一种聚肌胞诱导的高效DC-CIK细胞的方法技术

本发明专利技术涉及免疫技术领域，具体涉及利用聚肌苷酸和聚胞苷酸的共聚物‑聚肌胞(Poly I:C)，聚肌胞是一种是动物体内3型Toll样受体的配体,激活TLR‑3后可介导机体一系列的免疫反应,对机体的特异性免疫和非特异性免疫均有很好的促进作用。本发明专利技术用聚肌胞诱导的DC‑CIK具有较对照组更高增殖、高分化(尤其CD3+CD4‑CD8+，CTL)、高杀瘤活性。利用聚肌胞诱导的自体高效DC‑CIK及其它免疫细胞，应用于临床肿瘤患者的治疗。以期恢复或提高肿瘤患者免疫功能，提高机体自身的免疫系统对肿瘤细胞进行杀灭和抑制其增殖。降低肿瘤细胞负荷，清除微小的残留病灶或明显抑制了残留肿瘤/癌症细胞增殖的方式，消除复发、转移的因素，增大治愈的可能性，延长生存时间，提高生活质量。从而达到治疗肿瘤/癌症的目的。

【技术实现步骤摘要】
一种聚肌胞诱导的高效DC-CIK细胞的方法
本专利技术涉及免疫
，具体涉及利用聚肌苷酸和聚胞苷酸的共聚物-聚肌胞(polyinosinic:polycytidylicacidcopolymer,PolyI:C)，聚肌胞是一种是动物体内3型Toll样受体的配体,激活TLR-3后可介导机体一系列的免疫反应,如诱导干扰素、白介素、肿瘤坏死因子等细胞因子的分泌,促进单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞及树突状细胞的增殖与成熟等,对机体的特异性免疫和非特异性免疫均有很好的促进作用。使用聚肌胞加入诱导培养基中协同诱导DC-CIK(巨噬细胞-细胞因子活化的肿瘤杀伤细胞)细胞的增殖与分化，使DC-CIK的杀瘤活性得到大幅提升。以期获得一种聚肌胞诱导的自体高效DC-CIK细胞，应用于临床肿瘤患者的治疗。达到更好的杀灭残余的肿瘤细胞，减少肿瘤复发、转移的因素，增大治愈的可能性，延长患者的生存时间，提高患者生存质量。
技术介绍
自体免疫细胞(DC-CIK)应用于肿瘤生物治疗是一种新兴的、安全的及具有显著疗效的肿瘤治疗模式，是一种治疗肿瘤的新型治疗方法。该方法是运用生物学技术和生物制剂，对从肿瘤患者外周血采集、分离的免疫细胞-单个核细胞(包括树突状细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞)进行体外诱导培养和扩增后，回输到病人体内以激发和增强机体自身免疫功能，从而达到治疗肿瘤的目的。肿瘤生物治疗技术是继手术、放疗和化疗之后的第四大肿瘤治疗的方法。聚肌胞是聚肌苷酸和聚胞苷酸的共聚物，是一种高效的干扰素(IFN)诱生剂,具有广谱抗病毒、刺激吞噬、调整机体免疫、抗肿瘤、抗某些细菌和原虫感染等功能。目前在人类医学上用于治疗肝炎、疱疹病毒感染及一些肿瘤性疾病等方面,显示了其确实的临床疗效。同时，聚肌胞是动物细胞3型Toll样受体(TLR-3)的配体,聚肌胞激活TLR-3后可介导机体一系列的免疫反应,如诱导干扰素、白介素、肿瘤坏死因子等细胞因子的分泌,促进免疫细胞(包括：单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞及树突状细胞)的增殖与成熟等,促进体内抗体的生成。聚肌胞对机体的特异性免疫和非特异性免疫均有很好的促进作用。聚肌胞的免疫调节作用：免疫是机体的一种生理性保护功能,是机体识别和消灭外来侵入的任何异物(病毒、细菌等),处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为,免疫力是人体识别和排除“异己”的生理反应。机体的免疫能力可分为特异性免疫与非特异性免疫两种,两者是密切联系的。非特异性免疫是生物在种系发展过程中不断与病原微生物斗争中形成的,并可遗传给后代的一种免疫功能，它是与人体的组织特性和生理机能密切相关的。特异性免疫是机体在后天受内外环境因素的刺激而获得的免疫功能。它能识别再次接触的相同抗原,并发生相应的免疫学反应,它需要在高度分化的组织和细胞的参与下才能完成。(1)聚肌胞增强免疫细胞的活性；(2)聚肌胞促进多种细胞因子的分泌；(3)聚肌胞对Mx蛋白的诱生作用；(4)聚肌胞促进体内抗体的生成。聚肌胞的抗肿瘤作用研究已经证明,聚肌胞不仅可以抑制致瘤病毒和致瘤病毒如多瘤病毒、单纯泡疹病毒等引发的肿瘤。对移植肿瘤,如小鼠的多种网状细胞肉瘤、腹水瘤、S91黑色素瘤、乳腺瘤、纤维肉瘤等,以及地鼠的鼠肉瘤,都不同程度的抑制。肿瘤生物治疗是一种新兴的、具有显著疗效的肿瘤治疗模式，是一种自身免疫抗癌的新型治疗方法。它是运用生物技术和生物制剂对从病人体内采集的免疫细胞进行体外培养和扩增后回输到病人体内的方法，来激发、增强机体自身免疫功能，从而达到治疗肿瘤的目的。肿瘤生物治疗是继手术、放疗和化疗之后的第四大肿瘤治疗技术。免疫系统是人体的防御体系，一方面发挥着清除细菌、病毒、外来异物的功能，另一方面消除体内衰老细胞以及发生突变的细胞(部份突变细胞会变成肿瘤细胞)。机体免疫系统和肿瘤细胞相互作用的结果决定了肿瘤的最终演变。对于健康的人来说，其免疫系统的强大足以及时清除突变的癌细胞。但对于肿瘤病人来说，普遍存在免疫系统低下，不能有效地识别、杀灭肿瘤/癌症细胞；另一方面，肿瘤/癌症细胞大量增殖，会进一步抑患者的免疫功能，而且，肿瘤/癌症细胞有多种机制来逃脱免疫细胞的识别与杀伤，肿瘤/癌症的免疫治疗就是借助分子生物学技术和细胞工程技术，提高肿瘤/癌症的免疫原性，给机体补充足够数量的功能正常的免疫细胞和相关分子，激发和增强机体抗瘤免疫应答，提高肿瘤/癌症对机体抗肿瘤/癌症免疫效应的敏感性，在体内、外诱导肿瘤/癌症特异性和非特异性效应细胞和分子，达到最终清除肿瘤/癌症的目的。肿瘤/癌症生物治疗，其作用不是杀死全部肿瘤/癌症细胞，而是由于当肿瘤/癌症细胞负荷明显降低时，机体的免疫功能恢复后，通过清除微小的残留病灶或明显抑制了残留肿瘤/癌症细胞增殖的方式来达到治疗肿瘤/癌症的目的。肿瘤/癌症免疫治疗正是通过人为的干预，来调动机体自身的免疫系统对癌细胞进行杀灭和抑制其增殖。实验及临床均提示机体的免疫系统具有清除肿瘤/癌症的作用，在原发性肿瘤/癌症手术切除或经氩氟刀等微创手术消融掉局部肿瘤/癌症后，用免疫疗法能杀灭剩余的肿瘤/癌症细胞，消除复发、转移的因素，增大治愈的可能性，延长生存时间，提高生活质量。截止2013年，肿瘤/癌症生物治疗已被视为继手术、放疗、化疗之后的第四种治疗方法。生物疗法包括细胞因子治疗、免疫细胞治疗、基因治疗、分子靶向治疗和抗体治疗等。生物细胞免疫疗法是继手术、放疗和化疗之后的第四大肿瘤治疗技术。生物细胞免疫疗法治疗肿瘤，具有以下优势：1.效果确切，有效率高。对有些肿瘤/癌症，有效率高达70％。2.无放、化疗毒副作用，病人不痛苦，耐受性好，杀瘤特异性强。3.能够激发全身性的抗癌效应，对多发病灶或转移的恶性肿瘤同样有效。4.可以帮助机体快速恢复被放、化疗破坏的抗癌免疫系统，提高远期抗癌能力。5.对肿瘤/癌症术后防复发效果显著，远期抗癌效果良好。6.可单独使用也可与其它治疗方法联合使用。单次有效，多次使用，效果更佳。自体DC-CIK细胞是众多免疫细胞疗法的一种。DC-CIK细胞能以不同的机制识别肿瘤细胞，通过直接的细胞质颗粒穿透封闭的肿瘤细胞膜，实现对肿瘤细胞的裂解；通过诱导肿瘤细胞凋亡杀伤肿瘤细胞；DC-CIK细胞能分泌IL-2、IL-6、IFN-γ等多种抗肿瘤的细胞因子；DC-CIK细胞回输后可激活机体自身的免疫系统，提高机体的免疫功能。该疗法既可单独使用，也可以作为手术、化疗和放疗后的有力辅助手段，效果显著。结合手术切除、介入、射频、氩氦刀等治疗，可清除不能用手术切除的极微小瘤灶或是体内散存的瘤细胞，在延缓或阻止肿瘤的转移或复发方面有重要作用；对于部分暂时不适宜做手术、介入或其它治疗的肿瘤患者，也可以先进行DC-CIK细胞治疗，提高身体机能状况，改善生活质量，争取其它治疗机会。由于生物免疫治疗技术是利用人体自身的免疫细胞，而不是传统的化学药品来杀伤肿瘤细胞的，因此该技术安全无毒副作用，适本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.聚肌胞高效诱导DC-CIK细胞的方法。/n

【技术特征摘要】
1.聚肌胞高效诱导DC-CIK细胞的方法。


2.聚肌胞作为其它免疫细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘才明，刘杰，
申请(专利权)人：成都源泉生物科技有限公司，四川大学华西医院，
类型：发明
国别省市：四川;51