一种囊泡数量的检测方法技术

本发明专利技术提供一种测量囊泡数量的方法，分别测量标准载药囊泡样品的囊泡数量以及其紫外吸光度，绘制载药囊泡的囊泡数量对应吸光度的标准线性曲线。通过测量待测囊泡样品的吸光度，经过标准曲线计算即可得出囊泡的数量。该方法操作简单，重现性好，快速同时成本较低，适宜于大规模工业生产的应用。

【技术实现步骤摘要】
一种囊泡数量的检测方法
本专利技术涉及一种囊泡数量的检测方法，尤其涉及一种包裹肿瘤化疗药物的来自凋亡细胞的载药囊泡的数量检测方法。
技术介绍
细胞外囊泡(ExtracellularVesiclesEVs)是指从细胞膜上脱落或者由细胞分泌的双层膜结构的囊泡状小体，直径从40nm到1000nm不等。胞外囊泡主要由微囊泡(Microvesicles,MVs)和外泌体(Exosomes,Exos)组成，微囊泡是细胞激活、损伤或凋亡后从细胞膜脱落的小囊泡，直径约为100-1000nm；外泌体由细胞内的多泡小体(multivesicularbodies)与细胞膜融合后以外分泌的形式释放到细胞外，直径约为40-100nm。本专利技术涉及的囊泡直径范围主要分布在100-300nm。囊泡广泛存在于细胞培养上清以及各种体液(血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁)中，携带有细胞来源相关的多种蛋白质、脂类、DNA、mRNA、miRNA等，参与细胞间通讯、细胞迁移、血管新生和免疫调节等过程。在糖尿病、心血管疾病、艾滋病、慢性炎症疾病以及癌症中都发现细胞外囊泡水平的升高，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞囊泡数量的检测方法，包括如下步骤：将包裹有药物的载药囊泡浓悬液进行梯度稀释，对稀释后的囊泡进行计数，同时用酶标仪或紫外分光光度计检测吸光度；以囊泡的计数为纵坐标，对应囊泡的吸光度为横坐标建立线性标准曲线；待检测载药囊泡经测量吸光度，根据所述标准曲线计算得出囊泡数量，囊泡数量检测的线性范围为0.01～4.0×10

【技术特征摘要】
1.一种细胞囊泡数量的检测方法，包括如下步骤：将包裹有药物的载药囊泡浓悬液进行梯度稀释，对稀释后的囊泡进行计数，同时用酶标仪或紫外分光光度计检测吸光度；以囊泡的计数为纵坐标，对应囊泡的吸光度为横坐标建立线性标准曲线；待检测载药囊泡经测量吸光度，根据所述标准曲线计算得出囊泡数量，囊泡数量检测的线性范围为0.01～4.0×1010/ml。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述载药囊泡包裹的药物为肿瘤化疗药物，选自甲氨蝶呤，阿霉素，顺铂，紫杉醇，5-氟尿嘧啶，吉西他滨或10-羟基喜树碱。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述载药囊泡包裹的药物为甲氨蝶呤。


4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈彬，张一，许平伟，
申请(专利权)人：湖北盛齐安生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42