血管被UTN高度有效地舒张(Stirrat等人，Am J Physiol 2001；280H925-928)，人皮下阻力血管对UTN没有响应(Hillier等人，Circulation 2001；1031378-1381)。UTN对血管平滑肌长期刺激可导致肥大响应(Watanabe等人，J Hypertens 2001；192191-2196)。在猴子中对心肌的直接作用表现出可能由冠状血管收缩引起的心肌抑制(Ames等人，Nature 1999；16282-286)，然而在人心肌中证明有正性肌力作用(Russell等人，Br J Pharm 2001；1325-9)。另外，已经描述了包括胶原沉着增加在内的肥大效应，这意味着UTN在心力衰竭的心室重塑中可能起作用(Zou等人，FEBS Lett 2001；50857-60；Tzanidis等人，Eur Heart J 2000；2172)。UTN使得心肌细胞中心钠素和脑钠素的表达增加(Zou等人，FEBS Lett 2001；50857-60)，该变化预期在心力衰竭中会复原至更原始的表型。Douglas等人的近期工作(Douglas等人，Lancet 2002；3591990-1997)证明在心力衰竭患者的心肌中UTN及其受体的表达均增加，甚至是在疾病的早期亦如此。UTN存在于心脏的心肌细胞、血管平滑肌细胞、内皮和炎症细胞。关于尿压素在心力衰竭中假定的作用，在重塑和纤维化增加导致日益增强的适应不良响应之前，在人中最初的正性肌力作用和血管舒张作用可以是代偿性的。第一方面，本专利技术提供了在哺乳动物个体中诊断心力衰竭的方法，其中包括测定体液样品中尿压素的水平，并将其与在个体的所述体液中通常发现的指示不患有心力衰竭的参考水平进行比较，其中尿压素水平增加指示心力衰竭。可另外测定至少一种指示心力衰竭的其它标记物、如N-末端脑钠素前体(NT-proBNP)或脑钠素(BNP)的水平，并将其与在哺乳动物个体的体液中通常发现的指示不患有心力衰竭的参考水平进行比较，其中该至少一种其它标记物的水平增加指示心力衰竭。尿压素或其它标记物的水平可通过使用免疫测定法测定，体液可以是血浆或组织液。在一个实施方案中，本专利技术的方法用于在人体中诊断心力衰竭。第二方面，本专利技术提供了一种在第一方面的方法中使用的检测体液样品中尿压素的免疫测定法。第三方面，本专利技术提供了一种在人体中对心脏疾病的严重程度进行示踪和分级的方法，其中在一段时期内一次或多次测定尿压素以及至少一种指示心力衰竭的其它标记物的水平，并与标准模型进行比较。标准模型可以是分析物水平对比疾病状态的标准模型，分级可根据纽约心脏学会(NYHA)分级确定。分为四级，为1级仅在体力劳动时表现出症状的患者；2级正常体力劳动时表现出症状的患者；3级轻体力劳动时表现出症状的患者；4级休息时表现出症状的患者。专利技术人研究了人心力衰竭(左心室收缩功能障碍)中UTN的血浆水平，并将其与更确定的N-末端脑钠素前体(N-末端proBNP)的血浆水平增加进行了比较。血浆从126名心力衰竭患者以及220名年龄和性别匹配的正常对照中取得。通过免疫发光测定法测定了N-末端proBNP和UTN。心力衰竭患者的血浆中N-末端proBNP和UTN两者均增加，并且显著相关(rs＝0.35，P＜0.001)。与N-末端proBNP相反，在血浆UTN和NYHA分级之间没有联系。虽然血浆N-末端proBNP表现出与年龄和女性性别正性相关，但是在血浆UTN中没有表现出这种年龄依赖性的变化，并且正常女性中的水平比男性低。N-末端proBNP和UTN诊断心力衰竭的受试者工作特征曲线的面积分别为0.90和0.86(两者均P＜0.001)。在心力衰竭患者中血浆UTN增加，这表明该肽在所述疾病的病理生理学中起作用。在心力衰竭的诊断中，血浆UTN是N-末端proBNP的有用的替换物，因为其在心力衰竭中的水平增加与年龄、性别或NYHA分级无关。在本专利技术中，将所测定的尿压素水平(以及指示心脏疾病的其它标记物的水平，如果测定了的话)与在个体的所述体液中通常发现的指示不患有心力衰竭的参考水平比较。这些参考水平可由对不患有心力衰竭的个体的群体研究而确定。所述个体可按照年龄和/或性别匹配。如所提及的，其它标记物可以是N-末端proBNP。可二者择一或另外地，可测定BNP的水平。心肌细胞中储存的proBNP(两种循环形式、即BNP(活性肽)和N-末端BNP(NTproBNP，非活性肽)的完整前体)在左心室的释放以及BNP产物的增加由心肌伸长、心肌张力和心肌受损而激发。其中测定尿压素水平的体液可以是血浆或组织液，虽然也可使用其它来源的体液，即全血、血清或尿液。本专利技术中所测定的标记物可使用免疫测定法检测。在一个实施方案中，免疫测定法如下进行将取自待测个体的样品与适宜的抗体在当如果存在标记物时可发生免疫特异性结合的条件下接触，检测或测定抗体的任何免疫特异性结合的量。任何适宜的免疫测定法均可使用，其非限制性地包括使用例如下述技术的竞争性或非竞争性测定体系western印迹法、放射免疫测定法、ELISA(酶联免疫吸附法)、“夹心”免疫测定、免疫沉淀测定、沉淀素反应、凝胶扩散沉淀素反应、免疫扩散测定、聚集测定、补体结合测定、免疫放射测定、荧光免疫测定和A蛋白免疫测定。例如，标记物可在液态样品中通过两步夹心测定法测定。在第一步，使用捕获试剂(例如抗标记物抗体)来捕获标记物。该捕获试剂可任选地固定在固相上。在第二步，使用直接或间接标记的检测试剂来检测所捕获的标记物。在一个实施方案中，检测试剂为抗体。在另一实施方案中，检测试剂为外源凝集素。本专利技术还提供了可在本专利技术的第一方面的方法中使用的、用于检测尿压素的免疫测定法、试剂盒或装置。该免疫测定试剂盒或装置可含有与尿压素特异性结合的抗体，或本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在哺乳动物个体中诊断心力衰竭的方法，其中包括测定体液样品中尿压素的水平，并将其与在个体的所述体液中通常发现的指示不患有心力衰竭的参考水平进行比较，其中尿压素水平的增加指示心力衰竭。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：L额，
申请(专利权)人：因沃耐斯瑞士医学有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]