一种DNA聚合酶连续定向进化菌株筛选芯片制造技术

本实用新型专利技术公布一种DNA聚合酶连续定向进化菌株筛选芯片，芯片包括混合单元，PCR反应单元，破碎洗脱单元，转化单元；所述混合单元与PCR反应单元通过管道连接，所述PCR反应单元与破碎洗脱单元通过管道连接，所述破碎洗脱单元与转化单元管道连接；混合单元用于将单个细菌与PCR Mix混合包裹于同一油相液滴中；PCR反应单元用于收集细菌‑PCR Mix微液滴并进行PCR反应；破碎洗脱单元用于破碎油包水微液滴、去除破碎后的杂质和吸附质粒；转化单元包含转化腔，迭代菌株收集管道，感受态菌株注入腔；转化单元用于生成迭代菌株，可以高效的实现定向进化菌株的筛选和迭代。

【技术实现步骤摘要】
一种DNA聚合酶连续定向进化菌株筛选芯片
本技术涉及分子生物学，基因工程学领域，具体是一种DNA聚合酶连续定向进化菌株筛选芯片。
技术介绍
DNA聚合酶，又称DNA依赖的DNA聚合酶(DNA—dependentDNApolymerase，DNApol)，它是以亲代DNA为模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一类酶。分子克隆中常用的DNA聚合酶有Taq、KlenTaq、StoffelFragment、Tth、Pfu、Vent、DeepVent和UlTma等，它们是现代分子生物学
中不可或缺的重要工具，而获得稳定性好、扩增速度快、保真性高、低成本的DNA聚合酶一直是科研工作者的孜孜不倦的追求。通过定向突变方法获得功能改进的新型蛋白，是目前一种应用广泛、效率高的蛋白进化方式，而定向突变获取目的蛋白方法的成功高度依赖于研究人员从海量突变菌株中识别目标蛋白的能力，从大量突变中精准筛选对于花费和人力都是一个巨大的挑战。传统的DNA聚合酶定向筛选利用突变菌自身表达的突变型DNA聚合酶扩增自身的突变质粒，在特定的扩增条件下，高效本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种DNA聚合酶连续定向进化菌株筛选芯片，其特征在于，所述芯片本体包括混合单元(1)，PCR反应单元(2)，破碎洗脱单元(3)，转化单元(4)；所述混合单元(1)与PCR反应单元(2)通过管道连接，所述PCR反应单元(2)与破碎洗脱单元(3)通过管道连接，所述破碎洗脱单元(3)与转化单元(4)管道连接。/n

【技术特征摘要】
1.一种DNA聚合酶连续定向进化菌株筛选芯片，其特征在于，所述芯片本体包括混合单元(1)，PCR反应单元(2)，破碎洗脱单元(3)，转化单元(4)；所述混合单元(1)与PCR反应单元(2)通过管道连接，所述PCR反应单元(2)与破碎洗脱单元(3)通过管道连接，所述破碎洗脱单元(3)与转化单元(4)管道连接。


2.根据权利要求1所述的一种DNA聚合酶连续定向进化菌株筛选芯片，其特征在于，所述混合单元(1)包含油相通道(5)，菌液通道(6)，PCRMix通道(7)，外置高压电极，zig-zag通道(8)；其中油相通道(5)的末端与zig-zag通道(8)的首端相连，菌液通道(6)、PCRMix通道(7)分别与油相通道(5)侧壁联通，PCRMix通道(7)相对于菌液通道(6)更靠近油相通道(5)末端，PCRMix通道(7)与zig-zag通道(8)之间的油相管道外侧放置外置正极电极(51)及外置负极电极(52)；混合单元(1)用于生成包含单个细菌与PCRMix的油包水微液滴。


3.根据权利要求2所述的一种DNA聚合酶连续定向进化菌株筛选芯片，其特征在于，所述PCR反应单元(2)包含PCR反应池(9)，温控单元(21)，单向阀门I(10)；其中PCR反应池(9)的一端与zig-zag通道(8)的末端相连，PCR反应池(9)的另一端与单向阀门I(10)入口端相连，温控单元(21)置于PCR反应池(9)外侧用于控制PCR反应池温度；PCR反应单元(2)用于包裹菌液与PCRMix溶液的微液滴的PCR反应。


4.根据权利要求3所述的一种DNA聚合酶连续定向进化菌株筛选芯片，其特征在于，所述破碎洗脱单元(3)包含液滴破碎管道(11)，洗脱液I腔(12)，DNA吸附管道(13)，单向阀门II(14)，单向阀门III(15)，洗脱液II腔(16),废液收集管道(17)；液滴破碎管道(11...

【专利技术属性】
技术研发人员：张惠丹，戴敬，杨晟，黎晗，姜坤廷，
申请(专利权)人：苏州译酶生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：江苏;32