一种首荟通便胶囊质量检测方法技术

本发明专利技术属于中药制剂分析领域，具体公开了一种首荟通便胶囊质量检测方法，包括以薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌；基于高效液相色谱技术，采用一标多测的分析方法，以2，3，5，4’‑四羟基二苯乙烯‑2‑O‑β‑D‑葡萄糖苷为内参物，测定首荟通便胶囊中2，3，5，4’‑四羟基二苯乙烯‑2‑O‑β‑D‑葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的含量。本发明专利技术质量检测方法操作简单方便、稳定可靠、专属性强、重现性好，能全面有效地控制首荟通便胶囊的质量，有利于稳定产品质量，确保临床用药安全、有效，从而更好地满足医疗和市场的需要。

【技术实现步骤摘要】
一种首荟通便胶囊质量检测方法
本专利技术涉及首荟通便胶囊的质量检测方法，属于中药制剂分析领域。
技术介绍
中国专利技术专利CN100453105C公开了一种首荟通便胶囊，由何首乌、芦荟、决明子、枸杞子、阿胶、人参、白术、枳实制成，具有处方、工艺、质量标准和用途等核心技术的自主知识产权，于2015年5月6日获得生产批件(国药准字Z20150041)和新药证书(国药证字Z20150005)，现已成功上市，商品名为首荟通便胶囊临床上主要用于功能性便秘的治疗，具有润肠通便、泻浊排毒、补血润燥、补气健脾的功效，尤其对毒邪内蕴、阴液亏虚所致的便秘具有良好的润肠通便治疗作用，可全面改善胃肠功能，疗效确切，起效快，无毒副反应，并具有排毒养颜、减肥降脂的功效，尤其适合老年人和体质虚弱者服用。中国专利CN106124685A公开了一种首荟通便胶囊现行质量检测方法，以薄层色谱法鉴别制剂中人参、枳实、芦荟、阿胶，同时采用HPLC测定制剂中何首乌的2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、枳实的柚皮苷含量。该方法应用HPLC法测定两类成分含量，使用不同浓度的甲醇溶液提取，并采用两种洗脱梯度在双波长下测定；中国专利CN109613166A公开了一种新的首荟通便胶囊质量检测方法，以薄层色谱法鉴别制剂中决明子、枸杞子和白术，同时采用HPLC法测定首荟通便胶囊中的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷和芦荟苷4种活性成分的含量。该方法由于操作繁琐，不能实现首荟通便胶囊多种活性成分含量的同时测定，并且未进行最佳供试品溶液制备条件进行筛选。中药化学成分数量众多，且各成分之间具有协同作用，在研究其有效性时，单一成分含量无法全面反映中药产品质量，多指标的质量评价模式更符合中药多成分、多功效的特点。现有的多指标含量测定要求种类繁多的对照品，但对照品的紧缺和检测费的高昂，制约了多指标质量评价模式的推广与应用，因此解决对照品的瓶颈问题成为实施中药多指标质量评价的关键。一测多评法是利用中药有效成分之间的内在函数和比例关系，通过测定一个成分(对照品易于得到)而实现多个成分(对照品难以得到或供应)的同步测定，是适合中药特点的多指标质量评价模式。
技术实现思路
针对现有首荟通便胶囊质量检测方法的不足，本专利技术要解决的技术问题是提供一种首荟通便胶囊质量检测新方法。在中国专利CN106124685A、中国专利CN109613166A首荟通便胶囊质量检测方法的基础上，增加了处方中原料药材何首乌的薄层鉴别，从而在结合现有技术的条件下可实现制剂中8味原料药材全覆盖定性鉴别，完善了首荟通便胶囊的薄层鉴别体系，达到全组分联合控制的目的；同时，对检测方法进行优化升级，建立适用于首荟通便胶囊质量评价的一标多测方法，可缓解对照品的紧缺和检测费的高昂的问题，节约了耗材，提高了检测效率，节省了人工成本。本专利技术一种首荟通便胶囊质量检测方法，该方法以薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌，采用一标多测的分析方法，以2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为内参物，以HPLC测定首荟通便胶囊中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的含量。所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌乌是以氯仿-甲醇混合溶液为第一次展开剂，以二氯甲烷-甲醇-乙酸-水混合溶液为第二次展开剂；优选地，按体积比计，氯仿：甲醇＝7：3；按体积比计，二氯甲烷：甲醇：乙酸：水＝15：2：0.5：0.1。所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌包括以下步骤：A、供试溶液的制备：取首荟通便胶囊内容物适量，加甲醇加热回流提取得提取液，离心，取上清液，用乙醚萃取，收集乙醚层，合并，蒸干，残渣加甲醇溶解，滤过，作为供试品溶液；B、对照品溶液制备：取何首乌对照药材，按步骤A所述方法制成对照药材溶液；另分别取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚、大黄素对照品，精密称定，加入甲醇溶解，制成对照品溶液；C、点样、展开：吸取上述5种溶液，分别点于同一硅胶H薄层板上，以氯仿-甲醇的混合溶液为展开剂，展至3cm，取出，晾干，再以二氯甲烷：甲醇：乙酸：水的混合溶液为展开剂，展至8cm，取出，晾干，置紫外光灯以365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。具体的，所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌包括以下步骤：A、供试溶液的制备：取首荟通便胶囊内容物适量，研细，第一次加50％甲醇30ml，加热回流提取30min，第二次加50％甲醇24ml，加热回流提取30min，合并两次得提取液，离心，取上清液，用60mL乙醚萃取3次，每次20mL，收集乙醚层，合并，蒸干，残渣加2mL甲醇溶解，作为供试品溶液；B、对照品溶液制备：取何首乌对照药材，按步骤A所述方法制成对照药材溶液；另分别取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚、大黄素对照品，精密称定，加入甲醇溶解，制成对照品溶液；C、点样、展开：吸取上述5种溶液各2-5μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以氯仿：甲醇＝7：3为展开剂，展至3cm，取出，晾干，再以二氯甲烷：甲醇：乙酸：水＝15：2：0.5：0.1为展开剂，展至8cm，取出，晾干，置紫外光灯以365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。所述一标多测法测定首荟通便胶囊中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的含量包括下列步骤：A、供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，研细，过筛，作为供试样品，备用；取样品粉末适量，按重量/体积计加入料液比为1：50-120倍量甲醇溶液，进行超声提取，提取时间为30-75min，放冷至室温，称重，用溶剂补足减失重量，摇匀，静置，吸取上清液，滤过，弃去初滤液，以续滤液作为供试品溶液；B、对照品溶液制备：制备2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的单一对照品溶液和7种成分的混合对照品溶液；C、相对保留时间的确定：吸取步骤B所述的7种单一对照品溶液和7种成分的混合对照品溶液，分别注入HPLC中进行检测，记录7种单一对照品溶液保留时间，同时记录7种成分的混合对照品溶液中各成分的保留时间，以2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为内参物，通过公式RRT＝Tk/Ts计算柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚相对于内参物2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的相对保留时间；公式中Ts为内参物保留时间，Tk为混合对照品溶液中其它6种待测成分的保留时间；D、相对校正因子的确定：吸取步骤B所述的混合对照品溶液，注入HPLC本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种首荟通便胶囊质量检测方法，其特征在于，以薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌，采用一标多测的分析方法，以2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为内参物，以HPLC测定首荟通便胶囊中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的含量。/n

【技术特征摘要】
1.一种首荟通便胶囊质量检测方法，其特征在于，以薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌，采用一标多测的分析方法，以2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为内参物，以HPLC测定首荟通便胶囊中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的含量。


2.如权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌是以氯仿-甲醇混合溶液为第一次展开剂，以二氯甲烷-甲醇-乙酸-水混合溶液为第二次展开剂；
优选的，按体积比计，氯仿：甲醇＝7：3；按体积比计，二氯甲烷：甲醇：乙酸：水＝15：2：0.5：0.1。


3.如权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述薄层色谱法鉴别首荟通便胶囊中何首乌包括以下步骤：
A、供试溶液的制备：取首荟通便胶囊内容物适量，加甲醇回流提取，得提取液，取上清液，用乙醚萃取，收集乙醚层，合并，蒸干，残渣加甲醇溶解，滤过，作为供试品溶液；
B、对照品溶液制备：取何首乌对照药材，按步骤A所述方法制成对照药材溶液；另分别取2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚、大黄素对照品，精密称定，加入甲醇溶解，制成对照品溶液；
C、点样、展开：吸取上述5种溶液各2-5μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以氯仿：甲醇＝7：3为展开剂，展至3cm，取出，晾干，再以二氯甲烷：甲醇：乙酸：水＝15：2：0.5：0.1为展开剂，展至8cm，取出，晾干，置紫外光灯以365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。


4.如权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述一标多测法测定首荟通便胶囊中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的含量包括下列步骤：
A、供试品溶液制备：取首荟通便胶囊内容物适量，研细，过筛，作为供试样品，备用；取样品粉末适量，按重量/体积计加入料液比为1：50-120倍量甲醇溶液，进行超声提取，提取时间为30-75min，放冷至室温，称重，用溶剂补足减失重量，摇匀，静置，吸取上清液，滤过，弃去初滤液，以续滤液作为供试品溶液；
B、对照品溶液制备：制备2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的单一对照品溶液和7种成分的混合对照品溶液；
C、相对保留时间的确定：吸取步骤B所述的7种单一对照品溶液和7种成分混合对照品溶液，分别注入HPLC中进行检测，记录7种单一对照品溶液保留时间，同时记录7种成分混合对照品溶液中各成分的保留时间，以2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为内参物，通过公式RRT＝Tk/Ts计算柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚相对于内参物2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的相对保留时间；公式中Ts为内参物保留时间，Tk为混合对照品溶液中其它6种待测成分的保留时间；
D、相对校正因子的确定：吸取步骤B所述的混合对照品溶液，注入HPLC，测定，记录混合对照品溶液7种成分的峰面积，以2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为内参物，根据相对校正因子计算公式fk/s＝(As×Ck)/(Ak×Cs)计算柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的相对校正因子fk/s；公式中As为内参物峰面积，Cs为内参物质量浓度，Ak为其他组分峰面积，Ck为其他组分质量浓度；
E、多成分含量测定：分别吸取步骤A所述的供试品溶液和步骤B所述2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液，注入HPLC，测定，根据公式C样＝(A样×C对)/A对计算供试品溶液中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量；根据步骤C相对保留时间RRT对供试品溶液中的柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚6种成分进行定性，根据步骤D所述相对校正因子fk/s计算供试品溶液中柚皮苷、新橙皮苷、芦荟苷A、芦荟苷B、芦荟大黄素和大黄酚的含量；式中...

【专利技术属性】
技术研发人员：张贵民，马云，关永霞，
申请(专利权)人：鲁南厚普制药有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37