MGO和GO快速定量联合检测装置及其制备方法制造方法及图纸

本发明专利技术涉及一种MGO和GO快速定量联合检测装置及其制备方法，属于医疗检测领域。由固相有甲基乙二醛、乙二醛‑载体蛋白和羊抗鼠IgG多克隆抗体的硝酸纤维素膜、吸附有荧光微球标记甲基乙二醛、乙二醛抗体的玻璃纤维、样品垫、吸水纸等其它辅料粘贴制成。采用聚乙二醇丙三醇处理液对硝酸纤维素膜进行预处理，将载体蛋白‑甲基乙二醛、乙二醛先与油酸修饰的硫化锌纳米颗粒结合再吸附到硝酸纤维素膜上，并配制合适的缓冲液和样品垫处理液，在保证免疫荧光微球释放完全的基础上，有效的提高了反应的灵敏度，同样的阈值下，还可降低免疫荧光微球的用量，检测试纸灵敏度高、特异性强、操作简便省时、实用性强。

【技术实现步骤摘要】
MGO和GO快速定量联合检测装置及其制备方法
本专利技术涉及医疗检测设备领域，特别涉及甲基乙二醛(MGO)、乙二醛(GO)快速定量联合检测装置及其制备方法，利用荧光免疫层析技术以及竞争法原理定量检测全血、血清、血浆和相关液体标本中甲基乙二醛(MGO)、乙二醛(GO)含量的检测装置及其制备方法，可实现甲基乙二醛(MGO)、乙二醛(GO)的快速检测，且灵敏度高、特异性强。
技术介绍
我国高血糖发生率逐年升高，糖尿病患者群体逐年扩大；糖尿病并发症，比如糖尿病心血管病、糖尿病足、糖尿病肾病、糖尿病眼病等，给人类造成了极大损伤和经济负担；如何在这些并发症来临之前我们就可以及早发现，已经成为医学界关注的热点和研究的热点；本专利技术涉及的产品就是针对糖尿病引发的心血管疾病进行早期预警和诊断的临床诊断工具。甲基乙二醛(MGO)、乙二醛(GO)是一种活性的二羰基化合物，作为糖尿病心血管疾病(CVD)非常关键的标志物。糖尿病领域权威杂志DiabetesCare上发表了一篇研究文章，该研究纳入了1003名来自于第二表现为动脉疾病队列(SMART)的2型糖尿病本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种MGO和GO快速定量联合检测装置，其特征在于：样品垫(1)、免疫荧光玻璃纤维膜(2)、免疫硝酸纤维素膜(3)、吸收垫(4)分别粘贴在塑料板(5)，所述免疫硝酸纤维素膜(3)的两端分别与吸收垫(4)、免疫荧光玻璃纤维膜(2)搭接，所述免疫荧光玻璃纤维膜(2)的另一端与样品垫(1)搭接；所述免疫硝酸纤维素膜(3)上设置第一检测线(T1)、第二检测线(T2)和质控线(C)；所述的第一检测线(T1)和第二检测线(T2)上分别固相有甲基乙二醛(MGO)-载体蛋白、乙二醛(GO)-载体蛋白；所述免疫硝酸纤维素膜(3)上设置的检测线T1、T2可以纵向排列在同一条免疫硝酸纤维素膜(3)上，形成一个联合...

【技术特征摘要】
1.一种MGO和GO快速定量联合检测装置，其特征在于：样品垫(1)、免疫荧光玻璃纤维膜(2)、免疫硝酸纤维素膜(3)、吸收垫(4)分别粘贴在塑料板(5)，所述免疫硝酸纤维素膜(3)的两端分别与吸收垫(4)、免疫荧光玻璃纤维膜(2)搭接，所述免疫荧光玻璃纤维膜(2)的另一端与样品垫(1)搭接；所述免疫硝酸纤维素膜(3)上设置第一检测线(T1)、第二检测线(T2)和质控线(C)；所述的第一检测线(T1)和第二检测线(T2)上分别固相有甲基乙二醛(MGO)-载体蛋白、乙二醛(GO)-载体蛋白；所述免疫硝酸纤维素膜(3)上设置的检测线T1、T2可以纵向排列在同一条免疫硝酸纤维素膜(3)上，形成一个联合检测装置；所述免疫硝酸纤维素膜(3)上设置的检测线T1、T2也可以分别设置在两条免疫硝酸纤维素膜(3)上，并列排列形成一个联合检测装置；所述的质控线(C)上喷点羊抗兔IgG多克隆抗体。


2.根据权利要求1所述的MGO和GO快速定量联合检测装置，其特征在于：所述的第一检测线(T1)、第二检测线(T2)上分别固相有甲基乙二醛(MGO)、乙二醛(GO)-载体蛋白，结合甲基乙二醛(MGO)、乙二醛(GO)-载体蛋白是指：卵清蛋白(OVA)、或牛血清白蛋白(BSA)、或血蓝蛋白(KLH)。


3.如权利要求1或2所述的MGO和GO快速定量联合检测装置的制备方法，其特征在于：包括下列步骤：
(a)免疫荧光微球的制备，取100ul固含为1％的微球悬浮液，用超纯水稀释10倍,即1000ul，加入到EP管中。取40ul的N-羟基琥珀酰亚胺液(NHS)加入微球悬浮液中混匀，然后接着加入40ul的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐液(EDC)加入微球悬浮液液中混匀，常温下反应0.5小时，将反应后的悬浮液用超声波超声，使管壁上的微球重新悬浮在水溶液中，然后将微球悬浮液离心，离心条件10000r/min、20min，倒掉上清液，加入1ml超纯水，然后用超声波超声分散均匀；
(b)活化的微球交联抗体，取1ml活化后的免疫荧光微球悬浮液，超声分散均匀，然后边搅拌边滴加抗体，加入抗体后，大约反应30s-120s后，再到超声波上超声20-40秒，然后再反应1小时，加牛血清白蛋白BSA进行封闭1小时，将封闭好的微球进行离心，速度为10000r/min，15min，将免疫荧光微球缓冲液加入到离心后的微球中，使微球分散均匀，待用；
(c)采用缓冲液稀释步骤(b)的免疫荧光微球交联标记抗体获得免疫荧光抗体溶液，用免疫荧光抗体溶液喷涂于玻璃纤维垫，制得免疫荧光玻璃纤维膜；
(d)将硝酸纤维素膜用聚乙二醇丙三醇处理液预处理后，喷点与油酸修饰的硫化锌纳米颗粒结合的甲基乙二醛(MGO)-载体蛋白、乙二醛(GO)-载体蛋白作为检测线，喷点羊抗鼠IgG抗体作为质控线，制得免疫硝酸纤维素膜；
(e)将预处理的样品垫、步骤(c)制备的免疫荧光玻璃纤维膜、步骤(d)制备的免疫硝酸纤维素膜、吸水纸依次粘贴在胶板上，切裁制得检测试剂条，最后将检测试剂条装入塑料外壳。


4.根据权利要求3所述的MGO和GO快速定量联合检...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨小军，李欣，
申请(专利权)人：吉林省格瑞斯特生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22