一种基于金磁纳米酶免疫探针的侧向流免疫层析检测试纸及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种基于金磁纳米酶免疫探针的侧向流免疫层析检测试纸及其制备方法和应用，属于生物分析技术领域。制备方法包括：通过原位还原法制备Fe

【技术实现步骤摘要】
一种基于金磁纳米酶免疫探针的侧向流免疫层析检测试纸及其制备方法和应用
本专利技术属于生物分析
，涉及一种基于金磁纳米酶免疫探针的侧向流免疫层析检测试纸及其制备方法和应用。
技术介绍
侧向流免疫层析检测(Lateralflowimmunoassay，LFIA)试纸是一种理想的即时检测手段，具有检测时间短，操作简单，可实现现场检测，通用性强等优点被广泛用于医学诊断、食品毒性检测、化学污染检测、农业、识别药物滥用和监测动物健康等。然而，基于传统胶体金的侧向流免疫层析检测试纸检测灵敏度低，易出现假阳性，重复性差，只能提供定性或半定量检测结果，极大地限制了该检测方法在生物诊断领域的发展和推广。为了克服这一发展局限性，信号放大成为了研究热点。目前，常见的改进方法有采用荧光，化学发光或磁定量分析检测结果，但是，这些分析方法均需要特定的设备和专业人员来实施检测。此外，天然酶的催化活性容易受到使用环境的影响，限制了具体使用中的催化效果。
技术实现思路
为了克服上述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种基于金磁纳米酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于金磁纳米酶免疫探针的侧向流免疫层析检测试纸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)Fe

【技术特征摘要】
1.一种基于金磁纳米酶免疫探针的侧向流免疫层析检测试纸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)Fe3O4/Au复合纳米粒子的制备
将粒径为20～200nm的Fe3O4纳米粒子、柠檬酸钠、氯金酸溶液加入水中混合均匀，然后在100～120℃下反应，得到Fe3O4/Au复合纳米粒子；
2)金磁纳米酶免疫探针的制备
采用物理吸附法或化学法将Fe3O4/Au复合纳米粒子与靶标分子的第一个识别抗体结合，得到金磁纳米酶免疫探针；
3)基于金磁纳米酶免疫探针的侧向流免疫层析检测试纸的制备
将靶标分子的第二个识别位点均匀喷涂在侧向流免疫层析检测试纸的硝酸纤维素膜的检测线上，将多克隆抗体二抗均匀喷涂在侧向流免疫层析检测试纸的硝酸纤维素膜的质控线上，将金磁纳米酶免疫探针喷涂在侧向流免疫层析检测试纸的结合垫上，得到基于金磁纳米酶免疫探针的侧向流免疫层析检测试纸。


2.根据权利要求1所述的基于金磁纳米酶免疫探针的侧向流免疫层析检测试纸的制备方法，其特征在于，步骤1)中，氯金酸溶液的浓度为24mmol/L；
Fe3O4纳米粒子、柠檬酸钠、氯金酸溶液和水的反应投料比为(100～150)mg：(0.1～0.5)g：(1～5)mL：(100～200)mL。


3.根据权利要求1所述的基于金磁纳米酶免疫探针的侧向流免疫层析检测试纸的制备方法，其特征在于，侧向流免疫层析检测试纸的制备过程具体包括：将样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜分别置于样品垫处理缓冲溶液、结合垫处理缓冲溶液和硝酸纤维素膜处理缓冲溶液中，浸泡后干燥，得到处理过的样品垫、处理过的结合垫和处理过的硝酸纤维素膜，然后将处理过的样品垫、处理过的结合垫、处理过的硝酸纤维素膜和吸水纸依次贴在支撑板上，并保证每两个部分之间有2mm宽的重叠部分，得到侧向流免疫层析检测试纸。


4.根据权利要求3所述的基于金磁纳米酶免疫探针的侧向流免疫层析检测试纸的制备方法，其特征在于，将质量比为2％的NaCl、0.05％的牛血清蛋白、0.1％的聚乙烯吡咯烷酮和体积比为0.05％的吐温-20溶于pH值为8.0～9.0、离子强度为0.005～20mol/L的硼酸钠缓冲液，制得样品垫处理缓冲溶液；
将质量比为1％的牛血清蛋白、0.05％的聚乙二...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨冬，王丽霞，王雪，雷蕾，高可奕，贾彤彤，
申请(专利权)人：陕西科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61