一种山羊大肠杆菌性肠炎模型建立方法和应用技术

本专利设计一种大肠杆菌感染山羊的构建方法，并利用该动物模型进行了细菌感染检测研究和益生菌辅助治疗研究。该模型的构建方法包括：细菌接种，益生菌(屎肠球菌)干预，血液学检查，肠道病理组织学分析和肠道炎症相关基因表达分析。该方法具有简便、快速、高效、经济等优点，可以用于反刍动物肠炎的研究提供模型，益生菌和药物筛选等。该技术发明专利技术对于研究反刍动物消化系统感染机制和防控治疗研究具有重大意义。

【技术实现步骤摘要】
一种山羊大肠杆菌性肠炎模型建立方法和应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种山羊大肠杆菌性肠炎模型建立方法和应用。
技术介绍
大肠杆菌性肠炎是动物常见的腹泻疾病，也是反刍动物山羊养殖中的常发病，患羊常出现体温升高、呼吸及心率加快和腹泻等症状。屎肠球菌作为我国农业部明确允许使用的饲料微生物添加剂之一，具有调节肠道菌群平衡，抑制病原菌黏附与生长，减轻肠道炎症等作用。由于反刍动物属于复胃动物，且细菌性肠炎是常见的导致腹泻疾病的原因，建立与临床发病情况类似的感染性疾病模型，对于研究致病机理、益生菌和药物筛查具有重要意义。而现有实验动物鼠和兔子均属于单胃动物，发病与复胃动物具有较大差异，且采用毒力成分或者化合物引发的肠炎模型与病原菌的致病机理相差较大。故本模型的建立，模拟了临床病原微生物感染，可激发相关免疫反应和病理损伤，且该模型建立中运用现代分子技术和经典病理观察来论证炎症和损伤，同时采用益生菌进行干预治疗，为今后的相关研究提供模型和方法。
技术实现思路
本专利技术提供一种山羊大肠杆菌性肠炎模型建立方法和应用，该方法具有简便、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种山羊大肠杆菌性肠炎模型建立方法，其特征在于，包括以下步骤：/n将健康成年雌性山羊随机分为4组，分别为对照组、益生菌组、大肠杆菌组和预防组；/n对照组：每天灌服生理盐水，连续8d；/n益生菌组：试验的-4至-1天，每天灌服益生菌悬液，连续4d；试验的0至3天，每天灌服生理盐水，连续4d；/n大肠杆菌组：试验的-4至-1天，每天灌服生理盐水，连续4d；试验的0至3天，每天灌服大肠杆菌悬液，连续4d；/n预防组：试验的-4至-1天，每天灌服益生菌悬液，连续4d；试验的0至3天，每天灌服大肠杆菌悬液，连续4d；/n分别于试验的第4d和8d进行微创采样，进行肠道病理变化观察和评估，及肠黏膜相关炎...

【技术特征摘要】
1.一种山羊大肠杆菌性肠炎模型建立方法，其特征在于，包括以下步骤：
将健康成年雌性山羊随机分为4组，分别为对照组、益生菌组、大肠杆菌组和预防组；
对照组：每天灌服生理盐水，连续8d；
益生菌组：试验的-4至-1天，每天灌服益生菌悬液，连续4d；试验的0至3天，每天灌服生理盐水，连续4d；
大肠杆菌组：试验的-4至-1天，每天灌服生理盐水，连续4d；试验的0至3天，每天灌服大肠杆菌悬液，连续4d；
预防组：试验的-4至-1天，每天灌服益生菌悬液，连续4d；试验的0至3天，每天灌服大肠杆菌悬液，连续4d；
分别于试验的第4d和8d进行微创采样，进行肠道病理变化观察和评估，及肠黏膜相关炎性基因表达量的检测。


2.根据权利要求1所述的山羊大肠杆菌性肠炎模型建立方法，其特征在于，所述益生菌为屎肠球菌。


3.根据权利要求2所述的山羊大肠杆菌性肠炎模型建立方法，其特征在于，屎肠球菌的制备方法为：将冻存的屎肠球菌在MRS固体培养基上划线接种，于37℃恒温静置培养24h；经2次平板划线活化后，挑取单菌落接种于MRS液体培养基，37℃120rpm培养至对数生长期后，将菌液离心，用无菌的生理盐水洗涤2次，调整浓度为109CFU/mL，4℃冷藏备用。


4.根据权利要求1所述的山羊大肠杆菌性肠炎模型建立方法，其特征在于，大肠杆菌的制备方法为：将冻存的大肠杆菌在LB固体培养基上划线接种，于37℃恒温静置培养12h；经2次平板划线活化后，挑取单菌落接种于LB液体培养基，37℃，120rpm培养至对数生长期后，将菌液离心，用无菌的生理盐水洗涤2次，调整浓度为109CFU/mL，4℃冷藏备...

【专利技术属性】
技术研发人员：王亨，李子祥，李俊，李建基，崔璐莹，孟霞，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32