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一种提高鸡胚成纤维细胞体外诱导重编程为iPS细胞效率的方法技术

技术编号:25261799 阅读:42 留言:0更新日期:2020-08-14 22:57
一种提高鸡胚成纤维细胞体外诱导重编程为鸡iPS细胞效率的方法,属于生物技术领域。前期研究发现通过OSNL体系可将鸡CEF诱导重编程为iPS,但效率较低,在此基础上,研究体细胞诱导重编程过程中糖酵解代谢发挥的作用并对诱导体系进行进一步的优化。本发明专利技术操作简单,切实可行,应用广泛。由于鸡诱导多能干细胞具有发育的全能性,在适当条件下可被诱导分化为多种细胞组织,因此可作为一种新的干细胞来源,也为珍稀动物的保种、转基因动物的生产等研究开辟了新思路。本发明专利技术将小分子化合物和细胞代谢联系在一起,将为禽类体细胞诱导重编程研究提供了更多的理论基础和技术支撑,也有利于为家禽细胞和胚胎工程研究提供更多的实验材料。

【技术实现步骤摘要】
一种提高鸡胚成纤维细胞体外诱导重编程为iPS细胞效率的方法
本专利技术涉及一种提高鸡胚成纤维细胞体外诱导重编程为鸡iPS细胞效率的方法,属于生物

技术介绍
2006年Yamanaka首次将OCT4、SOX2、KLF4和c-MYC(OSKM)四个转录因子通过逆转录病毒载体导入小鼠成纤维细胞,获得了与胚胎干细胞(EmbryonicStemCells,ESCs)类似的多能干细胞,称之为诱导多能性干细胞(inducedpluripotentstemcells,iPS),具有发育的全能性,在适当条件下可被诱导分化为多种细胞组织。诱导体细胞重编程技术的诞生,不仅给人们带来了新的干细胞来源,也为珍稀动物的保种、转基因动物的生产等研究开辟了新思路。在小鼠、人等多个物种中iPS的诱导技术已相当成熟,但家禽体细胞诱导重编程研究进程仍较为缓慢。直至2012年,Lu等利用NANOG、OCT4、SOX2、KLF4、C-MYC和LIN28(OSKMNL)慢病毒过表达载体才首次将非哺乳动物鹌鹑的体细胞重编程为iPS。申请人前期研究发现,通过本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提高鸡胚成纤维细胞体外诱导重编程为iPS细胞效率的方法,其特征是,通过OSNL体系可将鸡CEF诱导重编程为iPS,筛选合适的糖酵解激活剂,将其添加到OSNL诱导重编程体系中,观察iPS克隆形成数,同时通过流式检测iPS的诱导效率。/n

【技术特征摘要】
1.一种提高鸡胚成纤维细胞体外诱导重编程为iPS细胞效率的方法,其特征是,通过OSNL体系可将鸡CEF诱导重编程为iPS,筛选合适的糖酵解激活剂,将其添加到OSNL诱导重编程体系中,观察iPS克隆形成数,同时通过流式检测iPS的诱导效率。


2.根据权利要求1所述的一种提高鸡胚成纤维细胞体外诱导重编程为iPS细胞效率的方法,其特征是,在筛选合适的糖酵解激活剂或抑制剂前,对糖酵解在鸡体细胞诱导重编程过程中的作用进行研究:

【专利技术属性】
技术研发人员:李碧春袁霞左其生姜景译丁颖石祥张明张亚妮孙红艳
申请(专利权)人:扬州大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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