用于培养肺炎球菌样品的培养基制造技术

本发明专利技术的技术问题在于提供一种能够进一步提高肺炎球菌抗体样品评价试验中的绝对检测值和/或检测值与参考值之比的技术，或者提供一种能够评价针对多种肺炎球菌菌株的肺炎球菌抗体样品的技术。该技术问题是通过一种用于制备用于肺炎球菌抗体样品评价试验的肺炎球菌样品的培养基而实现的，该培养基包含固体培养基。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于培养肺炎球菌样品的培养基
本专利技术涉及一种用于培养肺炎球菌样品等的培养基。
技术介绍
现有的肺炎球菌疫苗是基于多糖的疫苗，在疫苗中作为存在于细菌表面上的荚膜的合成成分的多糖(荚膜多糖)是抗原。基于多糖的疫苗的例子包括小儿7价肺炎球菌结合疫苗、小儿10价肺炎球菌结合疫苗和小儿13价肺炎球菌结合疫苗(PCV7、PCV10、PCV13)；和23价多糖疫苗(PPSV23)。在肺炎球菌感染中，针对荚膜多糖的抗体的血清型特异性吞噬细胞杀菌能力是主要的感染保护机制。因此，现有的肺炎球菌疫苗已经作为含有人致病性血清型肺炎球菌荚膜抗原的疫苗投入实际使用。对儿童进行常规免疫已大大减少了由小儿疫苗中所含血清型菌株引起的侵袭性肺炎球菌疾病(IPD)。但是，随着疫苗的普及，出现了血清型替换，并且不能被疫苗覆盖的血清型的数量增加了。出于这个原因，需要开发一种新型的肺炎球菌疫苗，该疫苗含有所有肺炎球菌菌株中常见的蛋白作为抗原。肺炎球菌表面蛋白A(PspA)被认为是抑制补体C3在细菌表面沉积的致病因子，从而逃避机体免疫。PspA在所有肺炎球菌菌株中表达，并显示出针对不同家族的交叉反应性。因此，PspA被认为是新型肺炎球菌疫苗最有希望的常见抗原候选物。已知PspA的α-螺旋区和富含脯氨酸的区具有抗原表位，可被对肺炎球菌感染具有保护作用的抗体识别。根据其N端进化枝定义区的氨基酸序列，PspA大致分为三个家族，包括称为进化枝的六个亚群。关于PspA家族分布，家族1和家族2占肺炎球菌临床分离株的98％以上。人们认为，已知抗PspA特异性抗体对PspA的补体抑制活性产生拮抗作用，并激活补体C3沉积，从而诱导调理素活性，从而表现出对细菌感染的保护活性。开发一种与抗感染的保护活性高度相关的功效评价指标对于开发基于PspA的疫苗非常重要。据报道，现有的基于荚膜抗原的疫苗在ELISA(酶联免疫吸附测定)抗体效价和抗感染保护能力之间没有关联。目前，具有促进白细胞吞噬作用的功能(调理素活性)的抗体的量的测量是评价疫苗功效的替代标志。基于上述情况，希望开发一种可以测量PspA疫苗的功能性抗体以评估PspA疫苗的功效的测试系统。已知的疫苗测定方法无法用于评价使用含有PspA的蛋白作为抗原的疫苗，并且已有文献试图建立在某些菌株中评价疫苗的方法(非专利文献1和非专利文献2)。但是，没有关于使用所有临床分离株进行评价的报道。引文清单非专利文献NPL1：Vaccine29：1634-1642，2011。NPL2：ClinVaccineImmunol20：1549-1558，2013。
技术实现思路
技术问题本专利技术的目的是提供一种能够进一步提高肺炎球菌抗体样品评价试验中的绝对检测值和/或检测值与参考值之比的技术，和/或提供一种能够针对多种肺炎球菌菌株评价肺炎球菌抗体样品的技术。优选地，本专利技术的目的是提供一种能够进一步提高以肺炎球菌表面/胞浆内蛋白(例如PspA)为抗原的疫苗的评价试验的灵敏度的技术，和/或提供一种能够对多种肺炎球菌菌株评价肺炎球菌抗体样品的技术。解决技术问题的技术方案作为广泛研究的结果，本专利技术人发现，通过将通过在固体培养基中培养肺炎球菌而获得的肺炎球菌样品用作肺炎球菌抗体样品评价试验中的肺炎球菌样品，可以实现上述目的。基于该发现，专利技术人进行了进一步的研究，从而完成了本专利技术。具体地，本专利技术包括以下方面。1.一种用于制备用于肺炎球菌抗体样品评价试验的肺炎球菌样品的培养基，所述培养基包含固体培养基。2.根据第1项所述的培养基，其中，所述固体培养基包含琼脂。3.根据第1或2项所述的培养基，其中，所述固体培养基包含血液成分和/或过氧化氢酶。4.根据第1至3项中任一项所述的培养基，其中所述肺炎球菌抗体样品是从已经施用了肺炎球菌疫苗的个体采集的。5.根据第4项所述的培养基，其中，所述样品是血液样品。6.根据第4或5项所述的培养基，其中所述肺炎球菌疫苗包含选自肺炎球菌表面/胞浆内蛋白和肺炎球菌荚膜成分中的至少一种作为抗原。7.根据第4至6项中任一项所述的培养基，其中所述肺炎球菌疫苗包含肺炎球菌表面/胞浆内蛋白作为抗原。8.根据第1至7项中任一项所述的培养基，其中，所述评价试验评价选自肺炎球菌抗体样品与肺炎球菌样品的结合特性、基于所述结合的补体沉积能力和基于所述补体沉积的杀菌特性中的至少一种特性。9.根据第8项所述的培养基，其中，所述评价试验评价选自补体沉积能力和杀菌特性中的至少一种特性。10.根据第8或9项所述的培养基，其中，所述评价试验评价杀菌特性。11.一种用于制备根据第1至10项中任一项所述的培养基的组合物，所述组合物包含用于固化所述培养基的组分。12.一种用于制备根据第1至10项中任一项所述的培养基的试剂盒，所述试剂盒包含用于固化所述培养基的组分。13.一种生产用于肺炎球菌抗体样品评价试验的肺炎球菌样品的方法，所述方法包括在根据第1至10项中任一项所述的培养基中培养肺炎球菌以获得肺炎球菌样品的步骤。13A.固体培养基在生产用于制备用于肺炎球菌抗体样品评价试验的肺炎球菌样品的培养基中的用途。13B.固体培养基作为用于制备用于肺炎球菌抗体样品评价试验的肺炎球菌样品的培养基的用途。14.根据第13项所述的生产方法，其中，所述评价试验评价选自肺炎球菌抗体样品与肺炎球菌样品的结合特性、基于所述结合的补体沉积能力和基于所述补体沉积的杀菌特性中的至少一种特性。15.一种用于肺炎球菌抗体样品评价试验的肺炎球菌样品，所述样品是通过根据第13或14项所述的生产方法获得的。16.一种肺炎球菌抗体样品评价方法，其包括使根据第15项所述的肺炎球菌样品与肺炎球菌抗体样品接触的步骤。17.根据第16项所述的评价方法，其还包括评价选自肺炎球菌抗体样品与肺炎球菌样品的结合特性、基于所述结合的补体沉积能力和基于所述补体沉积的杀菌特性中的至少一种特性的步骤。专利技术的有益效果根据本专利技术，通过使用通过在固体培养基中培养肺炎球菌而获得的肺炎球菌样品作为用于肺炎球菌抗体样品评价试验的肺炎球菌样品，能够进一步提高肺炎球菌抗体样品评价试验中的绝对检测值和/或检测值与参考值之比，和/或能够针对多种肺炎球菌菌株评价肺炎球菌抗体样品。附图说明图1示出了兔PspA3+2免疫血清中针对PspA的进化枝1-进化枝5的抗PspAIgG抗体滴度(试验例1)。图2示出了通过使用兔抗PspA3+2免疫血清测量源自患有IPD的成年人的肺炎球菌菌株中的抗体结合和补体沉积所获得的结果(试验例2)。图3示出了通过使用兔PspA3+2免疫血清测量针对源自患有IPD的成年人的各种类型的菌株的补体沉积活性而获得的结果(试验例3)。图4示出了通过使用兔抗PspA3+2免疫血清测量针对源自患有IPD的成年人的肺炎球菌菌株的调理素活性所获得的结果(试验例4)。图5示出了兔抗PC本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于制备用于肺炎球菌抗体样品评价试验的肺炎球菌样品的培养基，所述培养基包含固体培养基。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180122 JP 2018-0079251.一种用于制备用于肺炎球菌抗体样品评价试验的肺炎球菌样品的培养基，所述培养基包含固体培养基。


2.根据权利要求1所述的培养基，其中，所述固体培养基包含琼脂。


3.根据权利要求1或2所述的培养基，其中，所述固体培养基包含血液成分和/或过氧化氢酶。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的培养基，其中所述肺炎球菌抗体样品是从已经施用了肺炎球菌疫苗的个体采集的。


5.根据权利要求4所述的培养基，其中，所述样品是血液样品。


6.根据权利要求4或5所述的培养基，其中所述肺炎球菌疫苗包含选自肺炎球菌表面/胞浆内蛋白和肺炎球菌荚膜成分中的至少一种作为抗原。


7.根据权利要求4至6中任一项所述的培养基，其中所述肺炎球菌疫苗包含肺炎球菌表面/胞浆内蛋白作为抗原。


8.根据权利要求1至7中任一项所述的培养基，其中，所述评价试验评价选自肺炎球菌抗体样品与肺炎球菌样品的结合特性、基于所述结合的补体沉积能力和基于所述补体沉积的杀菌特性中的至少一种特性。


9.根据权利要求8所述的培养基，其中，所述评价试验评价选自补体沉积能力和杀菌特性中的至少一种特性。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：朴贞玉，古泉由香，宫武浩，
申请(专利权)人：一般财团法人阪大微生物病研究会，
类型：发明
国别省市：日本;JP