非编码RNA作为宫颈癌诊治标志物的用途制造技术

技术编号:25031588 阅读:34 留言:0更新日期:2020-07-29 05:25
本发明专利技术公开了非编码RNA作为宫颈癌诊治标志物的用途,该非编码RNA是LINC01060,通过检测LINC01060的表达水平来实现诊断的目的。本发明专利技术研究证明与正常对照相比,宫颈癌组织中LINC01060表达水平显著上调。根据LINC01060基因与宫颈癌之间存在的相关性,可以制备诊断宫颈癌的产品。另外,本发明专利技术研究证明LINC01060可影响宫颈癌细胞增殖和侵袭,故可将LINC01060作为治疗宫颈癌的药物的治疗靶标。

【技术实现步骤摘要】
非编码RNA作为宫颈癌诊治标志物的用途
本专利技术属于诊断领域,涉及非编码RNA作为宫颈癌诊治标志物的用途。
技术介绍
宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤,在全球女性恶性肿瘤中发病率居第二位,仅次于乳腺癌。据世界范围统计每年宫颈癌的新发病例约529,800,有275,100妇女死于宫颈癌,死亡率己占妇科恶性肿瘤的首位。超过85%的病例发生在发展中国家,发达国家仅占18%。与发达国家或地区相比,发展中国家或地区宫颈癌的发病率和死亡率均较高。近几十年来,随着宫颈细胞学检测技术、阴道镜检查及活检技术的发展,宫颈癌的发病率和死亡率较前明显下降,但是随着现代女性生活习惯的改变,生殖道病毒性疾病不断增加,性传播疾病普遍流行,使得宫颈癌发病年龄趋向于年轻化,而且晚期宫颈癌的发生率逐渐下降,早期宫颈癌的发生率明显上升。随着医学技术的发展,在宫颈癌的早期发现、早期诊断、手术治疗、放化疗和基因治疗等方面都取得了突破性的进展,临床医生完全可以阻断宫颈癌的发生并治愈宫颈癌。但目前对于宫颈癌发生发展的分子生物学机制仍不清楚。因此,探寻并揭示宫颈癌的发病机制,明确宫颈上皮细胞在恶性转化过程中生物学行为的改变,寻找新的高效的宫颈癌分子生物学诊断、基因治疗和预后监测的特异性标志物,是当前宫颈癌实验室研究、临床诊断及治疗中需要我们研究和亟待解决的难题,这也是最大限度的预防、降低宫颈癌发生的一条重要途径。从长远来看,对于维护全球女性的身心健康具有非凡的意义。
技术实现思路
根据本专利技术的一个方面,本专利技术提供了检测LINC01060表达的产品在制备诊断宫颈癌的工具中的应用。进一步,上面所提到的检测产品包括:通过反转录PCR、实时定量PCR、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测LINC01060的表达水平以诊断宫颈癌的产品。进一步,所述通过反转录PCR检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品至少包括一对特异扩增LINC01060的引物;所述通过实时定量PCR检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品至少包括一对特异扩增LINC01060的引物;所述通过原位杂交检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品包括:与LINC01060的核酸序列杂交的探针;所述通过芯片检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品包括与LINC01060的核酸序列杂交的探针。在本专利技术的具体实施方案中,所述通过实时定量PCR检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品至少包括的一对特异扩增LINC01060的引物如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。本专利技术还提供了一种诊断宫颈癌的工具,所述工具能够通过检测样本中LINC01060的表达来诊断宫颈癌。进一步,所述工具包括芯片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台。其中,所述芯片包括固相载体以及固定在固相载体的寡核苷酸探针,所述寡核苷酸探针包括用于检测LINC01060转录水平的针对LINC01060的寡核苷酸探针;所述试剂盒包括用于检测LINC01060转录水平的试剂;所述试纸包括用于检测LINC01060转录水平的试剂;所述高通量测序平台包括用于检测LINC01060转录水平的试剂。更进一步,所述检测LINC01060转录水平的试剂包括针对LINC01060的引物和/或探针。与LINC01060的核酸序列杂交的探针可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它衍生物。所述探针的长度没有限制,只要完成特异性杂交、与目的核苷酸序列特异性结合,任何长度都可以。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样,所述探针的长度可长至60、80、100、150、300个碱基对或更长,甚至整个基因。由于不同的探针长度对杂交效率、信号特异性有不同的影响,所述探针的长度通常至少是14个碱基对,最长一般不超过30个碱基对,与目的核苷酸序列互补的长度以15-25个碱基对最佳。所述探针自身互补序列最好少于4个碱基对,以免影响杂交效率。在本专利技术的具体实施方案中,所述针对LINC01060的引物序列如下:正向引物序列如SEQIDNO.1所示,反向引物如SEQIDNO.2所示。用于诊断宫颈癌的LINC01060来源包括但不限于组织和体液,体液包括血液、组织液等存在DNA的体内液体成分。在本专利技术的具体实施方案中,用于诊断宫颈癌的LINC01060的来源是组织。本专利技术的LINC01060(GeneID:401164)的具体序列可在国际公共核酸序列数据库GeneBank中查询到。本专利技术提供了一种用于治疗宫颈癌的药物组合物,所述药物组合物包括抑制LINC01060的试剂。进一步,所述试剂不受限制,只要是可以抑制LINC01060表达水平或抑制LINC01060功能活性即可。所述试剂包括LINC01060的siRNA或shRNA。在本专利技术的具体实施方案中,所述LINC01060的siRNA序列如SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示。本专利技术的药物组合物可以作为医药单独施用或与其它药物一起施用。可以与本专利技术的药物组合物一起施用的其它药物不受限制,只要它不损害本专利技术的治疗性或预防性药物组合物的效果即可。本专利技术的药物组合物可根据需要制备成各种剂型。包括但不限于,经皮、粘膜、鼻、口颊、舌下或经口使用的片剂、溶液剂、颗粒剂、贴剂、膏剂、胶囊剂、气雾剂或栓剂。本专利技术的药物组合物的施用途径不受限制,只要它能发挥期望的治疗效果或预防效果即可,包括但不限于静脉内,腹膜内,眼内,动脉内,肺内,口服,小泡内,肌肉内,气管内,皮下的,通过皮肤,通过胸膜,局部的,吸入,通过粘膜,皮肤,肠胃,关节内,心室内,直肠,阴道,颅骨内,尿道内,肝内。在某些情况下,可以系统地给药。在某些情况下是局部地给药。本专利技术的药物组合物的剂量不受限制,只要获得期望的治疗效果或者预防效果即可,可以依据症状、性别、年龄等来恰当的确定。本专利技术的治疗药物组合物或预防药物组合物的剂量可以使用例如对疾病的治疗效果或者预防效果作为指标来确定。本专利技术还提供了LINC01060在制备治疗宫颈癌的药物中的应用。本专利技术还提供了抑制LINC01060的试剂在制备治疗宫颈癌的药物中的应用。进一步,所述药物限定同前面所述的。在本专利技术的上下文中,“诊断宫颈癌”既包括判断受试者是否已经患有宫颈癌、也包括判断受试者是否存在患有宫颈癌的风险。附图说明图1显示利用QPCR检测LINC01060在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的表达差异统计图;图2显示利用MTT检测LINC01060表达对宫颈癌细胞增殖影响的生长曲线图;图3显示LINC01060表达对宫颈癌细胞侵袭影响的结果统计图。具体的实施方式下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步详细的说明。以下实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,例如Sambrook等人,分子克隆:实验室手册(NewY本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.检测LINC01060表达的产品在制备诊断宫颈癌的工具中的应用;/n优选地,通过反转录PCR、实时定量PCR、原位杂交、芯片、或高通量测序平台检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品。/n

【技术特征摘要】
1.检测LINC01060表达的产品在制备诊断宫颈癌的工具中的应用;
优选地,通过反转录PCR、实时定量PCR、原位杂交、芯片、或高通量测序平台检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品。


2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述通过反转录PCR检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品至少包括一对特异扩增LINC01060的引物;所述通过实时定量PCR检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品至少包括一对特异扩增LINC01060的引物;所述通过原位杂交检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品包括:与LINC01060的核酸序列杂交的探针;所述通过芯片检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品包括与LINC01060的核酸序列杂交的探针。


3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述通过实时定量PCR检测LINC01060表达水平以诊断宫颈癌的产品至少包括的一对特异扩增LINC01060的引物如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。


4.一种用于诊断宫颈癌的工具,其特征在于,所述工具能够通过检测样本中LINC01060的表达来诊断宫颈癌。


5.根据权利要求4所述的工具,其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员:马成斌刘平张文璎吴琼蔚刘彧
申请(专利权)人:上海市长宁区妇幼保健院
类型:发明
国别省市:上海;31

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