用于hUTC生长的营养富集培养基制造技术

本发明专利技术提供使锚着依赖性细胞(例如hUTC)在培养基中生长的方法，所述培养基包含氨基酸、维生素、盐、核苷、胰岛素、转铁蛋白、乙醇胺和亚硒酸钠，其中所述培养基补充有血清。所述方法还包括添加无血清营养液，所述无血清营养液包含氨基酸、维生素、盐、核苷、胰岛素、转铁蛋白、乙醇胺和亚硒酸钠。本发明专利技术还提供用于使锚着依赖性细胞生长的培养基和无血清营养液。

【技术实现步骤摘要】
用于hUTC生长的营养富集培养基本申请是申请日为2013年12月12日，中国国家申请号为201380072759.4，专利技术名称为“用于hUTC生长的营养富集培养基”的专利技术申请的分案申请。
本申请涉及用于锚着依赖性细胞诸如脐带组织衍生细胞的生长的营养富集培养基。
技术介绍
对于同种异体细胞疗法产品而言，细胞或组织是从供体获得的，故该细胞或组织在施用给患者之前需被进一步操作。通常，非均质细胞疗法产品的制造工艺包括下列步骤：使细胞库瓶解冻并使细胞扩增以接种制备容器；在制备容器中制备细胞；移除在细胞制备期间使用的非期望杂质，诸如血清和胰蛋白酶；浓集细胞；将细胞配制到最终配制缓冲液中；以及冷冻细胞。这种制造工艺可能十分复杂且昂贵。例如，一般在补充有血清的生长培养基中培养并扩增用于细胞疗法应用的细胞。由于血清、培养基和该工艺中使用的其他消耗品的高成本，故细胞疗法的生产成本可能非常高。多种因素可限制细胞生长到高细胞密度，包括营养限制、培养物中细胞副产物累积、物理环境等。因此，希望通过使细胞生长到高细胞密度来增加从制备容器制备的容积细胞。...

【技术保护点】
1.一种用于使锚着依赖性细胞生长的培养基，所述培养基包含：/n氨基酸：L-精氨酸、L-胱氨酸、L-半胱氨酸、L-谷氨酰胺、甘氨酸、L-组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸、L-丙氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-脯氨酸和L-牛磺酸；/n维生素：D-泛酸钙、氯化胆碱、叶酸、I-肌醇、烟酰胺、吡哆醛、核黄素、硫胺素、d-生物素、吡哆素和维生素B

【技术特征摘要】
20121214 US 13/7155321.一种用于使锚着依赖性细胞生长的培养基，所述培养基包含：
氨基酸：L-精氨酸、L-胱氨酸、L-半胱氨酸、L-谷氨酰胺、甘氨酸、L-组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸、L-丙氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-脯氨酸和L-牛磺酸；
维生素：D-泛酸钙、氯化胆碱、叶酸、I-肌醇、烟酰胺、吡哆醛、核黄素、硫胺素、d-生物素、吡哆素和维生素B12(氰钴胺)；
盐：氯化钙、氯化钾、硫酸镁、氯化钠和一种或多种磷酸钠盐；
核苷：胸苷、腺苷、胞苷、尿苷和鸟苷；
胰岛素；转铁蛋白；类脂酸/硫辛酸；乙醇胺；亚硒酸钠；和一种或多种能量底物。


2.根据权利要求1所述的培养基，其中所述培养基包含以下的一种或多种：
各0.0006g/L至0.1g/L的氨基酸；
各5×10-6g/L至0.015g/L的维生素；和
各至少0.0001g/L至至少0.02g/L的核苷。


3.根据权利要求1所述的培养基，其中所述培养基还包含一种或多种另外的痕量矿物质。


4.根据权利要求3所述的培养基，其中所述培养基包含各5x10-8g/L至3x10-4g/L的痕量矿物质。


5.根据权利要求3所述的培养基，其中所述痕量矿物质是硝酸铁、硫酸铜和硫酸锌。


6.根据权利要求5所述的培养基，其中所述培养基包含硝酸铁(9H2O)、硫酸铜(II)五水合物(CuSO4.5H2O)和硫酸锌七水合物(ZnSO4.7H2O)。


7.根据权利要求1所述的培养基，其中所述培养基还包含腐胺、稳定剂和/或消泡剂。


8.根据权利要求1所述的培养基，其中所述培养基包含：
至少0.05g/L的L-精氨酸、至少0.02g/L的L-胱氨酸、至少0.2g/L的L-谷氨酰胺、至少0.01g/L的甘氨酸、至少0.02g/L的L-组氨酸、至少0.09g/L的L-异亮氨酸、至少0.09g/L的L-亮氨酸、至少0.09g/L的L-赖氨酸、至少0.02g/L的L-甲硫氨酸、至少0.05g/L的L-苯丙氨酸、至少0.03g/L的L-丝氨酸、至少0.08g/L的L-苏氨酸、至少0.009g/L的L-色氨酸、至少0.08g/L的L-酪氨酸、至少0.08g/L的L-缬氨酸、至少0.005g/L的L-半胱氨酸、至少0.0004g/L的L-丙氨酸、至少0.01g/L的L-天冬酰胺、至少0.006g/L的L-天冬氨酸、至少0.03g/L的L-谷氨酸、至少0.005g/L的L-脯氨酸和至少0.0003g/L的L-牛磺酸；
各5×10-6g/L至0.015g/L的维生素；
至少0.05g/L的无水氯化钙、至少0.1g/L的氯化钾、至少0.2g/L的硫酸镁、至少0.08g/L的磷酸二氢钠一水合物和至少0.0005g/L的磷酸氢二钠七水合物(Na2HPO4.7H2O)；
至少0.0001g/L的胸苷以及各至少0.005g/L的腺苷、胞苷、尿苷和鸟苷；以及
至少0.003g/L的胰岛素；至少0.05g/L的转铁蛋白；至少5×10-6g/L的类脂酸/硫辛酸；...

【专利技术属性】
技术研发人员：R布哈蒂亚，LSK康，SS奥兹图克，VH卡马拉祖，
申请(专利权)人：德普伊新特斯产品公司，
类型：发明
国别省市：美国;US