本发明专利技术提供了一种脐带血造血干细胞解冻后清洗装置及基于其的解冻清洗与保存方法，所述装置包括输液袋和转移袋，所述输液袋上部设置加样口和输液插口，通过加样口连接一Y型管路，Y型管路另两端连接穿刺头和鲁尔接口，Y型管路的三段上分别设置第一管路夹子、第三管路夹子和第四管路夹子，所述输液袋和转移袋之间通过导管连接，所述导管上设置第二管路夹子；所述解冻清洗与保存方法包括脐带血冷冻复苏、加入解冻稀释液、离心处理和加入细胞保存液等步骤。利用本发明专利技术所述装置对解冻后的脐带血进行清洗和后续临床输注，不仅便于日常操作，且解冻后的脐带血造血干细胞可在4℃放置至少72小时，可满足长途运输的需要。
【技术实现步骤摘要】
一种脐带血造血干细胞解冻后清洗装置及基于其的解冻清洗与保存方法
本专利技术属于医药生物领域，特别涉及一种脐带血造血干细胞解冻后清洗装置及基于其的解冻清洗与保存方法。
技术介绍
脐带血造血干细胞可以用于造血干细胞移植，治疗血液系统和免疫系统等诸多疾病，有着重要的临床应用价值。脐带血造血干细胞大多以液氮冻存的形式存在于脐带血库中，在临床应用时需要进行解冻复苏。解冻复苏后的脐带血如果不经处理，需要在30分钟内进行输注，否则活性难以保证。而采用稀释的方法，解冻后的脐带血可在4℃放置4小时。如果通过离心去除冷冻保护剂，解冻后的脐带血可在4℃放置24小时。因为离心去除冷冻保护剂的方法会导致脐带血细胞的大量丢失，而稀释的方法获得的保存时间延长有限，故目前国内的脐带血临床应用均采用解冻后立即输注的方式。这就要求脐带血通过液氮低温运输的方式被提前运送到临床医疗机构，然后在病房进行解冻复苏。现有技术存在以下几个问题：（1）液氮属于危险化学品，在使用液氮罐进行航空或铁路运输时，存在不被许可的情况。（2）脐带血的液氮低温运输操作相对复杂，对各方面要求较高。首先，运输用便携式液氮罐在每次运输前都需要进行可靠性验证；其次，在运输过程中一般需要2名工作人员护送，全程进行温度监控；最后，脐带血的解冻复苏需要由脐带血库的专职人员完成，以应对可能出现的各种紧急情况。（3）即使做了各种准备工作，并小心操作，依然无法完全避免解冻时的冷冻袋破损情况发生。而一旦发生此种情况，则会令造血干细胞移植患者处于非常危险的境地。因为在进行脐带血解冻时，患者通常经过了移植前预处理，造血和免疫系统几乎完全被清除和抑制，如果不能及时进行脐带血输注，随时会发生感染等严重并发症。（4）因为解冻后的脐带血含有游离血红蛋白和冷冻保护剂，直接输注有可能会引起患者出现不良反应，需要进行输注前的预防治疗和输注后的对症治疗。因此，如何最大限度的延长解冻后脐带血的储存时间，是一个急需解决的问题。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术的目的是提供一种脐带血造血干细胞解冻后清洗装置及基于其的解冻清洗与保存方法，利用该装置对解冻后的脐带血进行清洗和后续临床输注，不仅便于日常操作，且解冻后的脐带血造血干细胞可在4℃放置至少72小时，可满足长途运输的需要。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：一种脐带血造血干细胞解冻后清洗装置，包括用于储存解冻后脐带血造血干细胞的输液袋和用于存放废液的转移袋，所述输液袋上部分别设置加样口和输液插口，通过加样口连接一Y型管路，Y型管路另两端分别连接穿刺头和鲁尔接口，Y型管路的三段上分别设置第一管路夹子、第三管路夹子和第四管路夹子，所述输液袋和转移袋之间通过导管连接，所述导管上设置第二管路夹子。一种基于上述装置的脐带血造血干细胞解冻清洗与保存方法，包括以下步骤：步骤1，脐带血冷冻复苏：将脐带血冷冻袋从液氮气相中取出，放入37℃水浴中轻柔揉捏，待冷冻袋中仅余少量冰渣时，从水浴中取出，消毒外表面后放入生物安全柜中；步骤2，加入解冻稀释液：关闭第二管路夹子和第四管路夹子，保持第一管路夹子和第三管路夹子打开，将穿刺头插入脐带血冷冻袋输液插口，使冷冻袋中脐带血导入输液袋。关闭第一管路夹子，打开第四管路夹子，用注射器抽取和脐带血等体积的解冻稀释液通过装置中的鲁尔接口缓慢加入输液袋中，边加边混匀。关闭第三管路夹子，打开第一管路夹子，用注射器再次抽取和脐带血等体积的解冻稀释液通过鲁尔接口加入脐带血冷冻袋中，清洗冷冻袋中的残留脐带血。关闭第四管路夹子，打开第三管路夹子，将冷冻袋中液体导入输液袋中，边导边混匀。关闭第一管路夹子，打开第四管路夹子，用注射器抽取2~3倍脐带血体积的解冻稀释液，通过鲁尔接口加入输液袋中，边加边混匀输液袋。关闭第三管路夹子，用热合机在第三管路夹子和加样口之间的管路部位进行热合，并去除第三管路夹子及其以上部分；步骤3，离心：将输液袋和转移袋一起垂直放入血袋离心机中，离心处理，将离心处理后的输液袋小心放置于分浆夹中，打开第二管路夹子，使输液袋中的上清缓慢流入转移袋中，保留1/6~1/5的上清；关闭第二管路夹子，热合输液袋和转移袋间的导管，去除转移袋；步骤4，加入细胞保存液：用注射器抽取和脐带血等体积的细胞保存液，通过加样口加入输液袋中，充分混匀，即完成脐带血造血干细胞的解冻。进一步的，步骤2所述的解冻稀释液中含人血白蛋白和左旋糖苷40，两者的质量分数分别为2.5%和5%。进一步的，步骤3中所述离心处理的具体条件为：300×G，10℃，离心10分钟。进一步的，步骤4中所述细胞保存液为含质量分数2.5%人血白蛋白的复方电解质注射液本专利技术相比现有技术的有益效果为：1、本专利技术所述脐带血造血干细胞解冻后清洗装置，专为解冻后的脐带血清洗和后续临床输注而设计，结构简单、便于日常操作；2、本专利技术所述的脐带血造血干细胞解冻清洗与保存方法，使用的解冻稀释液中人血白蛋白和低分子右旋糖酐，协同发挥稳定渗透压和细胞形态的作用，可有效保持细胞的完整性和活性；3、本专利技术所述的脐带血造血干细胞解冻清洗与保存方法，选用300×G的离心力可以保证脐带血细胞的充分沉淀和回收，同时又可有效避免离心对细胞的损伤；4、本专利技术所述的脐带血造血干细胞解冻清洗与保存方法，对解冻后的脐带血进行清洗，有效去除了脐带血中大部分的DMSO和游离血红蛋白，显著减少细胞碎片，从而有效减少输注不良反应的发生；5、本专利技术所述的脐带血造血干细胞解冻清洗与保存方法，采用含2.5%人血白蛋白的复方电解质注射液作为解冻后脐带血造血干细胞的保存液，一是人血白蛋白可维持胶体渗透压，对细胞起到保护和营养的作用，同时电解质注射液则为细胞生长提供合适的晶体渗透压和酸碱度环境，并为细胞代谢提供必要的电解质成分；另一方面使用保存液的解冻后脐带血造血干细胞可在4℃放置至少72小时，依然保持良好的活性和增殖能力，可基本满足长途运输的需要。附图说明图1为本专利技术实施例1所述脐带血造血干细胞解冻装置的结构示意图；图2为有核细胞活性变化情况示意图（n=3）；图3为CD34+细胞活性变化情况示意图（n=3）；图4为活CD34+细胞回收率变化情况示意图（n=3）。具体实施方式实施例1如图1所示，本实施例提供了一种脐带血造血干细胞解冻后清洗装置，包括用于储存解冻后脐带血造血干细胞的输液袋1和用于存放废液的转移袋2，所述输液袋1上部分别设置加样口101和输液插口102，通过加样口连接一Y型管路3，Y型管路另两端分别连接穿刺头301和鲁尔接口302，Y型管路的三段上分别设置第一管路夹子303、第三管路夹子304和第四管路夹子305，所述输液袋和转移袋之间通过导管4连接，所述导管上设置第二管路夹子401。利用上述装置的脐带血造血干细胞解冻清洗与保存方法，包括以下步骤：步骤1，脐带血解冻复苏：将脐带血本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种脐带血造血干细胞解冻后清洗装置，其特征在于，包括用于储存解冻后脐带血造血干细胞的输液袋（1）和用于存放废液的转移袋（2），所述输液袋（1）上部分别设置加样口（101）和输液插口（102），通过加样口连接一Y型管路（3），Y型管路另两端分别连接穿刺头（301）和鲁尔接口（302），Y型管路的三段上分别设置第一管路夹子（303）、第三管路夹子（304）和第四管路夹子（305），所述输液袋和转移袋之间通过导管（4）连接，所述导管上设置第二管路夹子（401）。/n
【技术特征摘要】
1.一种脐带血造血干细胞解冻后清洗装置，其特征在于，包括用于储存解冻后脐带血造血干细胞的输液袋（1）和用于存放废液的转移袋（2），所述输液袋（1）上部分别设置加样口（101）和输液插口（102），通过加样口连接一Y型管路（3），Y型管路另两端分别连接穿刺头（301）和鲁尔接口（302），Y型管路的三段上分别设置第一管路夹子（303）、第三管路夹子（304）和第四管路夹子（305），所述输液袋和转移袋之间通过导管（4）连接，所述导管上设置第二管路夹子（401）。
2.一种基于权利要求1所述装置的脐带血造血干细胞解冻清洗与保存方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
步骤1，脐带血冷冻复苏：将脐带血冷冻袋从液氮气相中取出，放入37℃水浴中轻柔揉捏，待冷冻袋中仅余少量冰渣时，从水浴中取出，消毒外表面后放入生物安全柜中；
步骤2，加入解冻稀释液：关闭第二管路夹子（401）和第四管路夹子（305），保持第一管路夹子（303）和第三管路夹子（304）打开，将穿刺头（301）插入脐带血冷冻袋输液插口，使冷冻袋中脐带血导入输液袋（1）；关闭第一管路夹子（303），打开第四管路夹子（305），用注射器抽取和脐带血等体积的解冻稀释液通过装置中的鲁尔接口（302）缓慢加入输液袋（1）中，边加边混匀；关闭第三管路夹子（304），打开第一管路夹子（303），用注射器再次抽取和脐带血等体积的解冻稀释液通过鲁尔接口（302）加入脐带血冷冻袋中，清洗冷冻袋中的残留脐带血；关闭第四管路夹子（305），打开第三管路夹子（304...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏晓飞，施蕾，
申请(专利权)人：北京佳宸弘生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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