用于检测EVI1基因相对表达量的方法、引物和探针以及试剂盒技术

本发明专利技术用于检测AML患者外周血中EVI1基因相对表达水平，便于开展后期化疗方案制定及预后预测。具体包含涉及检测EVI1基因的上游引物EVI1‑F、下游引物EVI1‑R和探针EVI1‑Probe，针对内参基因ABL的上游引物ABL‑F、下游引物ABL‑R和探针ABL‑Probe等试剂。本发明专利技术经测试灵敏度高，操作简便，可为AML患者化疗方案的制定提供参考和依据，有助于患者的个体化治疗。

【技术实现步骤摘要】
用于检测EVI1基因相对表达量的方法、引物和探针以及试剂盒
本专利技术属生命科学和生物
，特别是一种用于检测EVI1基因相对表达量的引物和探针，采用探针实时荧光定量PCR技术，预测AML预后，EVI1基因表达水平检测可以有助于探讨其与AML的预后转归。
技术介绍
急性髓系白血病(actuemyeloidleukemia，AML)是一组异质性非常强的血液系统恶性肿瘤，通常以造血干细胞的恶性克隆性增殖及分化成熟受抑为特点。其临床特征、生物学行为、疗效具有非常大的差异。根据AML的诊断和预后特点，结合现代形态、细胞遗传学和分子生物学特征，WHO2008分型将AML做了非常细致的分类。其中伴有inv(3)(q21q26.2)或t(3；3)(q21；q26.2)的这一类白血病具有自己的特点而被单独列为一类。此类AML常过表达EVIl(Ecotropicvirusintegrationsite1，逆转录病毒整合位点1)基因，形态上可有巨核系发育异常，血小板增多，治疗缓解率不足50％，长期生存率低于10％。EVIl基因又称为MECOM基因，于1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于检测EVI1基因相对表达量的引物和探针，其特征在于：所述引物和探针包括：/n(1)检测EVI1基因的上游引物EVI1-F、下游引物EVI1-R和探针EVI1-Probe，其中，/nEVI1-F：CCCATGTGCCAGAGGAACTT/nEVI1-R：CAGTGACAGCATCATAGCATATGC/nEVI1-Probe：FAM-CAGCCGTTACACAGAAAGTCCAAATCGC-TAMRA/n(2)检测内参基因ABL的引物ABL-F，ABL-R，探针ABL-Probe；其中，/nABL-F：GATACGAAGGGAGGGTGTACCA/nABL-R：CTCGGCCAGGGTG...

【技术特征摘要】
1.用于检测EVI1基因相对表达量的引物和探针，其特征在于：所述引物和探针包括：
(1)检测EVI1基因的上游引物EVI1-F、下游引物EVI1-R和探针EVI1-Probe，其中，
EVI1-F：CCCATGTGCCAGAGGAACTT
EVI1-R：CAGTGACAGCATCATAGCATATGC
EVI1-Probe：FAM-CAGCCGTTACACAGAAAGTCCAAATCGC-TAMRA
(2)检测内参基因ABL的引物ABL-F，ABL-R，探针ABL-Probe；其中，
ABL-F：GATACGAAGGGAGGGTGTACCA
ABL-R：CTCGGCCAGGGTGTTGAA
ABL-Probe：FAM-TGCTTCTGATGGCAAGCTCTACGTCTCCT-TAMRA。


2.如权利要求1所述的引物和探针，其特征在于EVI1上游引物、下游引物和探针的摩尔比为1:1:1。


3.如权利要求1所述的引物和探针，其特征在于ABL-F:ABL-R:ABL-Probe的摩尔比为1:1:1。


4.一种检测样本中EVI1基因相对表达量的方法，所述方法包括以下步骤：
(1)提取样本中的RNA；
(2)将步骤(1)中的RNA逆转录cDNA；
(3)加入(2)中获得的cDNA到反应管中，利用针对EVI1的上、下游引物EVI1-F和EVI1-R以及探针EVI1-Probe检测样本中的EVI1基因的荧光信号；利用针对ABL内参基因的上、下游引物ABL-F和ABL-R以及探针ABL-Probe检测样本中的ABL内参基因的...

【专利技术属性】
技术研发人员：裘振亚，李允章，王淑一，
申请(专利权)人：杭州艾迪康医学检验中心有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33