一种炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基及其制备方法和产孢培养方法技术

技术编号:25885877 阅读:91 留言:0更新日期:2020-10-09 23:20
本发明专利技术公开了一种炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基及其制备方法和产孢培养方法,每1000mL该培养基中含有燕麦片25‑35g和硫酸铵1‑3g;该培养基的制备方法包括:取燕麦片,向其中加水,于沸水浴中煎煮50‑80min,过滤,得滤液,向滤液中加水补足1000mL,得培养液;将硫酸铵加入该培养液中,搅拌均匀,调pH值为7.0‑8.5,灭菌制得。采用该培养基进行产孢的方法为:将供试菌活化并制取菌饼,将菌饼移入上述制得的培养基中;将含有菌饼的培养基于25‑32℃、半光照半黑暗、120‑130r/min振荡条件下培养。该培养基和产孢方法可有效解决现有的培养基和产孢方法存在的产孢量少,产孢时间长的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基及其制备方法和产孢培养方法
本专利技术涉及培养基
,具体涉及一种炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基及其制备方法和产孢方法。
技术介绍
植物炭疽病是我国作物、果蔬及观赏植物等普遍发生的一类病害,主要由炭疽菌属病原菌导致。炭疽菌分类归为子囊菌门、粪壳菌纲、肉座菌亚纲目小丛壳科、小丛壳属。炭疽菌属真菌在我国分布广泛,从东北到海南省均有分布,多种植物可以作为其寄主,具有广泛寄生性。该菌常为害植物叶、花、果、茎及嫩枝,引发各种农作物的炭疽病,造成叶斑、叶枯、花腐、果腐和枝枯等症状,影响植物的生长发育,降低作物品质,严重时可造成落花、落果,甚至植株死亡,导致农作物减产。高粱炭疽病是一种世界范围发生的病害,1852年高粱炭疽病在意大利首次被报道。目前,高粱炭疽病在我国高粱产区也普遍发生,它已成为高粱生产上最主要的叶部病害之一,苗期可危害叶片,导致叶枯、死苗,成株期主要危害叶片,可侵染茎秆、穗枝梗和籽粒,严重时可减产50%以上或造成毁灭性灾害。高粱炭疽菌属无性菌类腔孢纲黑盘孢目炭疽菌属。国内外对高粱炭疽菌的鉴定所用的培养基均为PDA培养基,但PDA培养基分离获得的病菌产孢量较少,是制约研究高粱炭疽病的瓶颈。为顺利进行后续的孢子萌发条件、侵染过程、病害防治药剂筛选,品种鉴定等研究,因此,掌握高粱炭疽病菌分生孢子大量产生的方法是关键的问题。
技术实现思路
针对现有技术中的上述不足,本专利技术提供了一炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基及其制备方法和产孢方法,该培养基和产孢方法可有效解决现有的培养基和产孢方法存在的产孢量少的问题。为实现上述目的,本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是:一种炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基,每1000mL培养基包括以下组分:燕麦25-35g,硫酸铵1-3g,余量为水。进一步地,每1000mL培养基包括以下组分:燕麦30g份,硫酸铵2g,余量为水。上述方案所产生的有益效果为:该培养基的成分简单,原料易得,原料成本低廉。培养基与孢子产生关系较大,采用不同的培养基或改变培养基的成分是促进孢子产生最主要的途径。燕麦中的营养物质不同于马铃薯,其中的营养物质成份更适合高粱刺盘孢的生长发育。上述的炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基的制备方法,包括以下步骤:(1)取燕麦片,向其中加水,于沸水浴中煎煮50-80min,过滤,得滤液,向滤液中加水补足1000mL,得培养液;(2)将硫酸铵加入步骤(1)中的培养液中,搅拌均匀,调pH值为7.0-8.5,灭菌,制得。进一步地,步骤(1)中的水浴煎煮时间为60min。进一步地,步骤(2)中pH值为8.0。进一步地,具体灭菌条件为:在高压湿热灭菌锅中,于121℃条件下灭菌20min。采用上述培养基进行炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养方法,包括以下步骤:将炭疽病菌高粱刺盘孢加入上述培养基中,于25-32℃、120-130r/min,半光照半黑暗条件下进行培养。进一步地,还包括对炭疽病菌高粱刺盘孢进行活化的过程。进一步地,步骤(2)中在30℃、125r/min、半黑暗半光照条件下培养。上述方案所产生的有益效果为:在半光照半黑暗、振荡条件下培养,可快速诱导产孢,在较短的时间内便可获得大量孢子,以供研究所需,具体半光照半黑暗培养过程为:每天有12小时处于光照条件下培养,另外12小时处于黑暗条件下培养。本专利技术所产生的有益效果为:本专利技术中的培养基原料简单易得,成本低廉;制备过程简单易于操作,制备成本低;采用本方法制得的培养基对炭疽病菌高粱刺盘孢进行培养,可以快速诱导炭疽病菌高粱刺盘孢产孢,具有产孢量大的优点。具体实施方式实施例1一种炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基,每1000mL培养基包括以下组分:燕麦片25g和硫酸铵1g。上述炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基的制备方法包括以下步骤:(1)取燕麦片,向其中加水,于沸水浴中煎煮50min,过滤,得滤液,向滤液中加水补足1000mL,得培养液;(2)将硫酸铵加入步骤(1)中的培养液中,搅拌均匀,调pH值为7.0,灭菌,制得。采用上述培养基进行炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养方法,包括以下步骤:(1)将高粱炭疽菌在PDA平板上于30℃常规条件下培养5天,然后在无菌条件下用打孔器从菌落边缘打取直径为5mm的菌饼,将菌饼移入上述方法制得的培养基中;(2)将步骤(1)中含有菌饼的培养基于25℃、半黑暗半光照和120r/min振荡条件下培养8天。实施例2一种炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基,每1000mL培养基包括以下组分:燕麦片35g和硫酸铵3g。上述炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基的制备方法包括以下步骤:(1)取燕麦片,向其中加水,于沸水浴中煎煮80min,过滤,得滤液,向滤液中加水补足1000mL,得培养液;(2)将硫酸铵加入步骤(1)中的培养液中,搅拌均匀,pH值为8.5,灭菌,制得。采用上述培养基进行炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养方法,包括以下步骤:(1)将高粱炭疽菌在PDA平板上于30℃常规条件下培养5天,然后在无菌条件下用打孔器从菌落边缘打取直径为5mm的菌饼,将菌饼移入上述方法制得的培养基中;(2)将步骤(1)中含有菌饼的培养基于32℃、半黑暗半光照和130r/min振荡条件下培养8天。实施例3一种炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基,每1000mL培养基包括以下组分:燕麦片30g和硫酸铵2g。上述炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基的制备方法包括以下步骤:(1)取燕麦片,向其中加水,于沸水浴中煎煮60min,过滤,得滤液,向滤液中加水补足1000mL,得培养液;(2)将硫酸铵加入步骤(1)中的培养液中,搅拌均匀,调pH值为8.0,灭菌,制得。采用上述培养基进行炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养方法,包括以下步骤:(1)将高粱炭疽菌在PDA平板上于30℃常规条件下培养5天,然后在无菌条件下用打孔器从菌落边缘打取直径为5mm的菌饼,将菌饼移入上述方法制得的培养基中;(2)将步骤(1)中含有菌饼的培养基于30℃、半黑暗半光照和125r/min振荡条件下培养8天。对比例1一种炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基,每1000mL培养基包括以下组分:燕麦片30g和硫酸铵0.5g。上述炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基的制备方法包括以下步骤:(1)取燕麦片,向其中加水,于沸水浴中煎煮30min,过滤,得滤液,向滤液中加水补足1000mL,得培养液;(2)将硫酸铵加入步骤(1)中的培养液中,搅拌均匀,调pH值为6.0,灭菌,制得。采用上述培养基进行炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养方法,包括以下步骤:(1)将高粱炭疽菌在PDA平板上于35℃常规条件本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基,其特征在于,每1000mL培养基包括以下组分:燕麦片25-35g,硫酸铵1-3g,余量为水。/n

【技术特征摘要】
1.一种炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基,其特征在于,每1000mL培养基包括以下组分:燕麦片25-35g,硫酸铵1-3g,余量为水。


2.如权利要求1所述的炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基,其特征在于,每1000mL培养基包括以下组分:燕麦片30g份,硫酸铵2g,余量为水。


3.权利要求1或2中所述的炭疽病菌高粱刺盘孢高效产孢培养基的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取燕麦片,向其中加水,于沸水浴中煎煮50-80min,过滤,得滤液,向滤液中加水补足1000mL,得培养液;
(2)向步骤(1)的培养液中加入硫酸铵,搅拌均匀,调pH值为7.0-8.5,灭菌,制得。

【专利技术属性】
技术研发人员:台莲梅
申请(专利权)人:黑龙江八一农垦大学
类型:发明
国别省市:黑龙江;23

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