一种类风湿性关节炎治疗凝胶制剂的合成方法技术

本发明专利技术公布一种类风湿性关节炎治疗凝胶制剂的合成方法。主要步骤包括:1)PLGA‑PEG‑PLGA凝胶溶液的制备；2)混合法制备HIV‑Vpu蛋白免疫抑制凝胶。HIV‑Vpu蛋白可抑制机体免疫功能，抑制类风湿性关节炎的免疫过激反应，防止免疫系统攻击自身正常关节组织。吲哚菁绿(ICG)的荧光效应使凝胶治疗的过程可视化，其产生的光热效应也可清除增生的滑膜细胞。PLGA‑PEG‑PLGA无毒，生物相容性好，在常温下呈液态，35度左右相变为凝胶，可以很好地用于体内注射，延长药物在体内的滞留，从而提高治疗效果。

【技术实现步骤摘要】
一种类风湿性关节炎治疗凝胶制剂的合成方法
本专利技术涉及凝胶制剂的合成
,具体涉及一种通过PLGA-PEG-PLGA包裹HIV病毒Vpu蛋白和吲哚菁绿(ICG)的策略,合成病毒蛋白免疫抑制凝胶制剂的方法。
技术介绍
自身免疫性疾病是指对自身抗原的免疫耐受性丧失、组织自身抗原抗体的产生和自身免疫现象的发生。如果这些反应引起组织损伤并引起病理变化或临床症状，则称为自身免疫性疾病。类风湿关节炎的自身免疫理论已被大多数学者广泛接受。类风湿性关节炎常自然发病，反复发作，慢性迁延，终身不愈。患者的滑膜组织能合成大量的免疫球蛋白(包括类风湿因子)。类风湿性关节炎患者关节滑膜组织中有大量淋巴细胞和浆细胞聚集，反映了局部存在着活跃的免疫反应。关节部(包括滑液)有免疫球蛋白与补体形成的复合物，且关节液内补体浓度的降低程度与免疫复合物的活性一致。而HIV病毒产生的多种蛋白质在抑制免疫反应方面可发挥作用。其中辅助蛋白U(Vpu)可抑制一种叫做NF-kB的转录因子的激活，减少了在免疫反应中起关键作用的细胞因子的产生。ICG化学名为吲哚菁绿，是一种感光染料，是美国食品药品监督管理局(FDA)惟一批准的体内应用染料。它注入血液后会迅速与清蛋白及α1-脂蛋白结合(98％)，随血液经过肝脏时，90％以上被肝细胞摄取，再以原形由胆道排泄，不参与体内化学反应，无肠肝循环，无淋巴逆流，不从肾脏等肝外脏器排泄，无辐射，无毒副作用。PLGA-PEG-PLGA是一种三嵌段聚合物。其中PLGA由两种单体——乳酸和羟基乙酸随机聚合而成，是一种可降解的功能高分子有机化合物，其降解产物是乳酸和羟基乙酸，同时也是人代谢途径的副产物，所当它应用在医药和生物材料中时不会有毒副作用，具有良好的生物相容性、无毒、良好的成囊和成膜的性能。PEG具有良好的水溶性，生物相容性好，并赋予了聚合物温敏相变的性质。
技术实现思路
本专利技术为克服现有技术的不足，提供一种通过PLGA-PEG-PLGA包裹HIV病毒Vpu蛋白和吲哚菁绿(ICG)的策略,合成免疫抑制凝胶制剂的方法。利用Vpu蛋白抑制机体的特异性细胞免疫和体液免疫反应，抑制类风湿性关节炎的免疫过激反应，防止免疫系统攻击自身正常关节组织，以达到治疗类风湿性关节炎的目的。本专利技术的技术方案是一种免疫抑制凝胶制剂的合成方法，通过PLGA-PEG-PLGA包裹HIV病毒Vpu蛋白和吲哚菁绿(ICG)的策略,具体步骤如下：1)称取PLGA-PEG-PLGA材料，加入水中溶解，得到浓度为0.2-0.4mg/ml的PLGA溶液；2)称取ICG材料，加入水中溶解，得到浓度为5-8mg/ml的ICG溶液；3)各取适量混合成病毒免疫凝胶。所述步骤3)具体如下：(1)在室温下将盛有1ml的PLGA-PEG-PLGA溶液的单口瓶置于旋转搅拌器上，搅拌速度设定为500r/min；(2)边搅拌边逐滴加入8uL的ICG水溶液和20uLVpu蛋白溶液，继续搅拌直至完全混匀，最终得到HIV-Vpu蛋白@ICG免疫抑制凝胶。本专利技术的优势在于：1)Vpu蛋白可以抑制细胞免疫,抑制类风湿性关节炎的免疫过激反应，防止免疫系统攻击自身正常关节组织，以达到治疗类风湿性关节炎的目的。2)吲哚菁绿(ICG)的荧光效应使治疗的过程可视化，其产生的光热效应也可清除清除增生的滑膜细胞。3)PLGA-PEG-PLGA无毒，生物相容性好，在常温下呈液态，35度左右相变为凝胶，可以很好地用于体内注射，延长药物在体内的滞留，从而提高效果。附图说明图1：免疫抑制凝胶相变示意图。具体实施方式以下结合附图和具体实施例来对本专利技术作进一步的说明。实施例1：1)准确称取0.25mg的PLGA-PEG-PLGA材料，加入1mL水溶解，得到浓度为0.25mg/ml的PLGA-PEG-PLGA水溶液。2)准确称取5mg的ICG材料，加入1mL水溶解，得到浓度为5mg/ml的ICG水溶液。3)混合法合成HIV-Vpu蛋白@ICG免疫抑制凝胶的方法如下：(1)在室温下将盛有1ml的PLGA-PEG-PLGA溶液的单口瓶置于旋转搅拌器上，搅拌速度设定为500r/min；(2)边搅拌边逐滴加入8uL的ICG水溶液和20uLVpu蛋白溶液，继续搅拌直至完全混匀，最终得到HIV-Vpu蛋白@ICG免疫抑制凝胶。实施例2：1)准确称取0.2mg的PLGA-PEG-PLGA材料，加入1mL水溶解，得到浓度为0.2mg/ml的PLGA-PEG-PLGA溶液。2)准确称取8mg的ICG材料，加入1mL水溶解，得到浓度为8mg/ml的ICG水溶液。3)混合法合成HIV-Vpu蛋白@ICG免疫抑制凝胶的方法如下：(1)在室温下将盛有1ml的PLGA-PEG-PLGA溶液的单口瓶置于旋转搅拌器上，搅拌速度设定为500r/min；(2)边搅拌边逐滴加入6uL的ICG水溶液和20uLVpu蛋白溶液，继续搅拌直至完全混匀，最终得到HIV-Vpu蛋白@ICG免疫抑制凝胶。实施例3：1)准确称取0.4mg的PLGA-PEG-PLGA材料，加入1mL水溶解，得到浓度为0.4mg/ml的PLGA-PEG-PLGA溶液。2)准确称取6mg的ICG材料，加入1mL水溶解，得到浓度为6mg/ml的ICG水溶液。3)混合法合成HIV-Vpu蛋白@ICG免疫抑制凝胶的方法如下：(1)在室温下将盛有1ml的PLGA-PEG-PLGA溶液的单口瓶置于旋转搅拌器上，搅拌速度设定为500r/min；(2)边搅拌边逐滴加入10uL的ICG水溶液和20uLVpu蛋白溶液，继续搅拌直至完全混匀，最终得到HIV-Vpu蛋白@ICG免疫抑制凝胶。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种类风湿性关节炎治疗凝胶制剂的合成方法，其特征是，通过PLGA-PEG-PLGA包裹HIV病毒Vpu蛋白和吲哚菁绿(ICG)的策略,具体步骤如下：/n1)称取PLGA-PEG-PLGA材料，加入水中溶解，得到浓度为0.2-0.4mg/ml的PLGA-PEG-PLGA溶液；/n2)称取ICG材料，加入水中溶解，得到浓度为5-8mg/ml的ICG溶液；/n3)取6-10uL的ICG水溶液和20uLHIV病毒Vpu蛋白溶液加入1mlPLGA-PEG-PLGA水溶液中混合成免疫抑制凝胶。/n

【技术特征摘要】
1.一种类风湿性关节炎治疗凝胶制剂的合成方法，其特征是，通过PLGA-PEG-PLGA包裹HIV病毒Vpu蛋白和吲哚菁绿(ICG)的策略,具体步骤如下：
1)称取PLGA-PEG-PLGA材料，加入水中溶解，得到浓度为0.2-0.4mg/ml的PLGA-PEG-PLGA溶液；
2)称取ICG材料，加入水中溶解，得到浓度为5-8mg/ml的ICG溶液；
3)取6-10uL的ICG水溶液和20uLHIV病毒Vpu蛋白溶液加入1ml...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑斌，彭文畅，明东，甘霖，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津;12