一种纳米酶标记直接竞争仿生免疫分析检测组胺的方法技术

本发明专利技术公开了一种纳米酶标记直接竞争仿生免疫分析检测组胺的方法，具体涉及纳米材料、生物催化及分析化学技术领域。本发明专利技术以铂纳米材料代替天然酶作为标记物，采用分子印迹技术与纳米酶相结合实现对组胺的高灵敏检测。本发明专利技术操作简单，方法稳定，选择性高，对其他生物胺类(酪胺、色胺)无明显响应，适用于食品中组胺的快速检测。

【技术实现步骤摘要】
一种纳米酶标记直接竞争仿生免疫分析检测组胺的方法
本专利技术涉及组胺的检测方法，特别是涉及一种纳米酶标记直接竞争仿生免疫分析检测组胺的方法，属于食品安全检测

技术介绍
组胺(Histamine，HA)又名组织胺，它是在微生物和组氨酸脱羧酶共同作用下，由蛋白质降解产生的组氨酸发生脱羧作用而产生的，广泛存在于各种食品及生物体中，尤其是发酵食品(如：大豆发酵制品、酸奶、啤酒等)中。人食用含有高水平组织胺的食物后可能会导致类似过敏的食物中毒。组胺过敏不仅会导致局部或全身毛细管扩张，使毛细管壁的通透性增加，从而诱发高血压。还会引发支气管收缩，使人体产生胸闷。过敏症状表现为头痛、恶心、呼吸紊乱等，严重时甚至危及生命。过量的组胺给人体健康构成了潜在威胁，对我国产品出口也带来了挑战。目前，针对组胺含量的检测方法主要包括：高效液相色谱法、荧光分光光度法与质谱联用等。这些方法既繁琐又耗时，所用的检测设备价格昂贵，不适用于现场快速检测需求。酶联免疫分析法是一种广泛用于检测组胺的方法，但由于传统生物抗体制备困难、成本高，使得其应用受到了限制。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种纳米酶标记直接竞争仿生免疫分析检测组胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)采用Pt@SiO

【技术特征摘要】
1.一种纳米酶标记直接竞争仿生免疫分析检测组胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)采用Pt@SiO2纳米材料标记抗原，以PAF-45为支持载体的分子印迹聚合物作为仿生抗体，将Pt@SiO2纳米材料标记抗原、仿生抗体和系列浓度梯度的组胺标样溶液混合，室温竞争反应30-50min，取上清液，加入TMB底物溶液进行显色反应，用酶标仪在450nm波长下读取紫外吸收值，计算抑制率；以组胺标样溶液浓度对数值为横坐标，抑制率为纵坐标，绘制标准曲线；
(2)利用步骤(1)绘制的工作曲线对经前处理的待测物中的组胺含量进行检测。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述Pt@SiO2纳米材料标记抗原具体如下：
将Pt@SiO2材料和戊二醛混合0.5～1h；加入组胺溶液，继续反应3～5h，反应结束后，离心分离，洗涤，得到Pt@SiO2纳米材料标记抗原。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述以PAF-45为支持载体的分子印迹聚合物由如下方法制备而成：
将模板分子组胺二盐酸盐溶于二甲基亚砜中，加入甲基丙烯酸，进行预聚合反应，再加入PAF-45材料、二甲基丙烯酸乙二醇...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐志祥，王效锋，王莹，张利，
申请(专利权)人：山东农业大学，
类型：发明
国别省市：山东;37