一种表达酪氨酸酚裂解酶活性包涵体的大肠杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种表达酪氨酸酚裂解酶活性包涵体的大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明专利技术以大肠杆菌BL21作为宿主，表达重组质粒pET‑28(a)‑TPL及9个分别与酪氨酸酚裂解酶羧基端融合的功能性短肽，得到了生产L‑DOPA的重组大肠杆菌，利用获得的重组菌全细胞转化生产L‑DOPA，其中菌株TPL‑ELP10,TPL‑EAK16,TPL‑18A,TPL‑GFIL16全细胞反应的L‑DOPA产量分别为37.8±1.5g/L,53.8±2.1g/L,37.5±0.5g/L,29.1±1.9g/L,相比于对照菌株分别提高111％,201％,109％,62.6％。

【技术实现步骤摘要】
一种表达酪氨酸酚裂解酶活性包涵体的大肠杆菌及其应用
本专利技术涉及一种表达酪氨酸酚裂解酶活性包涵体的大肠杆菌及其应用，属于生物工程

技术介绍
左旋多巴(L-DOPA)是氨基酸的一种衍生物，也是从L-酪氨酸到儿茶酚或黑色素的生化代谢途径过程中的重要中间产物，又称3,4-二羟基苯基丙氨酸，是一种重要的活性物质。L-DOPA是新型的生化药品，在食品、医药和保健品等领域都具有广泛应用。L-DOPA的衍生物——多巴胺是一种重要的神经递质，由于多巴胺不能透过血脑屏障进入脑组织，所以不能通过补充多巴胺来治疗帕金森氏病，而L-DOPA可以通过血脑屏障，并在脑组织中脱羧形成多巴胺，从而使脑组织中多巴胺含量增加而达到治疗的目的。Birkmayser于1961年用L-DOPA治疗帕金森氏病获得明显疗效。L-DOPA及复方L-DOPA(如美多芭)已成为治疗常见老年病——帕金森氏病的主要药物。L-DOPA还可用来治疗弱视；利用酪氨酸酶将L-酪氨酸转化，经L-DOPA形成黑色素，可用于毛发染色；此外，人们还发现L-DOPA有抗衰老的功效。基于L-DOPA本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.重组氨酸酚裂解酶，其特征在于，所述酪氨酸酚裂解酶的C端融合SEQ ID NO.1～9任一所示的短肽。/n

【技术特征摘要】
1.重组氨酸酚裂解酶，其特征在于，所述酪氨酸酚裂解酶的C端融合SEQIDNO.1～9任一所示的短肽。


2.根据权利要求1所述的酪氨酸酚裂解酶，其特征在于，所述酪氨酸酚裂解酶为如下(a)或(b)：
(a)由SEQIDNO.10所示的氨基酸组成的蛋白质；
(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有酪氨酸酚裂解酶活性的由(a)衍生的蛋白质。


3.编码权利要求1或2所述的酪氨酸酚裂解酶的基因。


4.连接有权利要求3所述基因的表达载体。


5.一种重组大肠杆菌，其特征在于，含有权利要求4所述的表达载体。


6.一种构建权利要求5所述重组大肠杆菌的方法，其特征在于，将融合功能性短肽的酪氨酸酚裂解酶基因连接至质粒pET-28(a)...

【专利技术属性】
技术研发人员：周景文，陈坚，韩红梅，曾伟主，堵国成，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32