【技术实现步骤摘要】
一种用质谱法检测人体中多种痕量激素的方法
本专利技术涉及一种用质谱法检测人体中多种痕量激素的方法,属于血清中类固醇激素检测
技术介绍
痕量激素是指在血清中含量极小的激素,例如,血清中睾酮、雄烯二酮、二氢睾酮、孕酮、17-羟孕酮、皮质醇、皮质酮、皮质脂酮、醛固酮、脱氢表雄酮和孕烯醇酮等类固醇激素。类固醇激素是一类由肾上腺和性腺分泌的微量高效能四环脂肪烃化合物,具有环戊烷多氢菲母核。在维持生命、调节性功能,对机体发展、免疫调节、皮肤疾病治疗及生育控制方面有明确的作用,新生儿筛查、内分泌疾病及相关代谢性疾病的诊断中具有重要的临床意义和疗效判定意义。现有的精准定量人体中痕量激素的平台,一般采用放射免疫测定法,免疫学方法在激素检测上的缺点包括:存在嗜异性或自身抗体干扰;对激素代谢的结构类似物不能区别检测,存在交叉反应;动态线性范围较窄,不能满足浓度跨度范围较大的激素检测需求,比如同一激素在不同个体间或同一个体不同应激状态下浓度差异较大的情况(睾酮等);对含量相对较低的激素检测的灵敏度不够;不能同时检测多种激素。免疫学 ...
【技术保护点】
1.一种用质谱法检测人体中多种痕量激素的方法,其特征在于,它包括以下步骤:/n(1)配制试剂:准备甲醇(色谱级),甲酸铵(色谱级);/n0.2mol/L甲酸铵溶液:1.26g甲酸铵用水溶解并定容到100mL;/n2mmol/L甲酸铵溶液:吸取1mL 0.2mol/L甲酸铵溶液,加入到水中溶解并定容至100mL;/n2mmol/L的甲酸铵甲醇溶液:吸取1mL 0.2mol/L甲酸铵溶液加入到甲醇中溶解并定容至100mL;/n(2)配制萃取溶剂:准备甲基叔丁基醚(色谱级),正己烷(色谱级),乙酸乙酯(色谱级),按照正己烷:乙酸乙酯:甲基叔丁基醚=1:1:1(体积比)配制萃取溶剂 ...
【技术特征摘要】
1.一种用质谱法检测人体中多种痕量激素的方法,其特征在于,它包括以下步骤:
(1)配制试剂:准备甲醇(色谱级),甲酸铵(色谱级);
0.2mol/L甲酸铵溶液:1.26g甲酸铵用水溶解并定容到100mL;
2mmol/L甲酸铵溶液:吸取1mL0.2mol/L甲酸铵溶液,加入到水中溶解并定容至100mL;
2mmol/L的甲酸铵甲醇溶液:吸取1mL0.2mol/L甲酸铵溶液加入到甲醇中溶解并定容至100mL;
(2)配制萃取溶剂:准备甲基叔丁基醚(色谱级),正己烷(色谱级),乙酸乙酯(色谱级),按照正己烷:乙酸乙酯:甲基叔丁基醚=1:1:1(体积比)配制萃取溶剂;
(3)配制标准储备液:准备11种标准物质,睾酮、雄烯二酮、二氢睾酮、孕酮、17-羟孕酮、皮质醇、皮质酮、皮质脂酮、醛固酮、脱氢表雄酮和孕烯醇酮,纯度均>97%,分别准确称取10mg以上标准物质,用甲醇配制成一定浓度标准储备液,-18℃冷冻避光保存;
(4)配制内标物质储备液:准备同位素内标物质,睾酮-d5,孕酮-d9,17-羟孕酮-d8,醛固酮-d7,皮质醇-d4,脱氢表雄酮-d6,皮质酮-d8,皮质脂酮-d8,根据同位素内标物质的容量,用甲醇配制成0.1-1.0mg/mL的内标储备液,-18℃冷冻避光保存;
(5)配制标准曲线溶液:
使用标准储备液、内标物质储备液,配制孕酮、17-羟孕酮、雄烯二酮、皮质酮的线性浓度点为0.05、0.2、0.5、2.0、5.0、10、20mg/L,内标为1.0mg/L,配制睾酮、二氢睾酮、皮质脂酮、醛固酮的线性浓度点为0.1、0.2、0.5、2.0、5.0、10、20mg/L,内标为1.0mg/L,配制皮质醇的线性浓度点为1.0、5.0、10、20、50、100、200mg/L,内标为1.0mg/L,配制脱氢表雄酮、孕烯醇酮的线性浓度点为0.5、1.0、2.0、5.0、10、20、50mg/L,内标为10mg/L;具体地,吸取适当体积和浓度的标准储备液,每个浓度点加适当体积0.1mg/L的内标物质储备液,用2mmol/L的甲酸铵水溶液:2mmol/L的甲酸铵甲醇=2:8(体积比)溶液定容到1mL;
(6)样品处理:
准确移取血清样...
【专利技术属性】
技术研发人员:章天添,夏立凤,林奥,
申请(专利权)人:上海歌特维生物科技集团有限公司,
类型:发明
国别省市:上海;31
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