一种高负载Y型分子筛-阿霉素纳米药物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种高负载Y型分子筛‑阿霉素纳米药物及其制备方法和应用。所述纳米药物的制备方法是以Y型分子筛为载体，在pH 9.0条件下，采用氢键和范德华力吸附阿霉素制得纳米药物YMS‑DOX。该纳米药物通过与人乳腺癌细胞(MM‑231)相互作用，结果显示YMS‑DOX具有缓释药物特性，且可通过EPR被动靶向作用诱导肿瘤细胞凋亡；通过与树突正常细胞(DC)相互作用，结果显示YMS‑DOX具有降低药物毒副作用特性。结果表明YMS‑DOX既能降低化疗药物对正常细胞的毒副作用，又能提高对肿瘤细胞的杀伤力，其可在制备抗肿瘤药物中应用。

【技术实现步骤摘要】
一种高负载Y型分子筛-阿霉素纳米药物及其制备方法和应用
本专利技术涉及纳米药物，具体涉及一种高负载Y型分子筛-阿霉素纳米药物及其制备方法，以及该药物在制备抗乳腺癌肿瘤药物中的应用。
技术介绍
目前，化疗是治疗肿瘤最常用方法。然而，化疗虽可杀灭肿瘤细胞，但在治疗过程中，由于化疗药物缺乏特异选择性和较大的毒副作用，患者常会出现身体疲乏、精神萎靡、虚汗狂出等情况，严重影响患者生活质量。纳米技术的出现为早日攻克癌症提供了新的视野，利用纳米材料的优势将抗癌药物阿霉素(DOX)负载设计药物输送体系已经成为研究热潮，例如：利用两亲性嵌段聚合物负载DOX的纳米药物输送体系(COPY-DOX)，以水分散性好的富勒烯作为纳米载体制备出具有主动靶向性、光动力治疗和pH响应化疗三大特性的抗肿瘤前药体系。尽管纳米药物输送体系已经被大量开发，但其在肿瘤微环境中药物缓释的特性却不尽人意，并且抗肿瘤效果比游离的DOX弱。Vallet-Regi等于2001年首次提出硅基介孔材料能够用于药物缓释，科研人员就展开了大量研究，如：探究介孔载体表面性质、孔径、形貌等对其载药释药性能影响。鉴于分子筛孔道均匀、表面基团丰富、稳定性高和无毒等特点，使其在生药方面应用备受关注。综合各项研究成果：介孔分子筛不仅可以作为药物载体成为临床上的首选纳米材料，而且还提供了安全保障，这一点对临床医学至关重要。然而，迄今为止，人们对分子筛研究仅限于药物缓控释放，并未对其抗肿瘤药物负载和释放的调控因素深入研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种高负载Y型分子筛-阿霉素纳米药物及其制备方法及其应用。本专利技术提供的一种高负载Y型分子筛-阿霉素纳米药物，其特征是以Y型分子筛为载体，在pH9.0环境下，采用氢键和范德华力吸附阿霉素制备而成。所述的一种高负载Y型分子筛-阿霉素纳米药物的制备方法，包括如下步骤：(1)按每毫克Y型分子筛分别依次加入0.5-1.0mL乙醇溶液比例和超纯水进行超声并以12000rpm高速离心洗涤2次，随后按每毫克Y型分子筛加入0.5-1.0mLpH为3.0-12.0的缓冲溶液(柠檬酸和磷酸氢二钠调配)，超声分散0.5h，形成悬浊液；(2)按Y型分子筛与阿霉素重量比1-10:1，将阿霉素溶液加入上述Y型分子筛悬浊液中，混合均匀后置于红外线加热电磁搅拌器上室温反应20h，待反应结束，高速离心并用超纯水洗涤2～3次，直到上清液接近无色为止，待洗涤完毕，将YMS-DOX纳米药物置于冷冻干燥机避光干燥备用，用棕色试剂瓶收集所有洗涤液，避光储存。优选的，所述的Y型分子筛与阿霉素重量比为5:1。优选的，所述的所述的缓冲溶液pH值为9.0。优选的，所述的高速离心转速为12000rpm。所述的高负载Y型分子筛-阿霉素纳米药物可以在制备抗乳腺癌肿瘤药物中应用。与现有技术相比本专利技术的有益效果：1、本专利技术选用的Y型分子筛具有生物相容性好、无毒、化学性质稳定、表面富有功能基团等优点；2、本专利技术将Y型分子筛作为载体，载药率高达99.61％的YMS-DOX；3、通过MTT毒性试验测试该纳米药物对细胞的活性，表明该纳米药物不仅可以降低化疗药物对正常细胞的毒副作用，而且能提高化疗药物对乳腺肿瘤细胞的杀伤力。附图说明图1纳米药物YMS-DOX在可见光和365nm紫外光下的照片图2A不同pH对纳米药物YMS-DOX负载量的紫外-可见吸收光谱图图2B不同pH对纳米药物YMS-DOX负载量的影响图3A作用时间对纳米药物YMS-DOX的紫外-可见吸收光谱图图3B作用时间对纳米药物YMS-DOX的负载量的影响图4A不同阿霉素加入量对YMS-DOX负载量的紫外-可见吸收光谱图图4B不同阿霉素加入量对YMS-DOX负载量的影响图5各种纳米颗粒的紫外-可见吸收光谱图图6各种纳米颗粒的荧光光谱图图7各种纳米颗粒的红外光谱图图8A纳米载体YMS对体外培养MM-231细胞活性的影响图8B纳米载体YMS对体外培养DC细胞活性的影响图9A纳米药物YMS-DOX对体外培养MM-231细胞活性的影响图9B纳米药物YMS-DOX对体外培养DC细胞活性的影响具体实施方式以下为实施例中使用的材料：Y型分子筛(YMS，直径大约10nm)。阿霉素(DOX，C27H29NO11·HCl，分子量为579.99)为合肥博美生物科技有限责任公司生产。磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O，分子量为358.14)和柠檬酸(C6H8O7·H2O，分子量为210.14)为阿拉丁(Aladdin)试剂有限公司生产。实施例1(1)准确称取1.0mgY型分子筛(YMS)，分别用无水乙醇和超纯水超声高速离心洗涤2次后，置于1.0mLpH为9.0的缓冲溶液(C6H8O7·H2O和Na2HPO4·12H2O调配)，超声分散0.5小时形成悬浊液，(2)接着向上述悬浊液中加入0.2mg阿霉素(DOX)，混合均匀后置于红外线加热电磁搅拌器上室温避光反应20小时，待反应结束，以12000rpm高速离心5分钟并用超纯水洗涤三次，直到上清液接近无色为止，待洗涤完毕，将Y型分子筛-阿霉素(YMS-DOX)纳米药物置于冷冻干燥机干燥备用。用棕色试剂瓶收集所有洗涤液，避光储存，待测定YMS纳米颗粒上吸附DOX的质量，用紫外-可见光分光光谱法检测阿霉素480nm处的吸光度，计算DOX的吸附量，经计算可知每毫克YMS吸附阿霉素质量约(199.22±1.98μg/mg)微克。实施例2称取10份1.0mgYMS，首先借助实施例1中方法(1)进行洗涤，随后分别加入1.0mLpH为3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0和12.0的缓冲溶液(C6H8O7·H2O和Na2HPO4·12H2O调配)，超声分散0.5小时，接着加入0.2mg阿霉素，混合均匀后置于红外线加热电磁搅拌器上室温避光反应20小时，待反应结束，以12000rpm高速离心5分钟并用超纯水洗涤三次，直到上清液接近无色为止，待洗涤完毕，将Y型分子筛-阿霉素(YMS-DOX)纳米药物置于冷冻干燥机干燥备用。用棕色试剂瓶收集所有洗涤液，避光储存，用于测定YMS纳米颗粒上吸附DOX的质量。用紫外-可见光分光光谱法检测阿霉素480nm处的吸光度，计算不同pH条件下DOX的负载量。结果如图2A、2B所示，pH在3.0-12.0范围内，DOX的负载量随pH增大呈现出先增大后减小的趋势，插图为纳米药物上清液图。当pH为9.0时，DOX负载量达到最大。实施例3称取5份1.0mgYMS，首先借助实施例1中方法(1)进行洗涤，随后加入1.0mLpH为9.0的缓冲溶液(C6H8O7·H2O和Na2HPO4·12H2O调配)，超声分散0.5小时，接着加入0.2mg阿霉本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高负载Y型分子筛-阿霉素纳米药物的制备方法，其特征是以Y型分子筛为载体，在pH 9.0条件下，采用氢键和范德华力吸附阿霉素制备而成。/n

【技术特征摘要】
1.一种高负载Y型分子筛-阿霉素纳米药物的制备方法，其特征是以Y型分子筛为载体，在pH9.0条件下，采用氢键和范德华力吸附阿霉素制备而成。


2.权利要求1所述的一种高负载Y型分子筛-阿霉素纳米药物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)按每毫克Y型分子筛分别依次加入0.5-1.0mL乙醇溶液和超纯水进行混合并以12000rpm高速离心洗涤2次，随后按每毫克Y型分子筛加入0.5-1.0mLpH为3.0-12.0的缓冲溶液(柠檬酸和磷酸氢二钠调配)，超声分散0.5h，形成悬浊液；
(2)按Y型分子筛与阿霉素重量比1-10:1，将阿霉素溶液加入上述Y型分子筛悬浊液中，混合均匀后置于红外线加热电磁搅拌器上室温反应20h，待反应结束，高速离心并用超...

【专利技术属性】
技术研发人员：李林，任晶，付玉静，
申请(专利权)人：太原师范学院，
类型：发明
国别省市：山西;14