一种微生物检测系统技术方案

本发明专利技术涉及一种立式微生物检测芯片的制备方法，通过区别化的掩模涉及，从而在各片层上形成贯通和/或非贯通的微通道结构；然后将个片层材料组合，得的位于单独片层上的输水通道和用于容纳微液滴的容纳腔，或由多个片层组合而成的组合输送通道和组合容纳腔，本发明专利技术所制备的芯片还具有能够诱导微液滴进入容纳腔的侧流通道，所述侧流通道可以具有与容纳腔相同的深度，或仅被设在中间层，从而具有小于容纳腔的深度，通过将中间层的微通道结构设在为具有相比于其他片层的微通道结构更强的亲水特性，从而允许使用缩小的侧流通道截面积实现同等的侧向流强度。

【技术实现步骤摘要】
一种微生物检测系统
本专利技术涉及一种生物检测装置，具体涉及一种通过PCR反应执行对病毒、细菌等微生物特异性DNA检测的微生物检测系统。
技术介绍
基于微液滴的数字PCR芯片是当下最先进的核酸定量检测方法之一，相比于传统PCR技术，数字PCR将含有目标基因、引物、聚合酶等的溶液稀释后，分成几十到几十万份微小、独立的反应器，使每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个，对每个反应器进行传统PCR扩增并进行荧光检测。将含有目标基因的反应器标记为1，不含目标基因的反应器标记为0，根据相对比例和反应器的体积，并利用泊松分布推算出原始溶液的核酸浓度。目前，数字PCR的主流实施方式是基于具有微反应腔阵列的微流控芯片；来自于液滴制备单元的油包水液滴被分配至微反应腔阵列中，在此经历若干次升温-退火扩增循环后，向微反应腔引入激励光，包括目标核酸模板的微液滴在激励光的照射下发出荧光，检测次荧光，并进行统计分析后即可获得相应检测结果。数字PCR检测过程的主要步骤中，微液滴在微反应腔中的有效分配、对荧光信号的准确捕捉均在很大程度上影响检测结果的可靠性。...

【技术保护点】
1.一种立式微生物检测芯片（10）的制备方法，所述芯片（10）仅包括盖片层（1）和基片层（2），所述盖片层（1）上开设有进口通孔（11）和出口通孔（12）；所述基片层（2）上布置有非贯通的槽状微通道结构，所述微通道结构包括进样槽（21）、出样槽（22）、在两者之间弯折延伸的输送通道（23）、连通于输送通道水平段的容纳腔（24）和连通容纳腔（24）底部和下一级水平段的侧流通道（25）；其特征在于，包括如下步骤：/n步骤1，选择具有相同形状和尺寸的盖片层和基片层；/n步骤2，制备盖片掩模和基片掩模，所述盖片掩模仅包括用于形成进口通孔（11）和出口通孔（12）的缺口；所述基片掩模包括用于形成进样槽（...

【技术特征摘要】
1.一种立式微生物检测芯片（10）的制备方法，所述芯片（10）仅包括盖片层（1）和基片层（2），所述盖片层（1）上开设有进口通孔（11）和出口通孔（12）；所述基片层（2）上布置有非贯通的槽状微通道结构，所述微通道结构包括进样槽（21）、出样槽（22）、在两者之间弯折延伸的输送通道（23）、连通于输送通道水平段的容纳腔（24）和连通容纳腔（24）底部和下一级水平段的侧流通道（25）；其特征在于，包括如下步骤：
步骤1，选择具有相同形状和尺寸的盖片层和基片层；
步骤2，制备盖片掩模和基片掩模，所述盖片掩模仅包括用于形成进口通孔（11）和出口通孔（12）的缺口；所述基片掩模包括用于形成进样槽（21）、出样槽（22）、输送通（23）、容纳腔（24）和侧流通道（25）的缺口；
步骤3，分别在盖片层（1）和基片层（2）的单侧旋涂光刻胶；
步骤4，分别在所述盖片层（1）和基片层（2）的涂胶测覆盖盖片掩模和基片掩模；
步骤5，使用紫外光从各片层的掩模侧照射相应片层；
步骤6，烘干各片层；
步骤7，用蚀刻液对步骤6得到的盖片层（1）进行充分蚀刻，以得到贯通的进口通孔（11）和出口通孔（12）；对步骤6得到的基片层（2）进行受控蚀刻，以得到非贯通的微通道结构；
步骤8，去除光刻胶，将盖片层（1）的任意一侧与基片层（2）的微通道侧固定贴合，得到具有双层结构的芯片（10）。


2.如权利要求1所述的一种立式微生物检测芯片（10）的制备方法，其特征在于：还包括如下步骤：
步骤9，制备仅覆盖盖片层（1）和基片层（2）上的容纳腔的涂层掩模；将所述涂层掩模分别定位的贴合至盖片层（1）和基片层（2）的非通道侧；
步骤10，在步骤9中得的的芯片（10）的盖片层（1）和基片层（2）的掩模侧分别施加偏振涂层，其中，两个偏振涂层的偏振方向相反。
步骤11，烘干步骤10中得到的芯片（10），撕除涂层掩模，得到具有偏振涂层的三层结构的芯片（10）。


3.如权利要求1或2所述的立式微生物检测芯片（10）的制备方法，其特征在于：所述基片掩模具有用于形成输送通道（23）的缺口，使得所述输送通道（23）在进样槽（21）和出样槽（22）之间弯折延伸，且所述输送通道（23）包括若干条水平延伸的分配通道（231）及连接于上一级分配通道（231）的末端和下一级分配通道（231）的首端的连接通道（232）。


4.如权利要求3所述的一种立式微生物检测芯片（10）的制备方法，其特征在于：所述基片掩模包括用于形成容纳腔（24）的缺口，使得所述容纳腔（24）位于相邻另个分配通道（231）之间，且所述容纳腔（24）的上半部分与所述分配通道（231）的下缘流体连通。


5.如权利要求4所述的一种立式微生物检测芯片（10）的制备方法，其特征在于：所述基片掩模包括用于形成侧流通道（25）的缺口，使得所述侧流通道（25）连通容纳腔（24）的底部及下一级分配通道（231）的上缘，且所述侧流通道（25）的出口位于相邻两个容纳腔（24）之间；所述容纳腔（24）为圆形腔。


6.如权利要求5所述的一种立式微生物检测芯片（10）的制备方法，其特征在于：所述容纳腔（24）的上半部分与所述分配通道（231）的下缘连通，所述容纳腔（24）的靠口处具有能够包裹微液滴的檐部（242）和能够引导微液滴进入容纳腔（24）的引导部（243）；所述引导部（243）的半径与所述檐部（242）的高度相同。


7.一种立式微生物检测芯片（10）的制备方法，所述芯片（1...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑同玉，
申请(专利权)人：青岛福辉医疗器械有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37