一种黄芪药材的质量检测方法技术

本发明专利技术公开一种黄芪药材及其提取物的指纹图谱质量检测方法。该方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈－水为流动相，进行梯度洗脱；取黄芪甲苷加甲醇溶解，作为参照品溶液；取黄芪药材粉碎，以甲醇为提取溶剂，回流提取，回收甲醇至干，残渣用水溶解，在以水饱和的正丁醇为提取溶剂，以氨试液除杂，待水饱和的正丁醇提取物挥干后，在残留物中加入甲醇溶解，取甲醇溶解作为黄芪药材指纹图谱检测供试液或取黄芪皂苷，加甲醇溶解，作为黄芪皂苷指纹图谱检测供试液；供试液指纹图谱检测，用高效液相色谱对黄芪药材指纹图谱检测供试液进行检测，得黄芪药材及其黄芪皂苷的指纹图谱；供试品指纹图谱应与标准指纹图谱有良好的相似性，相似度＞０．９０。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中药材的质量检测方法，特别涉及黄芪药材及其提取物的指纹图谱质量检测方法。
技术介绍
中药指纹图谱是指一种中药材或中成药所共有的，具有特征性的一类成分的色谱或光谱的图谱。指纹图谱技术是评价中药质量的关键手段，有利于中药现代化。日本、美国、德国、法国等国先后已开始使用指纹图谱对天然药物进行质量控制，能有效的控制药物的质量，保证药物的安全有效，目前已为国际所共识。今天，我国的一些制药企业在国家的倡导下，已对一些中药产品进行了指纹图谱研究。然而，现在对于黄芪药材及其提取物指纹图谱的研究较少。黄芪原药材及其提取物也需建立指纹图谱质量检测方法。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种黄芪药材及其提取物黄芪皂苷的质量检测方法。本专利技术目的是通过如下技术方案实现的。本专利技术黄芪药材的指纹图谱质量检测方法，该方法包括如下步骤色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水的比例为0.1～0.5∶1作为流动相，进行梯度洗脱0至20分钟，乙腈浓度为10～30％，继后15分钟，乙腈浓度从10～30％至30～40％，30～40％乙腈浓度维持至60分钟；流速0.5～1.0ml/min；柱温20～40℃；检测器为蒸发光散射检测器，漂移管温度95～125℃，气体流速2.5～3.2SLPM；参照品溶液的制备，精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作为参照品溶液；供试品溶液的制备，取黄芪药材适量，粉碎，取1.5g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇50～200ml，回流2～8小时，放冷，滤过，滤液回收甲醇至干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2～5次，每次10～40ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取1～4次，每次5～30ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为黄芪药材指纹图谱检测供试液；供试液指纹图谱检测，用高效液相色谱对黄芪药材指纹图谱检测供试液进行检测，进样量为5～50μl，记录60分钟的色谱图，得黄芪药材的指纹图谱；供试品指纹图谱应与标准指纹图谱相似度应大于0.90；黄芪药材指纹图谱共有7个共有指纹峰，参照峰S为黄芪甲苷色谱峰，7个共有指纹峰的相对保留时间分别为1号峰0.387±0.039，2号峰0.802±0.080，3号峰0.852±0.085，4号峰0.875±0.088，5号峰0.909±0.091，S峰1.000±0.000，6号峰1.030±0.010。本专利技术黄芪药材的指纹图谱质量检测方法，优选如下检测方法色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝0.23∶1为流动相，进行梯度洗脱0至20分钟，乙腈浓度为23％，继后15分钟，乙腈浓度从23％至35％，35％乙腈浓度维持至60分钟；流速0.7ml/min；柱温35℃；检测器为蒸发光散射检测器，漂移管温度105℃，气体流速2.95SLPM；参照品溶液的制备，精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作为参照品溶液；供试品溶液的制备，取黄芪药材适量，粉碎，取1.5g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇120ml，回流6小时，放冷，滤过，滤液回收甲醇至干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次15ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次15ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为黄芪药材指纹图谱检测供试液；供试液指纹图谱检测，用高效液相色谱对黄芪药材指纹图谱检测供试液进行检测，进样量为20μl，记录60分钟的色谱图，得黄芪药材的指纹图谱；供试品指纹图谱应与标准指纹图谱相似度应大于0.90；黄芪药材指纹图谱共有7个共有指纹峰，参照峰S为黄芪甲苷色谱峰，7个共有指纹峰的优选相对保留时间分别为1号峰0.387，2号峰0.802，3号峰0.852，4号峰0.875，5号峰0.909，S峰1.000，6号峰1.030；1号峰0.425，2号峰0.723，3号峰0.936，4号峰0.788，5号峰0.999，S峰1.000，6号峰1.021或1号峰0.349，2号峰0.881，3号峰0.768，4号峰0.962，5号峰0.909±0.819，S峰1.000，6号峰1.039。黄芪药材中的提取物黄芪皂苷的指纹图谱的质量检测方法，该方法包括如下步骤色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水比例为0.1～0.5∶1作为流动相，进行梯度洗脱0至20分钟，乙腈浓度为10～30％，继后15分钟，乙腈浓度从10～30％至30～40％，30～40％乙腈浓度维持至60分钟；流速0.5～1.0ml/min；柱温20～40℃；检测器为蒸发光散射检测器，漂移管温度95～125℃，气体流速2.5～3.2SLPM；参照品溶液的制备，精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作为参照品溶液；供试品溶液的制备，取黄芪皂苷20mg，精密称定，置5ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；供试液指纹图谱检测，用高效液相色谱对黄芪皂苷指纹图谱检测供试液进行检测，进样量为5～50μl，记录60分钟的色谱图，得黄芪皂苷的指纹图谱；供试品指纹图谱应与标准指纹图谱相似度应大于0.90；黄芪皂苷指纹图谱共有6个共有指纹峰，参照峰S为黄芪甲苷色谱峰，6个共有指纹峰的相对保留时间分别为1号峰0.797±0.080，2号峰0.847±0.085，3号峰0.870±0.087，4号峰0.905±0.090，S峰1.000±0.000，5号峰1.029±0.010。黄芪皂苷的指纹图谱质量检测方法，优选如下检测方法色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水的比例为0.23∶1作为流动相，进行梯度洗脱0至20分钟，乙腈浓度为23％，继后15分钟，乙腈浓度从23％至35％，35％乙腈浓度维持至60分钟；流速0.7ml/min；柱温35℃；检测器为蒸发光散射检测器，漂移管温度105℃，气体流速2.95SLPM；参照品溶液的制备，精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作为参照品溶液；供试品溶液的制备，取黄芪皂苷20mg，精密称定，置5ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；供试液指纹图谱检测，用高效液相色谱对黄芪皂苷指纹图谱检测供试液进行检测，进样量为20μl，记录60分钟的色谱图，得黄芪皂苷的指纹图谱；供试品指纹图谱应与标准指纹图谱相似度应大于0.90；黄芪皂苷指纹图谱共有6个共有指纹峰，参照峰S为黄芪甲苷色谱峰，6个共有指纹峰的优选相对保留时间分别为1号峰0.797，2号峰0.847，3号峰0.870，4号峰0.905，S峰1.000，5号峰1.029；1号峰0.876，2号峰0.931，3号峰0.956，4号峰0.994，S峰1.000，5号峰1.038或1号峰0.718，2号峰0.763，3号峰本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种黄芪药材指纹的图谱质量检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：　　　　色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－水比例为０．１～０．５∶１作为流动相，进行梯度洗脱：０至２０分钟，乙腈浓度为１０～３０％，继后１５分钟，乙腈浓度从１０～３０％至３０～４０％，３０～４０％乙腈浓度维持至６０分钟；流速０．５～１．０ｍｌ／ｍｉｎ；柱温２０～４０℃；检测器为蒸发光散射检测器，漂移管温度９５～１２０℃，气体流速２．５～３．２ＳＬＰＭ；参照品溶液的制备，精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解制成每１ｍｌ含０．５ｍｇ的溶液，作为参照品溶液；供试品溶液的制备，取黄芪药材适量，粉碎，取１．５ｇ，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇５０～２００ｍｌ，回流２～８小时，放冷，滤过，滤液回收甲醇至干，残渣加水２０ｍｌ使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取２～５次，每次１０～４０ｍｌ，合并正丁醇提取液，用氨试液提取１～４次，每次５～３０ｍｌ，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至５ｍｌ量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用０．４５μｍ的微孔滤膜滤过，取续滤液作为黄芪药材指纹图谱检测供试液；供试液指纹图谱检测，用高效液相色谱对黄芪药材指纹图谱检测供试液进行检测，进样量为５～５０μｌ，记录６０分钟的色谱图，得黄芪药材的指纹图谱；供试品指纹图谱应与标准指纹图谱相似度应大于０．９０；黄芪药材指纹图谱共有７个共有指纹峰，参照峰Ｓ为黄芪甲苷色谱峰，７个共有指纹峰的相对保留时间分别为：１号峰０．３８７±０．０３９，２号峰０．８０２±０．０８０，３号峰０．８５２±０．０８５，４号峰０．８７５±０．０８８，５号峰０．９０９±０．０９１，Ｓ峰１．０００±０．０００，６号峰１．０３０±０．０１０。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：程志鹏，梁隆，胡思玉，张德奎，余启波，
申请(专利权)人：四川科伦药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：90[中国|成都]