双硫仑在制备治疗系统性红斑狼疮药物中的应用技术方案

本发明专利技术公开了双硫仑在制备治疗系统性红斑狼疮药物中的应用，所述的系统性红斑狼疮，是以姥鲛烷诱导的狼疮小鼠模型为实验对象。本发明专利技术中，双硫仑能够有效改善狼疮小鼠病情，具体表现如下：(1)双硫仑处理后狼疮小鼠尿蛋白水平明显下降；(2)双硫仑能够降低狼疮小鼠外周血抗dsDNA及炎症因子IL‑1β水平；(3)用了双硫仑进行干预后，狼疮小鼠肾脏病理损害明显减轻以及免疫复合物IgG、C3沉积也同样减少。

【技术实现步骤摘要】
双硫仑在制备治疗系统性红斑狼疮药物中的应用
本专利技术属于药物领域，具体涉及双硫仑在制备治疗系统性红斑狼疮药物中的应用。
技术介绍
系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus,SLE)是一种累积于全身多器官的自身免疫性疾病，典型特征是机体出现大量针对自身胞内外成分的抗体，并形成抗原-抗体复合物。SLE主要累及育龄期女性，病情复杂，发病率高，该病病程反复迁延，致残率高。但是，目前SLE治疗措施仍是以糖皮质激素和细胞毒药物为主。但是，这种临床治疗手段存在着机会性感染、骨折、性腺抑制等副作用，且花费较高，需长期甚至终身服用。因此，进一步寻找一种疗效佳、更安全的治疗SLE的药物至关重要。双硫仑(又名戒酒硫、安塔布司)，结构式如下：分子式为：C10H20N2S4，分子量为297。该药物能够用于治疗酒精成瘾，主要是通过抑制乙醛脱氢酶，使乙醇在体内氧化成乙醛后不能继续氧化，从而引起体内乙醛蓄积，产生一系列不适反应，如恶心、胸闷、焦虑、心率加快及呼吸急促等，从而达到戒酒的目的。近年对双硫仑的研究发现它还能用于多种肿瘤及HIV的治疗。但迄今，尚未见有双硫仑在治疗SLE的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供双硫仑在制备治疗系统性红斑狼疮药物中的应用，以解决现有系统性红斑狼疮治疗手段副作用大、价格昂贵的问题。本专利技术的目的通过下述技术方案实现：双硫仑在制备治疗系统性红斑狼疮药物中的应用；所述的系统性红斑狼疮，是以姥鲛烷诱导的狼疮小鼠模型为实验对象；所述治疗系统性红斑狼疮，具体体现在：降低了狼疮小鼠尿蛋白、外周血抗dsDNA抗体、炎症因子IL-1β、免疫复合物IgG和C3等的含量，以及减轻了狼疮小鼠肾脏病理损害；所述的药物还可以含有一种以上药学上可以接受的载体；所述的载体优选为缓释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、吸附载体、表面活性剂或润滑剂等；所述的药物可以进一步制成注射剂、片剂、粒剂或胶囊等多种形式，各种剂型的药物可以按照药学领域的常规方法制备。本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：1、本专利技术中，双硫仑能够有效改善狼疮小鼠病情，具体表现如下：(1)双硫仑处理后狼疮小鼠尿蛋白水平明显下降；(2)双硫仑能够降低狼疮小鼠外周血抗dsDNA及炎症因子IL-1β水平；(3)用了双硫仑进行干预后，狼疮小鼠肾脏病理损害明显减轻以及免疫复合物IgG、C3沉积也同样减少。2、本专利技术提供了一种安全、价廉、有效的治疗系统性红斑狼疮药物双硫仑，以解决现有系统性红斑狼疮治疗手段副作用大、价格昂贵的问题。3、双硫仑是一种传统的戒酒药物，具有价格便宜、容易获得、安全的特点，近年在治疗多种肿瘤和HIV上取得了巨大成效，本专利技术进一步拓宽了双硫仑的用途，够用于制备治疗狼疮的药物。附图说明图1是双硫仑对pristane狼疮小鼠尿蛋白水平的影响；图2是双硫仑对pristane狼疮小鼠抗dsDNA抗体水平的影响；图3是双硫仑对pristane狼疮小鼠肾脏形态的影响；图4是双硫仑对pristane狼疮小鼠肾脏C3沉积量的影响；图5是双硫仑对pristane狼疮小鼠肾脏IgG沉积量的影响；图6是双硫仑对pristane诱导狼疮小鼠血浆IL-1β水平的影响；其中，Control:n＝7,PILModel:n＝7,PILModel+disulfiram:n＝7；*P＜0.05,**P＜0.01,***P＜0.001。具体实施方式下面结合实施例及附图对本专利技术作进一步详细的描述，但本专利技术的实施方式不限于此。实施例实验动物选用6-8周龄、雌性的BALB/c小鼠，购买自广东省实验动物中心。所有动物都饲养在南方医科大学实验动物中心特定非致病的条件下饲养。所有实验操作和饲养的方式都经过南方医科大学的实验动物伦理审查委员会审核通过。方法：(1)Pristane诱导狼疮小鼠模型建立选用6-8周、雌性的BALB/c小鼠，一次性腹腔注射pristane(姥鲛烷)500μl进行造模，在注射后第6周开始，每两周检测尿蛋白水平，直到连续两次出现尿蛋白的评分大于1个+时，判断小鼠已经发病，造模成功，尿蛋白评分详见方法(3)。(2)小鼠分组及给药BALB/c小鼠造模成功后，根据小鼠尿蛋白水平随机分成2组，使每组小鼠的尿蛋白水平分布和均值基本相同：第一组为双硫仑药物治疗组(PILModel+双硫仑组)7只，每日予戒双硫仑腹腔注射，剂量为每公斤体重50mg，另外一组为溶剂组(PILModel+生理盐水组)7只，每天给予双硫仑药物治疗组等体积的生理盐水进行腹腔注射。并且，另外选择7只具有相仿周龄和体重的雌性BALB/c小鼠为正常对照组(Control组)。观察14周，每2周测一次各组小鼠尿蛋白。(3)小鼠尿蛋白测定采用Albustix试纸法对尿蛋白进行定性和半定量检测。A、用手指轻轻地按摩鼠的腹部，起到刺激小鼠排尿的作用；B、收集小鼠尿液，将排出的尿液滴在试纸反应区上；C、1min内读取试纸结果，将试纸反应区显示的颜色和标准显色卡条带进行比较，判断小鼠尿蛋白含量。含量对照如下：①阴性(－)：0mg/L②(±)：150mg/L～300mg/L③(+)：300mg/L～1000mg/L④(++)：1000mg/L～3000mg/L⑤(+++)：3000mg/L～20000mg/L⑥(++++)：>20000mg/L。(4)小鼠标本留取4.1麻醉取血A、狼疮小鼠观察结束后，用1％戊巴比妥麻醉；B、摘除小鼠眼球取血，将血收集到含EDTA抗凝的采血管中，并让血液尽可能与管壁上的EDTA接触；C、将采血管放入离心机中，调整转速为500g，时间10分钟进行离心；D、收集上清后，将上清进行离心，转速为1500g，时间为10分钟；E、离心后收集上层的血浆，-80℃储存。4.2分离肾脏A、留取小鼠左肾，放置在4％多聚甲醛中固定，用于石蜡切片；B、留取小鼠右肾，放置在液氮罐中，用于冰冻切片和WB使用。4.3小鼠血浆抗dsDNA抗体检测A、提前将抗ds-DNA抗体试剂盒和各组小鼠的血浆样品取出，恢复至室温；B、配制标准品①准备7个2ml的EP管，分别标记为S2-S8，然后在每个管子先加入样品稀释液250μl；②将1支标准品取出，6000r离心，时间30秒；在标准品中加入样品稀释液1ml，充分吹打混匀，得到浓度为20ng/ml，记为S1；③取出S1管子中液体250ul加入到S2管子中，充分混匀，得到浓度为10ng/ml；④取出S2管子中液体250ul加入到S3管子中，充分混匀，得到浓度为5ng/ml；⑤取出S3管子中液体250ul加入到S4管子中，充本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.双硫仑在制备治疗系统性红斑狼疮药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.双硫仑在制备治疗系统性红斑狼疮药物中的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的系统性红斑狼疮，是以姥鲛烷诱导的狼疮小鼠模型为实验对象。


3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述治疗系统性红斑狼疮，是降低了狼疮小鼠尿蛋白、外周血抗dsDNA抗体、炎症因子IL-1β、免疫复合物IgG和C3的含量，以及减轻了狼疮小鼠肾脏病理...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙尔维，庄丽丽，何懿，罗晓青，庄坚，吴舒帆，李业豪，杨方圆，张亚楠，翟泽清，梁建亨，
申请(专利权)人：南方医科大学第三附属医院广东省骨科研究院，
类型：发明
国别省市：广东;44