一种内酯类化合物及其提取方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种内酯类化合物及其提取方法和应用，将猫儿屎内生真菌DS37次生代谢产物用石油醚/乙酸乙酯/甲醇浸提，合并提取液并过滤，回收混合溶剂，减压浓缩，得到粗品浸膏；将粗品浸膏在硅胶色谱柱上，用不同体积梯度的石油醚/乙酸乙酯/甲醇洗脱剂进行洗脱，得到A‑D四个组分；将B组分浸膏在硅胶色谱柱上，用不同体积梯度的石油醚/乙酸乙酯洗脱剂进行洗脱，得到B1‑B6六个组分，B4组分继续在硅胶色谱柱上，用不同体积梯度的石油醚/乙酸乙酯洗脱剂进行洗脱，得到B4.1‑B4.13十三个组分，B4.10组分用羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱分离，得到内酯类化合物。本发明专利技术从猫儿屎内生真菌DS37次生代谢产物中分离得到内酯类化合物，且该化合物有良好的抑菌活性和抗肿瘤活性。

【技术实现步骤摘要】
一种内酯类化合物及其提取方法和应用
本专利技术涉及内酯类化合物制备领域，具体涉及一种内酯类化合物及其提取方法和应用。
技术介绍
猫儿屎(Decaisneainsignis(Griff.)Hook.f.&Thomson)又叫猫儿瓜(秦岭)、矮杞树等，系木通科(Lardiyabalaeeae)猫儿屎属植物。丛生落叶直立灌木，广泛分布于我国西南部和中部地区。木通科植物猫儿屎是我国传统的民间中草药，味辛、甘、性平，根及果实甘、凉具有清肺止咳，祛风除湿，治疗风湿关节痛等功效。迄今为止，对猫儿屎的研究主要集中在它的植物化学成分，而对其内生真菌的研究相对较少。内生真菌指在其生长过程中至少有一个阶段生活在植物体内，但却不会对植物组织造成显著不良影响的真菌。据报道，内生真菌次生代谢产物种类主要有：生物碱、萜类、甾体、有机酸类等化合物，均具有一定的生物活性。然而未见猫儿屎内生真菌中有关内酯类化合物的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种内酯类化合物及其提取方法和应用，以克服上述现有技术存在的缺陷，本专利技术从猫儿屎内生真菌DS37次生代谢产物中分离得到结构新颖的内酯类化合物，且该内酯类化合物有较好的抑菌活性和对人体癌细胞表现出优良的抑制活性。为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种内酯类化合物，所述内酯类化合物的化学结构式为：一种内酯类化合物的提取方法，包括以下步骤：(1)以猫儿屎内生真菌DS37固体发酵物为原料用石油醚、乙酸乙酯和甲醇浸提若干次，合并提取液并过滤，回收混合溶剂，滤液减压浓缩，得到粗品浸膏，所述猫儿屎内生真菌DS37固体发酵物与粗品浸膏的质量比为92:15；(2)将步骤(1)得到的粗品浸膏在硅胶色谱柱上，分别用体积梯度为1:0:0,0:1:0,0:1:1,0:0:1的石油醚/乙酸乙酯/甲醇洗脱剂进行洗脱，得到A-D四个组分，所述粗品浸膏与A-D四个组分之间的质量比为150:11:42:70:10；(3)将步骤(2)得到的B组分在硅胶色谱柱上，分别用体积梯度为100:0,100:20,100:50,100:100,100:200,0:100的石油醚/乙酸乙酯洗脱剂进行洗脱，得到B1-B6六个组分，B4组分继续在硅胶色谱柱上，用体积梯度为100:20,100:50,100:80,100:100,100:120,100:150,100:180,100:190,100:195,100:200,100:250,100:300,0:100的石油醚/乙酸乙酯洗脱剂进行洗脱，得到B4.1-B4.13十三个组分，将B4.10组分用羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱分离得到内酯类化合物，所述B组分和B4组分之间的质量比为21:1，B4组分和B4.10组分之间的质量比为50:3，B4.10组分和内酯类化合物之间的质量比为1000:11。进一步地，所述的石油醚、乙酸乙酯和甲醇均为工业用标准。进一步地，步骤(1)中将猫儿屎内生真菌DS37固体发酵后的阴干产物用石油醚/乙酸乙酯/甲醇浸提8次。上述内酯类化合物在制备抑菌药物上的应用。进一步地，所述抑菌指对细菌或真菌的抑制作用。进一步地，所述抑菌指对烟草赤星病菌的抑制作用。上述内酯类化合物在制备抗肿瘤药物上的应用。进一步地，所述抗肿瘤指对人肺癌细胞、人前列腺癌细胞、人乳腺癌细胞和人肝癌细胞的体外作用。进一步地，所述抗肿瘤指对A549，MCF-7和HepG2细胞株的体外作用。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果：本专利技术的猫儿屎内生真菌DS37次生代谢产物—内酯类化合物是一种结构新颖的双香豆素化合物，其分子式为C24H22O8，另外本专利技术通过对猫儿屎内生真菌DS37固体发酵后的阴干次生代谢产物进行提取，得到此内酯类化合物，通过对本专利技术内酯类化合物的抑菌活性测试，发现该化合物有较好的抗细菌和真菌活性，尤其对烟草赤星病菌有很好的抑菌活性，为猫儿屎内生真菌DS37次生代谢产物的抑菌活性成分，因此，可以用于农业防治和药剂防治技术。另外，通过对本专利技术内酯类化合物的体外抗肿瘤活性测试，发现该化合物有较好的抗肿瘤活性，尤其对A549、MCF-7和HepG2细胞株有很好的细胞毒活性，为猫儿屎内生真菌DS37次生代谢产物的抗肿瘤活性成分，因此，可以为抗肿瘤药物的开发提供一种可能。附图说明图1为本专利技术内酯类化合物的1H-NMR谱；图2为本专利技术内酯类化合物的13C-NMR谱；图3为本专利技术内酯类化合物的DEPT(135°)谱；图4为本专利技术内酯类化合物的COSY谱；图5为本专利技术内酯类化合物的NOESY谱；图6为本专利技术内酯类化合物的HSQC谱；图7为本专利技术内酯类化合物的HMBC谱；图8为本专利技术内酯类化合物的HR-ESI-M谱；图9为本专利技术内酯类化合物的结构片段，即苯并吡喃酮结构片段；图10为本专利技术内酯类化合物的结构图。保藏说明本专利技术对从猫儿屎植物茎部分离得到的一株内生真菌塔宾曲霉DS37进行了下述保藏：保藏单位名称：中国典型培养物保藏中心(CCTCC)；保藏单位地址：中国，武汉；保藏日期：2018年3月22日；保藏编号：CCTCCNO：M2018147，分类命名：塔宾曲霉DS37(AspergillustubingensisDS37)。具体实施方式下面对本专利技术的实施方式做进一步详细描述：一种内酯类化合物，该化合物的化学结构式：该化合物的提取方法如下：(1)以猫儿屎内生真菌DS37次生代谢产物(9.2kg)为原料用石油醚/乙酸乙酯/甲醇浸提8次，合并提取液并过滤，回收混合溶剂，减压浓缩，得到粗品浸膏1500g；(2)将步骤(1)得到的粗品浸膏在硅胶色谱柱上，分别用体积梯度为1:0:0,0:1:0,0:1:1,0:0:1的石油醚/乙酸乙酯/甲醇洗脱剂进行洗脱，得到A(110g)，B(420g)，C(700g)，D(100g)四个组分；(3)对步骤(2)的B组分(420g)浸膏，在硅胶色谱柱上，用不同梯度的石油醚/乙酸乙酯洗脱剂(1:0,5:1,2:1,1:1,1:2,0:1,v/v)进行洗脱，得到B1-B6六个组分，B4组分(20g)继续在硅胶色谱柱上，用不同梯度的石油醚/乙酸乙酯(100:20,100:50,100:80,100:100,100:120,100:150,100:180,100:190,100:195,100:200,100:250,100:300,0:100，v/v)洗脱剂进行洗脱，得到B4.1-B4.13十三个组分，将B4.10组分(1.2g)用羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱分离，得到纯净的内酯类化合物(13.2mg)。其中，硅胶柱色谱分离时按1:1拌样上柱，计算出柱体积，洗脱剂的用量为柱体积的5-7倍。本专利技术制备的猫儿屎内生真菌DS37次生代谢产物—内酯类化合物是一种结构新颖的双香豆素类化本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种内酯类化合物，其特征在于，所述内酯类化合物的化学结构式为：/n

【技术特征摘要】
1.一种内酯类化合物，其特征在于，所述内酯类化合物的化学结构式为：





2.一种权利要求1所述的内酯类化合物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)以猫儿屎内生真菌DS37固体发酵物为原料用石油醚、乙酸乙酯和甲醇浸提若干次，合并提取液并过滤，回收混合溶剂，滤液减压浓缩，得到粗品浸膏，所述猫儿屎内生真菌DS37固体发酵物与粗品浸膏的质量比为92:15；
(2)将步骤(1)得到的粗品浸膏在硅胶色谱柱上，分别用体积梯度为1:0:0,0:1:0,0:1:1,0:0:1的石油醚/乙酸乙酯/甲醇洗脱剂进行洗脱，得到A-D四个组分，所述粗品浸膏与A-D四个组分之间的质量比为150:11:42:70:10；
(3)将步骤(2)得到的B组分在硅胶色谱柱上，分别用体积梯度为100:0,100:20,100:50,100:100,100:200,0:100的石油醚/乙酸乙酯洗脱剂进行洗脱，得到B1-B6六个组分，B4组分继续在硅胶色谱柱上，用体积梯度为100:20,100:50,100:80,100:100,100:120,100:150,100:180,100:190,100:195,100:200,100:250,100:300,0:100的石油醚/乙酸乙酯洗脱剂进行洗脱，得到B4.1-B4.13十三个组分，将B4.10组分用羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱分离得到内酯类化合物，所述B组分和B4组分之间的质量比为...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨秀芳，惠昱昱，王宁宁，马养民，汪小钢，姬海刚，
申请(专利权)人：陕西科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61